1、线性 DNA 分子的酶切示意图基因工程测试题一、选择题1已知某种限制性内切酶在一线性 DNA 分子上有 3 个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性 DNA 分子在 3 个酶切位点上都被该酶切断，则会产生 a、b、c、d 四种不同长度的 DNA 片段。现在多个上述线性 DNA 分子，若在每个 DNA 分子上至少有 1 个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性 DNA 分子最多能产生长度不同的 DNA 片段种类数是( )A3 B4 C9 D122下图是将人的生长激素基因导入细菌 B 细胞内制造“ 工程菌”的示意图。已知细菌 B 细胞内不含质粒 A，也不含质粒 A 上的基因。判断下列
2、说法正确的是 ( )A将重组质粒导入细菌 B 常用的方法是显微注射法B将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌C将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒 A 的细菌D目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长3下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达4.将 ada（腺苷酸脱氨酶基因
3、）通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ）A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 adaD、每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有 11 个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（）A、过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B、多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，C、过程构成的重组
4、质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D、应用 DNA 探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达6.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B 用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C 将重组 DNA 分子导入原生质体D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞7.下列关于基因工程的叙述，正确的是: ( )A.基因工程往往以细菌抗药性基因为目的基因B.重组 DNA 的形成和扩增是在细胞内完成的C.基因工程育种能够定向地改造生物性状，快速形成新物种D.限制性内切酶和 DNA 连接酶是构建
5、重组 DNA 必需的工具酶 8下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是()A基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作B基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质C基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作D基因工程完全不同于蛋白质工程9PCR 是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术，下列有关 PCR 过程的叙述，不正确的是( )A变性过程中破坏的是 DNA 分子内碱基对之间的氢键B复性过程中引物与 DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR 与细胞内
6、DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高10.“工程菌”是指（）A用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系B用遗传工程的方法，使同种不同株系的菌类杂交，得到的新细胞株系C用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系D从自然界中选取能迅速增殖的菌类二、非选择题11.为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 (1)获得耐盐基因后，构建重组 DNA 分子所用的限制性内切酶作用于图中的_处，DNA 连接酶作用于_处。(填“a”或“b”)(2)将重组 DNA 分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转
7、化法和_法。(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_技术，该技术的核心是_和_。(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测又要用_方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。12在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：（1）A 过程需要的酶有_。（2）B 过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_。（3）C 过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_。（4）如果利用 DNA 分子杂交原理对再生植
8、株进行检测，D 过程应该用_作为探针。13.图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶 EcoRI、BamHI 的酶切位点，ampR 为青霉素抗性基因，tct R 为四环素抗性基因，P 为启动因子，T 为终止子，ori 为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括 EcoRI、BamHI 在内的多种酶的酶切位点。（1）将含有目的基因的 DNA 与质粒表达载体分别用 EcoRI 酶切，酶切产物用 DNA 连接酶进行连接后，其中由两个 DNA 片段之间连接形成的产物有_、_、三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行。（2）用上述 3 种连接产物与无任何抗药性的原核宿
9、主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。（3）目的基因表达时，RNA 聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。14转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有 Pst、Sma 、EcoR、Apa 等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体 A 时，应选用限制酶，对进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导
10、入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体 A 中含有，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 、 。15.天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是_，用_将淀粉酶基因与载体侵染抗虫基因含 kan 质粒重组质粒土壤农杆菌 含重组质粒土壤农杆菌A构建 导入B培养选择转基因抗虫植株再生植株愈伤组织
11、 离体棉花叶片组织C诱导选择分化D检测拼接成新的 DNA 分子，下一步将该 DNA 分子_，以完成工程菌的构建。(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是_；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用_检测；将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈。请解释该现象发生的原因。(3)如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？(4)微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？16.人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。（1）卵母细胞除从活体输卵
12、管中采集外，还可从已处死的雌鼠_中获取。（2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。 （3）子代大鼠如果_和_，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。17.人体细胞内含有抑制癌症发生的 p53 基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括_和_。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的 p53 基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中
13、用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为_。（3）已知限制酶 E 识别序列为 CCGG，若用限制酶 E 分别完全切割正常人和患者的 p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成_个片段；而患者的则被切割成长度为_对碱基和_对碱基的两种片段。（4）如果某人的 p53 基因部分区域经限制酶 E 完全切割后，共出现 170、220、290 和460 碱基对的四种片段，那么该人的基因型是_( 以 P+表示正常基因，P -表示异常基因)。18.医生对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行治疗。采用的方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用某种病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。(1)该病的治疗运用了基因工程技术，在这个实例中运载体是_，目的基因是_，目的基因的受体细胞是_。(2)将转基因白细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常是由于产生了_，产生这种物质的两个基本步骤是_和_。(3)人的腺苷脱氨酶基因与胰岛素基因相比，其主要差别是_；与大肠杆菌基因相比，其主要特点是_。(4)该病的治疗方法属于基因工程运用中的_；这种治疗方法的原理是_。
