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土壤中纤维素分解菌的分离实验的具体操作步骤.doc

上传人:tkhy51908 文档编号:7727086 上传时间:2019-05-24 格式:DOC 页数:1 大小:12KB
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1、土壤中纤维素分解菌的分离实验的具体操作步骤:1.土样采集土样采集的方法与本专题课题 2 类似。土样的采集要选择富含纤维素的环境,这是因为在纤维素含量丰富的环境,通常会聚集较多的分解纤维素的微生物。如果找不到合适的环境,可以将滤纸埋在土壤中,过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。2.选择培养选择培养需要的仪器有:250mL 锥形瓶、无菌称量瓶、药匙、1mL 和 10mL 的移液管、天平、摇床、温度计等。培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。在 250mL 锥形瓶中装入 30mL 培养基,用8 层纱布做成瓶塞,将瓶口塞紧,再在瓶塞外包裹两层包装纸(或报纸) ,用线绳扎紧,在121下高压蒸汽灭

2、菌 20min。选择培养的操作:称取土样 20g,在无菌条件下加入装有 30mL 培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上,在 30下振荡培养 12d,至培养基变混浊。此时可以吸取 0.1mL 培养液进行梯度稀释和涂布平板,也可以按课本中所述,重复选择培养的步骤一次,然后再进行梯度稀释和涂布平板。3.刚果红染色法分离纤维素分解菌这一步所需要的仪器有:无菌培养皿、涂布器、1mL 移液管,装有 9mL无菌水的 20mL 大试管,温箱等。培养基的制备参照课本旁栏中的比例 配制。在 500mL 三角瓶中装入 200mL 培养基,在 121下高压蒸汽灭菌 20min。倒平板操作:将灭菌后的固体培养基熔化,按无菌操作的要求,在无菌的培养皿中倒入 1520mL 培养基,凝固后待用。制备菌悬液:按照本专题课题 1 的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释,稀释最大倍数至 106。涂布平板:将稀释度为 10410 6 的菌悬液各取 0.1mL,滴加在平板培养基上,用涂布器将菌液涂布均匀,在 30倒置培养,至菌落长出。每个稀释度下需涂布 3 个平板,并注意设置对照。

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