1、二、填空题1免疫功能包括( 免疫防御 )、(免疫监视) 和(免疫自稳 )。 2免疫的三大基本功能是(免疫防御),(免疫监视) 和(免疫自稳 )。其中(免疫监视)功能低下,易发肿瘤。 3免疫防御功能异常可导致(感染 )和( 免疫缺陷) 疾病。 1抗原抗体反应的特点有( 特异性 ) 、 ( 比例性 )和( 可逆性 ) 。 2抗原抗体反应的温度一般以( 1540 度 )为宜,最适温度为( 37 度 ) 。3影响抗原抗体反应的环境因素主要有( 电解质 ) 、 (pH )与( 温度 ) 。 4某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在( 4 度 )左右与红细胞结合最好, ( 20% )以
2、上反而解离。5抗原抗体的结合分子间的引力包括( 静电引力 ) 、 ( 范德华力 ) 、 ( 氢键 )和( 疏水作用力)1 根据抗体制备的技术方法不同进行区分,人工制备的抗体可分为( ), ( )和( )三大类型。 2抗血清鉴定的主要内容包括( )、( )、( )、( )等四个方面。3制备特异性免疫血清时,常用( )和( )两种方法去除杂抗体。 4HAT 培养基中三种关键成分是( )、( )和( )。5单克隆抗体的批量生产方法主要有两种( )和( )。1凝集反应的类型分为(直接凝集反应 )和(间接凝集反应 )两种类型。 2. 间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集反应)、( 反向间接凝集反应)、(
3、 间接凝集抑制反应)和(协同凝集反应)四种类型。 3参与凝集反应中的抗原称为( 凝集原),抗体称为(凝集素)试验有(玻片法) 和(试管法 )两种方法。(玻片法),常用的直接凝集 4在间接凝集反应中,正向凝集反应是用( 抗原 )致敏载体以检测标本中相应的 ( 抗体 );而反向间接凝集反应是用( 抗体 )致敏载体以检测标本 中相应的( 抗原 )。 5间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的( 不完全抗体 );可用于输血前的(交叉配血)试验。 1免疫沉淀反应是( 可溶性抗原 )与(相应抗体 )特异性结合,在适当条件下出现沉淀物 的现象。 2棋盘格法,又称方阵法, ( 抗原 )和( 抗体 )同
4、时稀释,可一次完成 ( 抗原 )和( 抗体 )的滴定,并找出最适比。 3单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量( 抗体 )的( 凝胶 )内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环) 。 4Maneini 曲线适用于大分子抗原的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与( 扩散环直径的平方 )呈线性关系,常用(普通 )坐标纸作图。5Fahey 曲线适用于小分子抗原的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与( 抗原浓度的对数 )呈线性关系,常用( 半对数 )坐标纸作图。6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近
5、抗原孔指示( 抗体含量)较大;靠近抗体孔则指示( 抗原含量较高 ) ;不出现沉淀线则表明( 无对应的抗原和抗体 ) 7.免疫电泳是将(电泳 )与( 双向免疫扩散 )相结合的一种免疫化学分析技术。 8.火箭电泳是( 电泳 )与(单向免疫扩散 )相结合的免疫技术。 9.对流免疫电泳是(电泳 )与( 双向免疫扩散 )相结合的免疫技术。 10.对流免疫电泳中,抗体流向负极,是因为( 抗体分子量大 ) ,( 电泳 )速度小于 ( 电渗 )速度。 1l.免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成(免疫复合物 ) ,使反应液出现( 浊度 ) ,并可根据其推算出抗原或抗体的量。 12.根据 Ray
6、leigh 方程,散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成( 反)比,与粒子的浓度和体积成(正)比。 13.速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的( 最快时间段 )的散射信号值,此时的散射信号最强,速率散射信号值最大。 14.免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒,其直径应稍(小于)入射光波长,目前多用(200)nm 的胶乳颗粒。 15.免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持(抗体)过量。为此,掌握抗体的浓度是关键。 16.凝胶内沉淀试验包括(单项扩散试验)和(双向扩散试验。 17.抗原抗体最适比的基本测定方法为( 抗原稀释法 ) 和( 抗体稀
7、释法 ) 。 1标记免疫技术的示踪物有(酶)、(放射性核素) 、( 荧光素)、 (化学或生物发光剂)、(胶体金) 。 2放射免疫技术可分为(放射免疫分析)和( 免疫放射分析) 两种基本类型。 3采用 125I 制备标记物的基本原理是以放射性碘原子置换被标记物分子中(酪胺酸或酪胺残基)或(组胺残基)上的氢原子。 1荧光免疫技术的主要类型包括(荧光抗体染色技术)和( 荧光免疫测定技术。 2荧光物质有(荧光素)和( 镧系稀土元素)。 3荧光抗体染色技术可分为(荧光免疫显微技术)和(流式荧光免疫技术)。 4镧系稀土元素标记物制备的螯合剂有(多羧基酸类螯合剂)、(B-二酮体类螯合剂)、(BCPDA) 和
8、(菲洛林) 5荧光免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的荧光标记物而分为(均相)和(非均相)两种类型。 6非均相荧光免疫测定法包括(时间分辨荧光免疫测定)和(荧光酶免疫测定)。 7均相荧光免疫测定法包括(荧光偏振免疫测定)和(底物标记荧光免疫测定)。 8荧光素标记抗体的方法有(搅拌标记法)和( 透析标记法) 。 l.膜载体酶免疫测定技术的类型主要有(斑点-ELISA)、( 免疫渗滤试验)、(免疫层析试验) 和(免疫印迹法) 2.免疫印迹法是由(SDS-PAGE),(蛋白质转印) 和酶免疫测定)三项技术结合而成。 3.酶免疫组织化学技术常用的酶有(HRP)、(AP)和(GOD )。
9、 4EIJSA 方法类型主要有(双抗体夹心法)、( 间接法) 、(竞争法)和( 捕获法)。 5ELISA 中三种必要试剂是(固相的抗原或抗体)、(酶标记的抗原或抗体)和( 酶的反应底物) 。 6制备酶结合物常用的方法有(戊二醛交联法)和(过碘酸盐氧化法)。 7在稀释液和洗涤液中加入(吐温一 20),可以去除非特异性吸附。 8均相酶免疫测定技术的类型主要有(酶增强免疫测定技术)和(克隆酶供体免疫分析技术)。 9非标记抗体酶免疫组织化学技术的类型主要有(酶桥法)、(PAP法双桥)、( PAP 法) 和(APAAP 法)。10. (SDS-PAGE), (蛋白质转运 )和(酶免疫测定) 三项技术结合
10、而成形成免疫印迹法。 11.常用于 HRP 标记抗( 戊二醛交联法)和( 过碘酸钠法) 。1化学发光免疫技术根据发光方式不同分为(化学发光酶免疫分析)、(化学发光免疫分析)和( 电化学发光免疫分析)。 2根据形成激发态分子的激发能相可将发光分为三种类型(光照发光)、(生物发光) 和(化学发光),发光剂分为(荧光素生物发光剂)和(化学发光剂)二种。 3HRP 常用的发光底物为(鲁米诺);AIJP 常用的发光底物为(AMPPD)和( 4 一 MUP) 4发光酶免疫分析的技术要点包括(抗原抗体反应)、( 标记物游离部分结合部分分离)和(酶促发光反应及检测)三个过程。 5发光酶免疫分析常用的标记酶有(
11、AIJP) 和(HRP),根据酶促反应底物不同,发光酶免疫分析可分为(荧光酶免疫分析)和( 化学发光酶免疫分析)。 6电化学发光免疫分析是( )和( )相结合的产物。它的标记物的发光原理与一般化学发光不同,是一种在电极表面由( )引发的特异性化学发光反应,实际上包括了( )和( )两个过程。ECL 通过( )启动发光反应,而 CL 是通过( )启动发光反应。 1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是(BCNHS ) 。 2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较 BHZ 宽的活化生物素是(BCHZ) 。 3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤 N7 位氨基结合的
12、是(光生物素) 。 4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是(生物素化的大分子生物活性物质(如抗原、抗体)),另一种是(标记材料(如酶)结合生物素后制成的标记 物) 。 5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是(酶) ,异硫氰酸荧光素(FITC))和(胶体金)1金免疫技术主要有(金免疫组织化学染色技术)和(金免疫测定技术),前者包括(免疫金(银) 光镜染色技术)和(免疫 金电镜染色技术 );后者包括(斑点金免疫渗滤试验)和(斑点金免疫层析试验)等。 2免疫金是指(胶体金与抗原(抗体)的结合物,在免疫组织化学染色技术中,习惯上称之为(金探针) 3斑点金免疫层析试验方法学类型有(双抗体夹心法)、( 竞
13、争法)和(间接法) 。 4渗滤装置是斑点金免疫渗滤试验试剂盒中主要组成部分之一,由(塑料小盒) 、 (吸水垫料)和(点加了抗原或抗体的硝酸纤维素膜片)三部分组成。 5斑点金免疫渗滤试验试剂盒由(渗滤装置) 、(胶体金标记物)和(洗涤液)组成。 6用于电镜的免疫金法可分为(包埋前染色)和( 包埋后染色) 两大类。 7免疫金电镜染色技术包括(标本包埋)、( 免疫组化染色) 两个主要步骤。 8为了消除待测血清标本中(非特异性 IgG)的干扰,斑点金间接免疫层析法测抗体常设计成(反流,免疫层析法) 1.用丙酮做固定剂的抗原是(免疫球蛋白) ;用 1%聚甲醛做固定剂的抗原是(激素) ;用 10%甲 醛做
14、固定剂的抗原是(类脂质) ;用95%乙醇做固定剂的抗原是(蛋白质) ;用四氯化磺做固 定剂的抗原是(酶) 。 2.免疫染色对特殊标本的进一步处理常用 (冰冻切片)和(石蜡切片)法。 3.免疫组化染色后,阳性细胞的染色分布有三种类型,分别是(胞质型) 、 (细胞核型)和 (细胞膜表面型) 。 4.酶免疫组化技术中最常用的酶有(HRP) 、 (ALP)及(葡萄糖氧化酶) 。 5.免疫电镜标本的制备主要有(非包埋法免疫染色) 、 (包埋前免疫染色)和(包埋后免疫染色)三种。 6.免疫组化中最常用的制片方法是(蛋白酶消化法)和(非特异吸附法) 。 1PBMC 包括(淋巴细胞)和(单核细胞) 。 2在反
15、相溶血空斑试验中,每一个空斑代表一个(分泌 Ig 的细胞) 。3B 细胞表面特异的标志是(SmIg) 。 4常用的测定淋巴细胞活力的方法是(台盼蓝染色法) 。 5淋巴细胞转化情况的判定方法有(形态学方法) 、 (HTdR 掺入法)和(MTI“检测法) 。 6淋巴细胞转化试验应用的同位素是(3 H) ,细胞毒试验应用的同位素是(51Cr ) 7分离外周血白细胞常用的方法是(自然沉降法)和(聚合物加速沉降法) 。 8去除白细胞悬液中残留红细胞的常用方法有(无菌蒸馏水低渗裂解法)和(083氯化铵处理法) 。9去除单个核细胞悬液中单核细胞的常用方法有(黏附去除法)和(羰基铁粉吞噬去除法) 。 10检测
16、 T 细胞数量的花环技术包括(E 花环试验) (葡萄球菌花环法)和(抗体致敏红细胞花环法);检测 B 细胞数量的花环技术主要有(EA 花环试验)和(EAC 花 环试验) 。 11.淋巴细胞和单核细胞的密度为 (巴细胞和单核细胞的密度为 1.077+0.001) 。 12外周血经 Ficoll 分离液离心后从上到下分为(血清) (粒细胞)及(红细胞)层。 1活化的 TH1 细胞产生的细胞因子主要有(IL2) 、 (IFN)和(IL12) ,而 TH2 细胞主要产生的细胞因子为(IL4) 、 (IL5 )和(IL10) 。 2.细胞因子常用的检测法包括(生物学检测法) 、 (免疫学检测法)和(分子
17、生物学检测法) 。 3.ELISA 测定法测定细胞因子常用(双抗夹心法) 。 1免疫球蛋白根据重链的不同可分为 1IgM,IgG,IgA, IgE 和IgD 五类。 2免疫固定电泳的特点是:周期短、敏感性高、分辨清晰、结果易于分析。 3Ig 中 k/ 比率正常范围是1.22.41流式细胞仪的组成包括(流动室与液流驱动系统) 、 (激发光与光束成形系统)和(细胞信号检测与分析处理系统)三部分。 2流式细胞仪的散射光参数包括(FS)和(SS) 。其中(FS)信号反映细胞的大小,常用于排 除样品中各种碎片对被测细胞的干扰;(SS)信号反映细胞内部结构的形态学信息,常用于区分外周血样品中的淋巴细胞、单
18、核细胞和中性粒细胞。3 (FS)和(SS)组成细胞双信号参数散点图,是流式细胞分析中最常用的测量和显示细胞的方式。 4能对免疫细胞和其他细胞进行快速准确鉴定和分类的技术是(流式细胞术) ,使用的 仪器是(流式细胞仪) ,主要试剂是(荧光标记的单克隆抗体) 。 1.各种自动化免疫分析仪的仪器结构有共同的特点,即主要由主机系统和计算机系统两大部分组成。 2.化学发光免疫分析所使用的标记物根据其参与的化学反应不同,可分为三类:直接参与发光的标记物、以催化作用或能量传递参与发光反应的酶标记物和以能量传递参 与氧化反应的非酶标记物。 1举三种 III 型变态反应常见疾病(SLE), (RA),(肾小球肾
19、炎)。2参与 I 型超敏反应的抗体主要是(IgE ),而细胞是(mast cell)和(basiphils)。 3型超敏反应通过(M )、( NC吞噬补体溶解)和(ADCC )三种方式破坏靶细胞。 1临床上用于检测抗核抗体的方法是(间接免疫荧光检测技术);DNA 抗体方法是(间接),ENA 抗体的方法有(免疫印迹技术/IBT )和 dot-ELISA)等。 2. 可作为 SLE 诊断的特异性标志抗体为抗 dsDNA 抗体、抗 sm 抗体。 3 (自身免疫)是指机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象。如果这种免疫应答对自身组织造成(病理损伤) ,并出现(功能障碍) ,引起临床症状时,称为(自身
20、免疫病) 。 4 (A 族溶血性链球菌)与人心肌间质、心肌和肾基底膜等有共同抗原成分。 5大肠杆菌 O14 型脂多糖与人结肠粘膜有共同抗原,所以与(溃疡性结肠炎有关)有关。 6甲状腺球蛋白、精子、神经髓鞘磷脂碱性蛋白和眼晶体蛋白都属于(隐蔽抗原) 。 1本周蛋白在 PH5.0 的条件下,加热至 ( 40-60 ))时出现沉淀,继续加热( 100 )后重新溶解。 2冷球蛋白是指温度低于(10)时发生自发聚合,达到(04)时沉淀,加温后又可溶解的(Ig) 。3多发性骨髓瘤的免疫学特征为血中和尿中出现 (M 蛋白) ,骨髓中(Ig)比例显著升高。 1DiGeorge 综合征的发病机制主要由于(胚胎期
21、胸腺发育不良)所致。2原发性补体缺陷主要发生补体系统的(C1C9)、调节蛋白) 和膜结合调节蛋白。 3HIV 在分类中是属于 (逆转录病毒 慢病毒)属。 4HIV 基因组为( 两条相同的RNA 单链) 。 5 (体液免疫) 、 (吞噬细胞) 、(补体)缺陷易发生细菌性感染。 6T 细胞免疫缺陷易发生(病毒、真菌、原虫)感染。7X-LA 的发病机制主要由于(Btk 基因突变)所致。 1肿瘤抗原可分为(肿瘤相关抗原)和(肿瘤特异性抗原)两类。 2肿瘤标志物检测的临床意义,归纳起来有(早期普查) 、 (肿瘤诊断)和(监测病情)等方面。 3肿瘤标志物的检测对临床某些肿瘤有重要辅助诊断价值,如:AFP
22、可辅助诊断(肝癌) 可辅助诊断(结肠癌) ,PSA 可辅助诊断 (前列腺癌) 。 4细胞免疫是抗肿瘤免疫的重要机制,参与抗肿瘤免疫的细胞主要有(T 细胞) (B 细胞) 、 (NK 细胞)和(树突状细胞)等。 5根据肿瘤抗原分布的范围,可将其分为(肿瘤特异性抗原)和(肿瘤相关抗原)两大类。 1宿主抗移植物反应根据临床出现症状情况一般分为(超急性排斥), (急性排斥)和( 慢性排斥) 三类。 2. (HLA )是不同个体间进行器官或组织移植时发生排斥反应的重要成分。 3. HLA 三类分子中,、类分子是能发生移植排斥反应的首要抗原,尤其是(HLA-DR) 位点。 4. HLA-A、B、C 和 H
23、LA-DQ、DR 抗原采用(补体依赖的微量细胞毒)试验检测。三、名词解释: 1. 免疫(immunity):机体对“自己”或“非己”的识别,并排除“非己”以保持体内环境稳定的一种生理反应。 2. 免疫防御:机体防御外来病原生物的抗感染免疫,但异常情况下免疫反应过分强烈可 引起超敏反应,或免疫功能过低则表现为易受感染或免疫缺陷病。 3. 免疫监视:体内细胞在增殖过程中,总有极少数由于种种原因而发生突变,这种突变 的或异常的有害细胞可能成为肿瘤,机体的免疫功能可识别并清除这些有害细胞。4. 免疫自稳:正常情况下机体对自身组织成分不发生免疫反应,处于自身耐受状态。 7. 淋巴细胞再循环:外周淋巴器官
24、或淋巴组织中的淋巴细胞经淋淋巴管进入血液循环后,又通过外周淋巴器官或组织中的毛细血管后经内皮小静脉返回到外周淋巴器官或组织中的循环过程。 9. 补体:指存在于正常人和动物血清中辅助抗体溶细胞作用的不耐热具有酶活性的一组糖蛋白。 10. 免疫细胞:凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞。按免疫细胞在体内的作用不同分为三大类:第一类为淋巴细胞,第二类为单核巨噬细胞,第三类为参与免疫应答的细胞,它们参与免疫应答中的某一环节。 11免疫分子:主要是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的蛋白质及小分子多肽物质组成,它们参与机体的免疫反应或免疫调节。 1抗原抗体反应(antigen and ant
25、ibody reaction):是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。它既可以发 生在体内,也可以发生在体外。 6等价带(zone of equivalence): 抗原抗体反应曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围,称为抗 原抗体反应的等价带。在此范围内,抗原抗体充分结合,沉淀物形成快而多。 7带现象(zone phenomenon):在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量,上清液中可测出游 离的抗体或抗原,形成的沉淀物少,不出现可见反应,这种现象称为带现象。 8前带现象(prozone phenomenon):抗原抗体反应当抗体量过时、不出现可见反应,称为前带现象。 9后
26、带现象(postzone phenomenon):抗原抗体反应当抗原量过剩时、不出现可见反应,称为后带现象。 10抗体亲和力(avidity of antibody):是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度,与抗体结合价直接 相关。1移植(transplantation):指健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以代替或补偿机体所丧失的结构和功能的现代医疗手段。 2移植抗原:代表个体特异性的由 MHC 编码的 HLA 是引起排斥反应的同种抗原 3移植排斥反应(transplantation rejection):针对移植抗原产生的引起移植物功能或受者机体损害的免疫应答。
27、 4宿主抗移植物反应(host versus graft reaction, HVGR):宿主针对供体组织或细胞的 HLA 抗原产生的移植排斥反应 5移植物抗宿主反应(graft versus host reaction, GVHR):一定条件下移植物中的过客(免疫)细胞针对移植物产生的排斥反应。 1单克隆抗体(monoClonal antibody,MCAb) :是指仅识别单一抗原表位的 B 细胞杂交瘤产生的同源抗体,具有特 异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。 2佐剂(adjuvant):是指先于抗原或与抗原一起注入机体,能够增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的
28、物质。 3基因工程抗体(genetiC engineel。ing anlibody):是指应用 DNA 重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配,经导人适当的受体细胞后重新表达的抗体,主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。 4嵌合抗体(ChimeriC antibody):又称人一鼠嵌合抗体,是从杂交瘤细胞中分离出鼠源单抗功能性 V区基因,经基因重组与人抗体 C区基因连接成嵌合基因后,插入适当的表达载体中,再共同转染 宿主细胞,表达人一鼠嵌合抗体分子。嵌合抗体保留了单抗对抗原的特异亲和性,又含有人抗体 C 区的成分及其功能。5改形抗体(resh
29、aped antibody,RAb):是应用基因工程技术在嵌合抗体基础上用人抗体可变区的骨架区序列取代鼠源单抗 CDR 以外的骨架区序列,重新构成既有鼠源单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体,该抗体对人体几乎无免疫原性。 6双特异性抗体(13ispeCifiC:antibody,BsAb):又称双功能抗体,它不同于天然抗体,其两个抗原结合部位具有不同 的特异性,可以同时与两种不同特异性的抗原发生结合。 1沉淀反应(precipitation):沉淀反应是指可溶性的抗原和抗体特异性结合后,所形成的复合物以沉淀的形式出现。 2凝胶内沉淀试验(gel phase precipitation):又
30、称凝胶扩散,是将可溶性抗原与相应抗体分别放人凝胶内进行扩散,两者在比例合适的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。 3免疫电泳(immunoelectrophoresis,IEP):是凝胶电泳和凝胶扩散相结合。在电场作用下,位于琼脂凝胶中的抗原样品因各组分的电泳迁移率不同而彼此分开形成不同的区带。电泳结束后,在琼脂板中间所挖的长形槽内加人相应的抗血清,由于经电泳分离后的各种抗原成分在琼脂中呈放射状扩散,而抗体呈直线扩散,因而形成的沉淀线多呈弧状。 4对流免疫电泳(Counter immunoelectrophoresis,CIEP):是在电场作用下的免疫双扩散。抗原向阳极移动,而抗体向阴极移动,在
31、一定时间内,相向移动的抗原和抗体在两孔间相遇,在浓度比例适当处形成沉淀线。 5带现象: 在抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关,当抗原与抗体达到最适比时, 沉淀物形成最多。 如果抗原或抗体极度过剩则无沉淀物形成,这种现象称为带现象。出现在抗原过量时,称为后带。出现在抗体过量时,称为前带。 1滴度(效价) titer:血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应,以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度(效价)。 2凝集反应(agglutination test):凝集反应是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成凝集的现象。现也指颗粒化抗原或抗体与相应抗体或抗原的反
32、应。3直接凝集反应(direCt agglutination test):细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。 4凝集原(agglutinogen:指凝集反应中的抗原。 5凝集素(agglutinin) :指凝集反应中的抗体。 6试管凝集试验(tube agglutination):是在试管内颗粒性抗原与相应抗体直接结合,在一定条件下,会 出现肉眼可见的凝集现象。 7间接凝集反应(indireCt agglutination test):将可溶性抗原(或抗体) 先吸附于适当大小的颗粒性载体表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜的
33、电解质存在的条件下,出现特异性凝集现象称间接凝集反应或被动凝集反应(passive agglutination test)。 1放射化学纯度:指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率,一般要求大于 90%。2比放射性:指单位化学量标记物中所含的放射性强度,也可理解为每分子被标记物平均所挂放射性 原子数目,常用 Ci/g,mCi/mg 或Ci/mmol 等单位表示。 3.放射免疫分析是该类技术最经典的模式。它是以放射核素标记抗原与反应系统中未标记的抗原竞争特 异性抗体的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。四、问答题 1酶免疫技术(enzyme immunoassay,EI
34、A) :是指利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的 一种标记免疫技术。 2封闭(blocking) :是指在抗原或抗体包被 ELISA 板后,用15牛血清白蛋白或 5 20小牛血清等再包被,以防止非特异性吸附。 3异相 EIA(heterogenous enzyme immunoassay):是指在酶免疫测定中,抗原抗体反应后,需分离游离的和与抗原(或 抗体)结合形成复合物的酶标记物,然后对经酶催化的底物显色程度进行测定,再推算 出样品中待测抗原( 或抗体)的含量。 4包被(Coating):是指将抗原或抗体固相化的过程。 5均相酶免疫测定(homogenous enzyme
35、immunoassay):是指抗原抗体反应平衡后,无需分离 F 和B,直接根据反应前 后酶活性的改变进行待检物质的测定。 1发光免疫技术(1uminescence immunoassay):是将发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。这种方法不仅具有发光分析的高灵敏度,而且具有抗原抗体反应的高度特异性,包括光致发光免疫技术和化学发光免疫测定技术。 2化学发光免疫技术(chemiluminescence immunoassay,CLIA):是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。该方法不仅具有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性,而且还具有分离简便、可
36、以实现自动化分析的特点,包括发光酶免疫分析、化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。 3发光(1uminescence):一种物质由电子激发态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射,称为发光。分为光照发光、生物发光和化学发光。 4发光剂(1uminescence reagent):是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物,分为荧光素、生物发光剂和化学发光剂。 5化学发光酶免疫测定(chemiluminescence enzyme immunoassay):采用以催化反应参与发光的酶如 HRP 或 ATJP 作为标记物,标记检测用的抗原或抗体,待测标本与检测试剂进行免疫
37、反应后,形成酶标抗原抗体复合物,结合在复合物上的酶催化其底物发生反应并产生发光效应。 好1.亲和素:亲和素亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵蛋白中提取的一种由 4 个相同亚基组成的碱性糖蛋白,每个亲和素能结合 4 个分子的生物素。 2BA (或 LAB)法是以标记亲和素(或链霉亲和素)直接与免疫复合物中的生物素化抗体连接进行检测。 1免疫金银染色(immunogold silver staining,IGSS):是在金免疫技术基础上发展起来的更为敏感的技术,利用金免疫 技术测定产物上的金颗粒将银离子还原成银颗粒,在金颗粒表面形成一色泽更深的黑色 层,可增强金免疫技术的敏感性。 2胶体金(Coll
38、oidal gold):是金盐被还原成金原子后形成的金颗粒悬液,胶体金颗粒由一个基础金 核(金原子 Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子 (AuCl2-),外层离子层H+则分散在胶体金溶液中,以维持胶体金游离于溶胶问的悬液 状态。 3免疫金(immunogold):是指胶体金与抗原(抗体)的结合物。 4免疫金标记技术(gold。labeled immunoassay):是指利用胶体金颗粒标记特异性蛋白,当这些标记物在相应的 配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,从而进行定性或半定量检测。 1.免疫组化技术是指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,借助
39、可见的 标记物,对相应抗原或抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检验方法。 2.胶体金是氯金酸在还原剂如白磷、维生素 C 枸橼酸纳和鞣酸等作用下,聚合成特定大小的 金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,故称为胶体金。 1PBMC:外周血单个核细胞主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验中最常用的 细胞群,也是进行 T 细胞和 B 细胞分离纯化的重要环节。 2E 花环试验:T 细胞表面有特异性绵羊红细胞(SRBC) 受体,即E 受体。将 T 细 胞与 SRBc 按一定比例混匀,置 4h 至少 2h 或过夜,T 细胞表面的 E 受体能与 SRBC结合 形成以 T 细胞为中心,四周环绕 SR
40、BC 的花环样结构,镜检计数可得总花环(Et)形成 率,亦即 T 细胞的百分率。 3淋巴母细胞转化试验:细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后,细胞出现一 系列的增殖反应,主要表现为胞内蛋白质和核酸合成增加,并发生形态返祖变化,如细胞 变大、胞质增多、胞质出现空泡、核染色质疏松、核仁明显,这种淋巴细胞增殖反应又称 淋巴细胞母细胞转化(1ymphoblast transformation)。 4溶血空斑试验 hemolytic plaque assay):该方法用于检测实验动物抗体形成细胞数目。其基本原理是抗体 形成细胞分泌的 Ig与 SRBc 上的抗原结合,在补体作用下出现溶血反应。方法是将S
41、RBC 与其免疫的小鼠脾细胞、补体及适量琼脂糖液混合倾注平板,或者将吸附有已知抗原的 SRBc与待检 B 细胞、补体及适量琼脂糖液混合倾注平板,温育一定时间,抗体形成细胞 释放的抗体会使周围 SRBc 致敏,并在补体作用下出现肉眼可见的溶血空斑,每一空斑中 央含有一个抗体形成细胞,因此空斑数量即代表抗体形成细胞数。5NBT 还原试验:活化的中性粒细胞与 NBT 一起温育,由于中性粒细胞吞噬杀菌过 程中产生超氧阴离子(O2-),使被吞进细胞内的 NBT 由原来呈淡黄色还原成不溶性的蓝 黑色颗粒,沉积在细胞浆中,称为 NBT 阳性细胞。光学显微镜下计数 NBT 阳性细胞,其 百分率可反映中性粒细胞
42、的杀菌功能。 1. 细胞因子( cytokines) :由机体细胞分泌的小分子蛋白,通过结合细胞表面相应的受体发挥生物学作用。 2. 白细胞介素(interleukin, IL):一组在白细胞或免疫细胞之间相互作用的细胞因子 3. 干扰素:一组诱导细胞抗病毒感染、干扰病毒复制和调节免疫活性的糖蛋白4. 粘附分子:介导细胞间或细胞与胞外基质间相互接触和结合的分子。 1流式细胞术(flow cytometry,FCM):是指借助流式细胞仪,精确、快速地对生物细胞的理化特性和生物 学特性进行多参数定量分析,并对特定细胞群体分选的新技术。 2细胞分选(cell sorting):是指从细胞群体中将选定
43、的细胞分离出来。3List Mode 方式:是指用表格将每一个被测细胞的众多原始数据全部记录下来,形 成数据文件。 4荧光补偿技术(fluorescent compensation):是指利用已知标准样品或根据细胞样品的生物学意义,合理设置 各荧光信号之间的相互补偿值。 1体液免疫(humoral immunity): B 细胞介导的特异性免疫应答。 2M 蛋白(monoclonal protein): 单克隆免疫球蛋白,是 B 淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白; 3. 本- 周蛋白(bence-Jones):尿中游离的免疫球蛋白轻连
44、。 4. 冷球蛋白:一组低温下发生沉淀,加温后又复溶的 Ig。 1. 超敏反应:又称为变态反应, 是指机体对某些抗原初次应答后,再次接受相同抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。 2. 变应原:是指能够选择性地激活CD4Th2 细胞及 B 细胞,诱导产生特异性 IgE 抗体应答,引起变态反应的抗原性物质。 3. 皮试:用少量抗原注射、挑刺或划痕等方法注入到受试者皮肤,用于变应原的检测。 4. 型变态反应(过敏型变态反应):IgE 与变应原的结合导致 IgE 附着的介质细胞脱颗粒,释放生物活性介质,引起腺体分泌亢进,平滑肌收缩,毛细血管扩张。 5. 型变态反
45、应( 免疫复合物)型变态反应:在一定条件下,可溶性抗原抗体复合物沉积于(血管壁)等处所致的全身性或局部性(炎症)反应。1.自身免疫(autoimmunity) 机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象,为生理性免疫应答的一部分。2.自身免疫病(autoimmune disease, AID)因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱,属于病理性免疫应答。 3.抗核抗体(antinuclear antibodies, ANA):抗核酸抗原抗体,是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP) 、DNA、可提取的核抗原(ENA)和 RNA 等作为靶抗原的自身抗体的总称。
46、4.类风湿因子(rheumatoid factor, RF):自身免疫病人体内表达的抗自身变性 IgG 的 IgM 类抗体。 5. 隐蔽抗原:指体内在解剖位置上某些与免疫系统隔绝的成分,如眼组织、精子等。当外伤、手术和感染等情况下,释放并与机体免疫系统接触可以引起免疫应答,导致自身免疫病。 1M 蛋白(monoclonal protein):单克隆免疫球蛋白,是 B 淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白; 2冷球蛋白: 一组低温下发生沉淀,加温后又复溶的 Ig。 3. 本- 周蛋白(bence-Jones):尿中游离的免疫球蛋白轻连。 4
47、. 免疫增殖病(immunoproliferative disease ):LC 异常增殖引起的疾病. 5. 重链病(heavy chain disease):突变的浆细胞产生异常增多的重链或质量不能与 L 链装配的 Ig 重链,血清和尿中 H 链过剩导致的疾病。6. 轻链病(light chain disease):异常的 LC 产生大量的 Ig 的 L 链在肾脏和内脏组织,导致肾损伤和淀粉样病变的疾病。1免疫缺陷(immunodeficiency):由遗传因素或其他原因导致的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全. 2. 免疫缺陷病(immunodeficiency di
48、seases):由免疫缺陷所致的各种临床综合特征的疾病. 3获得性免疫缺陷综合征 (AIDS):,由 HIV 感染引起,因 CD4+T 细胞质和量的缺失,导致细胞免疫功能严重缺陷,临床上以反复机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统退行性变为主要特征。 1肿瘤抗原: 肿瘤在发生、发展中产生的或过度表达的抗原物质。 2. 肿瘤相关抗原:非肿瘤细胞所特有的,正常组织或细胞也存在的抗原,含量在细胞癌变时明显增高。3. 肿瘤特异性抗原:肿瘤细胞所特有的,正常组织或细胞不存在的抗原。4 封闭因子 :一种小分子的多肽,可存在于肿瘤患者的血清中。体外培养时,它可抑制非特异性致有丝分裂因子,如植物血凝素或刀豆素A 对淋巴细胞的转化 四、简答题:1简述移植排斥反应的发生机理。HVGR:1)超急性排斥反应: ABO/Rh 血型抗原,HLA 抗原 2)急性排斥反应: HLA-类类抗原 3)慢性排斥反应:迟发型超敏反应、C 活化或 ADCC引起的血管炎,急性排斥反 应反覆发作引起移植组织的退行性病变。 GVHR: 骨髓、脾脏、胸腺等移植时表现大的供者骨髓等的免疫细胞以受者细胞为抗原产生的免疫应答