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透析袋使用.doc

上传人:myw993772 文档编号:7516975 上传时间:2019-05-20 格式:DOC 页数:1 大小:23.50KB
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透析袋使用.doc_第1页
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资源描述

1、透析即用半透膜(透析袋)将大分子蛋白质分离出来。在生物大分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品,透析法最简便。技术指标:MWCO( 截留分子量 ),单位:Diatoms 。透析时,小于 MWCO 的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。常用温度:4,升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器,均能提高透析速度。使 用 须 知1 某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。酸(甲酸、乙酸、稀强酸如 5%HCI)

2、,10% 苯酚,30% 双氧水。甲醇、乙醇:浓度小于 5%时,透析功能在,而 MWCO 变化。2 蛋白质吸附量,小于 1ug/克,(以透析袋干重计)。正常使用 PH 值 5-9(可重复使用 )。极限使用 PH 值 2-12(一次性使用 )。3 前处理:煮沸 5 分钟后用蒸馏水 60洗冲 2 分钟,置 4蒸馏水中待用。长期保存液:0。05%-0。1% 叠氮钠,1mMEDTA 或 50%甘油,温度(4 ),使用前以蒸馏水洗净。4 即用型透析袋毋须前处理,使用前用蒸馏水洗净即可。5 透析袋装液时应留 1/3-1/2 空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破(含盐量高的蛋白质溶液透析

3、过夜时,体积增加 50%系正常情况)。6 使用时须戴手套。7 透析效果检查用 1%氯化钡 检查硫酸铵、硫酸钠1%硝酸银 检查氯化钠、氯化钾 /size储存条件: 透析袋可存放于 10-29 度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。

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