1、1.2.1 啶虫脒/羧甲基壳聚糖 -海藻酸钠凝胶球的制备 配制一定浓度的海藻酸钠溶液,加入吐温 80 乳化剂 50 mL,乳化 5 min,按比例 13 加入羧甲基壳聚糖和啶虫脒混合物,混合后海藻酸钠的浓度为 3%,啶虫脒的浓度为 1%,制成 100 mL 悬浮液。该悬浮液用 5 mL 注射器(8# 针头)滴入磁力搅拌下滴入 100 mL 氯化钙溶液中,再将 25 mL 1%的戊二醛倒入与其交联,40交联 50 min 后,去除交联液,用 100 mL 去离子水洗涤凝胶球数次,常温下干燥至恒定质量,得黄色凝胶球。2 海藻酸钠/壳聚糖微胶囊的制备及其影响因素2.1 制备原理薛伟明等6通过理论分析
2、与试验研究,认为 Ca2+引起海藻酸钠凝胶机理为:1 个 Ca2+与海藻酸钠分子链段中 2 个 GG 片段通过 4 个配位键形成配合物 ,即“蛋格(Egg-box) ”结构(图 1),其中,由 G 单元的 5-COO-和 2-OH 参与配位键形成。由于壳聚糖分子链上有大量的伯氨基,海藻酸钠的分子链上有大量的羧基,在静电力作用下,可以通过正、负电荷吸引形成聚电解质膜(图 2)。李沙等 7通过差示扫描量热法(DSC)探讨ACA 的成型机理,证实各组分不是以各自独立的形式存在于样品中,而是发生了静电相互作用,以新的相互结合状态存在;Ribeiro 等8研究表明海藻酸钠羧基和壳聚糖氨基之间的静电相互作
3、用是复杂结构的主要力量。2.2 制备方法制备海藻酸钠胶珠最常用的方法是锐孔-凝固浴法9-11,但该法受针头直径和海藻酸钠溶液黏度的限制,制备的凝胶珠粒径较大,为了克服这些缺点,出现了一些改进技术。如静电液滴生成技术12-14, 在针头和凝胶浴之间形成静电场 ,从而增加了电场力,可更容易地克服针孔内壁的黏滞阻力及液滴自身的界面张力,由此得到颗粒更小的凝胶珠。此外,还有离心喷雾造粒法15、喷雾法与高压静电场结合法16、乳化法17-19 、气体搅拌乳化( 内源凝胶)与膜乳化法20等。聚电解质络合原理制备海藻酸钠/壳聚糖微胶囊(ACA),是以海藻酸钠(钙)胶珠作为微胶囊的内核,在外部要包覆聚合物膜层才
4、能最终形成微胶囊。其方法可分为一步法、两步法和复合法。2.2.1 一步法 主要有 2 种方式:一种方式是将壳聚糖和氯化钙的混合溶液直接滴入海藻酸钠溶液中,最终形成含海藻酸钙凝聚层、壳聚糖/海藻酸钠络合层、壳聚糖沉淀层 3 层膜,内部是液态的微胶囊。王娜等21采用此法制备 ACA,固定化木聚糖酶,使酶的热稳定性、重复操作稳定性和贮藏稳定性有了明显提高。另一种方式是反向操作,即将海藻酸钠溶液滴入壳聚糖和氯化钙的混合溶液中形成微胶囊,这种方式较为常用。付加雷等22用此法制备干扰素-tau(IFN-tau) 微囊,得到的载药微囊外层较致密、内芯较疏松,最外层是沉淀出的壳聚糖外层,一般不含 IFN-ta
5、u;中层是均匀分散有 IFN-tau 的壳聚糖/海藻酸钠的复合膜;内芯是均匀分散有 IFN-tau 的海藻酸钙芯料。陶呈斐等23用此法制备酮咯酸氨丁三醇海藻酸钠微囊,优化工艺条件后制得的微囊包封率达到 90%,载药量 44%,在水中的释药行为符合 Higuchi 方程。熊何健等24对茶多酚的包埋;李强等25对八角茴香油的包埋;程超等26 对鸭跖草黄酮类物质的包埋,均采用这种方式制备海藻酸钠/壳聚糖微胶囊。2.2.2 两步法 类似于传统的 APA 微胶囊的制备方法,首先将海藻酸钠溶液滴到氯化钙溶液中钙化成核,然后分别用壳聚糖、海藻酸钠溶液进行包覆成膜27。陈爱政等28 用 ACA固定化细胞发酵木
6、糖醇;付颖丽等 29用 ACA 固定化培养大肠杆菌 ;张杰等30用 ACA 固定化克雷伯氏杆菌;白雪莲等31用 ACA 固定化苹果酒酵母 ;熊鹰等32用 ACA 包埋人卵巢癌细胞;张武杰等33用 ACA 包埋载间充质干细胞 ;刘利萍等34用 ACA 包埋姜油树脂,而他们制备 ACA 的方法均采用两步法。2.2.3 复合法 复合法是在一步法和两步法基础上建立起来的,先制备海藻酸钠/壳聚糖微胶囊,然后再以双功能团分子(常用戊二醛、 1,6-己二异氰酸脂或苯四甲酸二酐溶液 )对微胶囊的表面进行修饰,形成壳聚糖和双功能团分子的交联层35。孙万成等 36-37研究了 ACA 作为固定化磷脂酶 A1 的载体,加入 1%戊二醛在 4环境进行表面修饰 10 h,壳聚糖氨基可与戊二醛基形成 shiff 氏碱,在胶囊表面形成一层致密的保护膜。
