1、肥达氏反应的操作规程实验原理本法是以伤寒“O“，“H“；甲、乙、丙副伤寒分别培育，经甲醛处理杀死后，做成菌液供肥达氏应用，用以伤寒的辅助诊断。操作方法1、取康氏试管，排成 57 形式，5 排分别编成 O，H，A，B，C；2、另取大试管一支，加入病人血清 0.25ml，用 4.75ml 生理盐水作 1:20 稀释，取 2.5ml 该稀释血清于每排第一管内分别注入 0.5ml；3、再取 2.5ml 生理盐水把大试管内血清作 2 倍稀释，取 2.5ml 该稀释血清于每排第二管内分别注入 0.5ml，以此类推，每排最后一管加 0.5ml 生理盐水作阴性对照，各稀释度：1/20，1/40，1/80，1/
2、160，1/320。然后于前六管中逐管加入 1:10 稀释的各菌液 0.5ml，各终稀释度：1/40，1/80，1/160，1/320，1/640。4、充分振荡混匀，于 37放置 16-20 小时判定结果。结果判定根据凝集反应的强弱和有无，分别以 4+，3+，2+，1+，-，记录，以呈现(2+)的血清最高稀释度为终点效价。4+：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。3+：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。2+：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物。1+：液体较混浊，可见极少量凝集物。-：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点（与对照管相似）。结果分析）首先应考虑当地正常人效价（正常
3、效价）。一般以单份血清凝集效价：0 效价应达 1：80以上、H 效价应在 1：160 以上，PA 和 PB 应达 1：40 以上方有诊断价值；若病程中第 2 次血清效价比第 1 次高 4 倍以上亦有诊断价值。）由于 H 凝集素在血内保持时间较久，0 凝集素较短暂，所以曾接种过伤寒、副伤寒菌苗者，0 凝集效价在诊断上较重要。）真正的伤寒病人，0 凝集素常较 H 凝集素出现早、但维持时间较短；H 凝集素出现较晚、但效价较高且持续时间较长。）回忆反应：过去曾接种过伤寒、副伤寒菌苗或患过伤寒、副伤寒病，近期又发生感染如流感、肝炎、结核病等，可非特异地产生较高的 H 凝集素和较低的 0 凝集素，此现象称
4、为回忆反应。）若 0 效价高而 H 不高（对正常效价而言），则可能是感染早期或与伤寒杆菌 0 抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。）确诊为伤寒的患者中，约有 10%的患者该试验始终阴性或效价不高，故阴性结果不能排除伤寒的诊断。）采血时间不同，肥达式反应的阳性率也不同。发病第 1 周约为 50%；第 2 周 80%；第 4 周90%以上。恢复期效价最高，以后逐渐下降，直至转阴。一般以双份血清（急性期和恢复期）对比，效价有明显上升者作为新近感染的指征。注意事项 1、应在光亮处观察管底凝集状态，轻轻摇动判定结果，不能剧烈振荡。2、菌液稀释后应及时使用。3、菌液中有摇不散的凝块时，不能使用。4、应在标签载明的有效期内使用。
