1、17640 无机磷40.1 磷钼蓝分光光度法40.1.1 适用范围和应用领域本法适用于海水中活性磷酸盐的测定。40.1.2 方法原理在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于 882 nm 波长测定吸光值。40.1.3 试剂及其配制 除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。40.1.3.1 硫酸溶液：c(H 2SO4)=6.0 mol/L在搅拌下将 300 mL 硫酸(H 2SO4， =1.84 g/mL)缓缓加到 600 mL 水中。40.1.3.2 钼酸铵溶液溶解 28 g 钼酸铵(NH 4)6Mo7O244H2O于 200 mL 水中。溶
2、液变混浊时，应重配。40.1.3.3 酒石酸锑钾溶液溶解 6 g 酒石酸锑钾(C 4H4KO7Sb H2O)于 200 mL 水中 ，贮于聚乙烯瓶中。溶液变1混浊时，应重配。40.1.3.4 混合溶液搅拌下将 45 mL 钼酸铵溶液(40.1.3.2) 加到 200 mL 硫酸溶液(40.1.3.1)中，加入 5 mL 酒石酸锑钾溶液(40.1.3.3)，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。40.1.3.5 抗坏血酸溶液溶解 20 g 抗坏血酸(C 6H8O6)于 200 mL 水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在 4避光保存，可稳定 1 个月。40.1.3.6 磷酸盐标准贮备溶液：
3、p=0.300 mg/mL称取 1.318 g 磷酸二氢钾(KH 2PO4，优级纯，在 110115烘 12 h)溶于 10 mL 硫酸溶液(40.1.3.1)及少量水中，全量转入 1 000 mL 量瓶，加水至标线，混匀，加 1 mL 三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液 1.00 mL 含 0.300 mg 磷。置于阴凉处，可以稳定半年。40.1.3.7 磷酸盐标准使用溶液： p=3.00 g/mL量取 1.00 mL 磷酸盐标准贮备溶液(40.1.3.6)至 100 mL 量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液 1.00 mL 含 3.00 g 磷。有效期为一周。4
4、0.1.4 仪器及设备分光光度计，5 cm 测定池。量筒：10，50，100，250，500 mL。量瓶：100，1 000 mL。具塞量筒：50 mL。刻度吸管：1，5，10 mL。自动加液器：1 mL。一般实验室常备仪器和设备。40.1.5 分析步骤40.1.5.1 绘制标准曲线40.1.5.1.1 量取磷酸盐标准使用溶液 (40.1.3.7)0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00 mL 于 50 mL 具塞量筒中，加水至 50 mL 标线，混匀。各浓度依次为0，0.030，0.060，0.120，0.180，0.240 mg/L。17740.1.5.1.2 各加 1.0 m
5、L 混合溶液(40.1.3.4) ，1.0 mL 抗坏血酸溶液(40.1.3.5)，混匀。显色5 min 后，注入 5 cm 测定池中，以蒸馏水作参比，于 882 nm 波长处测定其吸光值 Ai。其中零浓度为标准空白吸光值 A0。40.1.5.1.3 以吸光值(A i-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度 (mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。40.1.5.2 水样测定量取 50 mL 经 0.45 m 微孔滤膜过滤的水样至具塞量筒中，按 40.1.5.1.2 步骤测定吸光值 Aw。同时量取 50 mL 水按相同步骤测定分析空白吸光值 Ab。40.1.6 记录与计算据(A w-Ab)值在标准曲线上查
6、得水样的磷酸盐浓度(mg/L)，或用标准曲线性回归方程计算。将所得数据记入附录 A 中表 A15 及表 A1 中。40.1.7 精密度和准确度40.1.8 注意事项40.1.8.1 水样采集后应马上过滤，立即测定。若不能立即测定，应置于冰箱中保存，但也应在 48 h 内测定完毕。40.1.8.2 过滤水样的微孔滤膜，需用 0.5 mol/L 盐酸浸泡，临用时用水洗净。40.1.8.3 硫化物含量高于 2 mg/L-S 时干扰测定。此时，水样用硫酸酸化，通氮气 15 min，将硫化氢驱去，可消除干扰。40.1.8.4 磷钼蓝颜色在 4 h 内稳定。40.2 磷钼蓝萃取分光光度法40.2.1 适用
7、范围和应用领域适用于测定海水中的活性磷酸盐。检出限：0.2 g/L。40.2.2 方法原理在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，以抗坏血酸还原为磷钼蓝，用醇类有机溶剂萃取，于 700 nm 波长处测定吸光值。40.2.3 试剂及其配制除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水或等效纯水。40.2.3.1 硫酸溶液：1+2在搅拌下将 30 mL 硫酸(H 2SO4， =1.84 g/mL)缓缓加到 600 mL 水中。40.2.3.2 钼酸铵溶液溶解 28 g 钼酸铵(NH 4)6Mo7O244H2O于 200 mL 水中。溶液变混浊时，应重配。40.2.3.3 酒石酸锑钾溶液溶
8、解 6 g 酒石酸锑钾(C 4H4KO7Sb H2O)于 200 mL 水中，贮存于聚乙烯瓶。溶液变1混浊时，应重配。40.2.3.4 混合溶液搅拌下将 45 mL 钼酸铵溶液(40.2.3.2) 加到 200 mL 硫酸溶液(40.2.3.1)中，加入 5 mL 酒石酸锑钾溶液(40.2.3.3)，贮存于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。40.2.3.5 抗坏血酸溶液溶解 20 g 抗坏血酸(C 6H8O6)于 200 mL 水中，贮于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在 4避光保存，可稳定一个月。40.2.3.6 磷酸盐标准贮备溶液： p=0.300 mg/mL178称取 1.318 g 磷酸二氢钾
9、(KH 2PO4，优级纯，在 110115烘 12 h)溶于 10 mL 硫酸溶液(40.2.3.1)中，全量转入 1 000 mL 量瓶，加水至标线，混匀，加 1 mL 三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液 1.00 mL 含 0.300 mg 磷。40.2.3.7 磷酸盐标准使用溶液： p=3.00 g/mL移取 1.00 mL 磷酸盐标准贮备溶液(40.2.3.6)于 100 mL 量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液 1.00 mL 含 3.00 g 磷。有效期为一周。40.2.3.8 正己醇CH 3(CH2)5OH40.2.3.9 无水乙醇(C 2H5OH)4
10、0.2.4 仪器及设备分光光度计，5 cm 测定池；量筒：10，50，100，250 mL；量瓶：100，1 000 mL；具塞量筒：25 mL；刻度吸管：1，5，10 mL；自动加液器：5 mL；锥形分液漏斗：500 mL；一般实验室常备仪器和设备。40.2.5 分析步骤40.2.5.1 绘制工作曲线40.2.5.1.1 取 5 个 500 mL 锥形分液漏斗，加入 250 mL 水，分别移入0，0.25，0.50，1.00，2.00 mL 磷酸盐标准使用溶液(40.2.3.7) 。系列的相应浓度为0，3.00，6.00，12.0，24.0 g/L-P。40.2.5.1.2 加 5 mL 混
11、合溶液(36.2.3.4)，5 mL 抗坏血酸溶液(40.2.3.5) 混匀，放置 10 min。加入 25.0 mL 正己醇(40.2.3.8)，振荡 2 min，静置 10 min，弃去水相，把有机相放入25 mL 具塞量筒中，加 1.0 mL 无水乙醇(40.2.3.9) ，混匀，放置 5 min。将萃取液注入 5 cm测定池中，以正己醇(40.2.3.8)作参比，于 700 nm 波长处测定吸光值 Ai。其中 A0 为零浓度的标准空白吸光值。40.2.5.1.3 以吸光值(A i-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度( g/L)为横坐标，绘制工作曲线。40.2.5.2 水样测定量取 250
12、 mL 经 0.45 m 滤膜过滤的水样，于 500 mL 锥形分液漏斗中，按 40.2.5.1.2步骤测定水样吸光值 Aw。同时量取 250 mL 水于 500 mL 锥形分液漏斗中，按 40.2.5.1.2 步骤测定分析空白吸光值 Ab。40.2.6 记录与计算将测定数据记入附录表 A15 中。据(A w-Ab)值在工作曲线上查得水样中活性磷酸盐浓度( g/L-P)。亦可用工作曲线的线性回归方程计算。40.2.7 精密度和准确度三个实验室测定同一天然海水加标样品，相对误差：1.8%；重复性( r)：0.015 g/L；重复性相对标准偏差：2.1%；再现性 (R)：0.13 g/L；再现性相
13、对标准偏差：2.4%。40.2.8 注意事项40.2.8.1 硫化物含量大于 1 mg/L-S 时，对本方法有明显的影响。此时，水样酸化后，通氮气 10 min，可明显除去硫化物干扰。40.2.8.2 砷酸盐含量大于 0.5 mg/L-As 时，对本方法有明显的影响。通常海水中砷含量约 0.003 mg/L-As，其影响可忽略不计。40.2.8.3 硅酸盐含量大于 1.4 mg/L-Si 时，对本方法有影响。河口水和大洋深层水中硅酸盐含量常大于 1.4 mg/L-Si，应进行校正。首先由式(72)，求出硅酸盐增加的吸光值 ASiASi=FSi Si (72)179式中：F Si用本方法测定硅酸盐工作曲线的斜率； Si水样中硅酸盐浓度，mg/L-Si。据( Aw-Ab-ASi)值在测定活性磷酸盐的工作曲线上查得其浓度。
