1、1实验一 紫外分光光度法测定维生素 C 片中的 VC 含量一、实验目的1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法3掌握紫外分光光度法测定水中维生素 C 含量的原理与分析条件的选择。二 、实验原理维生素 C 是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。人体不能自身制造 Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入 Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的 Vc。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。 维生素 C 属水溶性维生素，分子式 C6H8O6。分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下： OOHOOHHOHO
2、它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。维生素 C 分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。根据维生素 C 在稀盐酸溶液中，Vc 吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值 A 的大小与维生素 C 的浓度 c 的大小成正比，符合郎伯 比尔定律：2A= bc其中 A 为吸收度；c 为试样中维生素 C 的浓度，mol L-1；b 为吸收池厚度，cm； 为摩尔吸收系数，Lmol -1cm-1。若在最大吸收波长下，首先绘制出维生素 C 在最大吸收波长下的标准曲线，然后在相同条件下测定出吸光度 A，由测得的吸光度
3、A 在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。三、实验仪器与试剂1仪器 TU1810 型紫外分光光度计。电子天平 1 台，研钵 1 个，50mL 容量瓶 7 只和 500mL 容量瓶 1 只 , 10mL 移液管 2 支，100 mL、1000 mL 烧杯 2 只。2试剂 维生素 C 标准品 (抗坏血酸)，市售维生素 C 含片（100mg/片），冰醋酸，蒸馏水。四、实验步骤1. 配制维生素 C 标准贮备液 500mL(浓度约为 1.510-4mol/L):称取约 0.0132g 维生素 C 标准品于 100mL 的烧杯中，用超声波助溶后定容于 500mL 容量瓶中，摇匀，配成贮备液。
4、2. 配制标准系列：分别吸取上述贮备液 1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL 于 50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容。3. 确定最大吸收以蒸馏水为参比，在 320220nm 范围内测出维生素 C 的吸收光谱，并确定最大吸收波长。4. 绘制标准曲线以蒸馏水为参比，用上述标准系列溶液在 处分别测出吸光度，并绘制max标准曲线。5样品测定取 3 片 Vc 片剂研细,准确称取 0.02g 于 100mL 烧杯中,以去离子水稀释至500mL。移取样品溶液 5.00mL 于 50mL 容量瓶中,定容。在 处测吸光度。max3五、实验结果和讨论1. 绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。2. 以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线图。3. 在标准曲线的纵坐标上找到试液的吸光度，然后在横坐标处查得相应 VC的浓度。4. 计算维生素片剂中 VC 的含量。六、注意事项1. 维生素 C 会缓慢氧化成脱氢抗血酸，所以每次实验时必须配制新鲜溶液，并滴加几滴醋酸。2. 使用石英比色皿。3. 实验结束时，先关氘灯，再关主机电源开关。七、思考题1. 具有哪些结构特征的有机物常在紫外光区有吸收?2. VC 结构中有哪些生色团？那些助色团？
