1、第十一章 复制一、填空1、将核糖核苷酸顺序信息转变成互补脱氧核糖核苷酸顺序信息的过程称为 。2、复制时 DNA 链合成方向是 。3、参与 DNA 复制的引发体由 和 组成。4、DNA 生物合成时在 链上先合成冈崎片段。二、单项选择题1、合成 DNA 的原料是（ ）AdAMP dGMP dCMP dTMPBdADP dGDP dCDP dTDP CdATP dGTP dCTP dTTP DATP GTP CTP TTP 2、原核生物的 DNA 聚合酶（pol）的叙述正确的是（ ）Apol由 7 种亚基组成Bpol有 53外切核酸酶活性Cpol是复制起始作用的酶Dpol对复制中错误进行校读3、DN
2、A 连接酶的作用正确的是（ ）A不参与 DNA 复制B合成冈崎片段C能去除引物，填补空缺D连接 DNA 双链中单链缺口的两个末端4、冈崎片断的生成是由于（ ）A真核生物有多个复制起始点B拓朴酶的作用C RNA 引物合成不足D随从链的复制与解链方向相反5、参与 DNA 复制的物质不包括（ ）ADNA 聚合酶 B解链酶，拓朴酶C光修复酶 DSSB6、紫外线对 DNA 的损伤主是引起（ ）A碱基置换 B碱基插入C磷酸二酯键断裂 D嘧啶二聚物形成7、有关参与 DNA 复制的物质叙述错误的是（ ）A单链 DNA 结合蛋白（SSB）维持模板单链状态B单链 DNA 结合蛋白（SSB）保护模板C引物酶是依赖
3、DNA 的 RNA 聚合酶D真核生物 DNA 连接酶需 NAD8、在一 DNA 复制体系中，以同位素 32P 标记的 磷酸基 dNTP 为原料合成 DNA，从原代起至少在第几代即可得到两条链均带 32P 标记的子代 DNA链。 （ ）A第二代 B第三代C第四代 D第六代9、DNA 聚合酶（ ）A可从头开始催化 DNA 复制B催化 DNA 新链由 35方向生成C只有模板 DNA 存在才有活性D可使两条 DNA 短链连接为长链10、冈崎片段（ ）A位于先导链上 B合成时模板链要绕成环C由 DNA pol催化合成 D合成起始不需要引物11、复制过程靠什么辩认起点？（ ）AdnaA 蛋白 B解旋酶Cd
4、naB 蛋白 DDNA pol 12、端粒酶具有的活性是（ ）ADNA pol BRNA polC反转录酶 DDNA ase三、不定项选择题（每题至少有一个正确答案）1、有关 DNA 复制的叙述正确的是（ ）A需 DNA 指导的 RNA 聚合酶B需 RNA 指导的 RNA 聚合酶C属半保留复制D需两条单链分别作为模板E需 DNA 指导的 DNA 聚合酶2、有关真核生物染色体 DNA 复制特点正确的是（ ）A冈崎片段较短B复制呈半不连续性C需 DNA 聚合酶 、 参与D可有多个复制起点E为半保留复制3、关于 RNA 引物正确的是（ ）A以游离 NTP 为原料聚合而成B以 DNA 为模板合成C在复
5、制结束前被切除D由 DNA 聚合酶催化生成E为 DNA 复制提供 3OH4、DNA 聚合酶催化的反应包括（ ）A催化引物 3OH 与 dNTP 的 5P 反应B催化引物生成C切除引物和突变的 DNA 片段D切除复制中错配的核苷酸E催化 DNA 延长中 3OH 与 dNTP 的 5P 反应5、在 DNA 合成过程中（ ）ADDDP是主要复制酶BDDDP是主要复制酶CDDDP是主要复制酶DDNA 延伸方向是 35EDNA 延伸方向是 53四、名词解释或简答2、半保留复制3、冈崎片段4、反转录5、半不连续合成五、论述题1、 试述原核细胞（大肠杆菌）DNA 复制的过程。2、 何谓反转录？试述反转录的过
6、程及发现的意义。参考答案一、填空 1、反转录 2、53 3、引发前体 引发酶 4、随丛二、单项选择题1、C 2、C 3、D 4、D 5、C 6、D 7、D 8、A 9、C 10、B 11、A 12、C三、不定项选择题1、A C D E 2、A B D E 3、A B C E 4、A C D E 5、C E 四、名词解释及简答 1、答：DNA 复制时，亲代的每一条 DNA 单链均可作为模板按碱基互补原则合成一条新链，一条来自亲代的旧链与一条新链以氢键相连，形成一子代双链 DNA。由于两子代分子中各有一条链来自亲代，而各有另一链新生成，所以称为 DNA 的半保留复制。2、答：复制过程中，随从链上合
7、成的一些不连续的 DNA 片断，称为冈崎片段。3、答：以 RNA 为模板，dNTP 为原料，在反转录酶催化下合成 DNA 的过程。4、答：DNA 复制时，前导链合成是连续进行，随从链合成时是不连续的，先合成一些冈崎片段，再将各片段连接成为一条长链。所以总体上讲，DNA 复制是半不连续合成。五、论述题（答案要点）1、答：（1）起始阶段a解链。拓朴异构酶作用下使 DNA 拓朴构象发生变化；解链酶作用使DNA 双螺旋打开成为两条单链，同时单链结合蛋白结合在 DNA 单链上保护单链 DNA，使之免受核酸酶水解。b引发。前导链在引物酶作用下以 NTP 为原料合成一段短 RNA 引物；随从链上、引发前体沿
8、随从链的模板顺复制叉移动并连续与引物酶联合并解离，从而在不同部位引导引物酶催化合成 RNA 引物。（2）延长阶段DDDP 以 DNA 为 模 板 、 dNTP 为 原 料 在 RNA 引 物 3 端 上 ， 从 5 3方向在前导链上连续催化合成 DNA 单链，在随从链上催化合成不连续的冈崎片段，片段连接前方片段时 DDDP Pol切除 RNA 引物，并催化片段延伸，填补空隙。（3）终止阶段aDNA 连接酶将随从链上延伸的冈崎片段焊接成 DNA 长链。b进入终止区，解链酶部抑制，将复制终止。拓朴异构酶将 DNA 分子引入超螺旋。2、答：以 RNA 为模板，dNTP 为原料，在反转录酶作用下，合成
9、 DNA 的过程。过程： 模板 RNA引物（tRNA 色氨酸 ） RNADNAdNTP 杂交体DNA DNARNA 模板意义：丰富和发展了生物学中心法则；发现了癌基因、原癌基因，推动了癌基因表达产物的研究，进一步阐明了细胞生长调控及肿瘤发病机理；建立了 cDNA 文库。第十二章 转录一、填空题1、hnRNA 转变为 mRNA 过程中，要切除 连接 。2、存在于核糖体中的 RNA 是 。3、3端有聚 A 尾巴的真核生物 RNA 是 。4、DNA 转录产物延长方向是 。5、RNA 聚合酶由 和 构成全酶。二、单项选择题1、识别转录起始点的是( )A 因子 B核心酶C聚合酶 亚基 D 因子2、现有一
10、 DNA 片段顺序为 3ATTCAG5模板链、5TAAGTC3编码链，生成的 RNA 序 列为( )A5GACUUA3 B5AUUCAG3C5UAAGUC3 D5CTGAAT33、不对称转录是( )A双向复制后的转录B同 一 单 链 DNA 模 板 转 录 时 可 以 5 3 延 长 或 从 3 5 延 长 C不同基因的模板链并非永远在同一 DNA 单链上D转录经翻译生成多肽中的氨基酸含有不对称碳原子4、原核生物中 DNA 指导的 RNA 聚合酶的核心酶的组成是( )A 2 B 2C 2 D5、原核生物参与转录起始的酶是( )A解链酶 B引物酶CRNA 聚合酶全酶 DRNA 聚合酶核心酶6、在
11、真核生物中，经 RNA 聚合酶催化产生的转录产物是( )AmRNA 前体 B18SrRNAC28SrRNA DtRNA 前体7、真核生物中 tRNA 和 5SrRNA 的转录由下列哪种酶催化( )ARNA 聚合酶 BRNA 聚合酶CRNA 聚合酶全酶 DRNA 聚合酶8、 因子功能是( )A结合阻遏物于启动区域B增加 RNA 合成速率C释放结合在启动子上的 RNA 聚合酶D参与转录的终止过程9、原核生物以 RNA 聚合酶结合到 DNA 的启动区作为转录起始的，对启动区的研究发现，多数 操纵子有一组 5-TTGACA-3序列，它一般在转录起始区的( )A+35bp 区 B-35bp 区C+10b
12、p 区 D-10bp 区10、不依赖 因子转录终止，往往由转录出的 RNA 产物形成发夹结构来终止转录。下列 DNA 序 列中，转录产物能形成发夹结构的是( )ATTTCCAAGATCAAGGGBCTCGAGCCTACCCCTCCACTGGCTTAGTCAGAGDGCCCCCATAAGGGGGC11、真核生物 tRNA 的成熟包括( )A戴帽 B加 polyA 尾C核糖甲基化 D碱基甲基化三、不定项选择题（至少有一个答案是正确的）1、关于原核生物转录终止的叙述错误的是( )A是随机进行的B要全酶 亚基参加C如基因末端含 G-C 丰富的回文结构则不需要 亚基参加D如基因末端含 A-T 丰富的回文
13、结构则对转录终止最为有效 E需要 因子以外的 ATP 酶2、关于断裂和剪接的叙述错误的是( )A是转录后核蛋白体 RNA(rRNA)的加工特色B可造成 DNA 分子中分隔甚远的序列彼此紧邻C切除原始转录本中所有非信息序列D通常是转录后 mRNA 的第一道加工工序E由能识别并且切除内含子的酶催化进行3、tRNA 转录后加工包括( )A切除 3和 5端多余碱基B核苷酸序列特异的碱基甲基化C通过核苷酸基转移酶加接序列-CCAD5端加甲基化鸟苷E加多聚 A4、真核生物原始转录本( )A通常比功能性 RNA 长B可以含有在功能性 RNA 中不存在的核苷酸序列C不含修饰碱基D可以含一个以上 RNA 分子的
14、信息E可直接进行翻译5、关于真核生物转录的叙述正确的是( )A不依赖转录起始点上游共有序列的存在B可能涉及位于转录区内而不是其上游的启动基因C三种 rRNA 转录需要各自的启动基因部位D往往涉及染色质结构改变。E不同类的 RNA 在核的不同部位合成6、RNA 生物合成的方式有( )A对称转录 B不对称转录 C反转录DRNA 复制 E基因重组四、名词解释或简答1不对称转录2启动子3增强子4多顺反子和单顺反子五、论述题1试述原核生物转录的全过程。2何谓 hnRNA?试述 hnRNA 成熟的过程。参考答案一、填空1、内含子 外显子 2、rRNA 3、mRNA4、53 5、核心酶 因子二、单项选择题1
15、、D 2、C 3、C 4、A 5、C6、A 7、D 8、D 9、B 10、D 11、D 三、不定项选择题1、A B D E 2、A B D E 3、A B C4、A B C D 5、B D E 6、B D 四、名词解释或简答 1、答：由于转录过程中并非全部 DNA 链都参与转录，只是一个活化 DNA 片段中的一股链起模板作用，而在另一个活化基因的 DNA 片段中其情况可能相反，此现象称为不对称转录。2、答：又称启动部位，指在转录开始进行时 RNA 聚合酶，与模板 DNA 分子结合的特定部位。它对转录调节有作用。3、答：位于转录起始点上游或下游的一特异 DNA 序列，能增强真核基因转录活性，决定
16、组织特异性。 4、答：原核生物的几个结构基因，利用共同的启动子和共同的终止信号，转录生成的 mRNA 可编码几种不同的蛋白质，其转录产物称为多顺反子 mRNA；真核生物的转录作用生成的 mRNA 只编码一种蛋白质，称为单顺反子 mRNA。五、论述题（答案要点）1、答：（1）起始阶段 因子识别并结合于启动子的识别部位，核心酶结合于启动子的结合部位。DNA 双链局部区域变构，核心酶结合的 Pribnow 盒附近双链打开约17bP。RNA 聚合酶催化下，起始点处相邻的前两个 NTP 以 3、5磷酸二酯链相连。 因子从模板及 RNA 聚合酶上脱落，核心酶沿模板向下游移动，转录进入延长阶段， 因子可循环
17、使用。（2）延长阶段与 DNA 模板链序列互补的 NTP 逐一进入反应体系，RNA 聚合酶核心酶催化 NTP 间以 3、5磷酸二酯链相连接以合成 RNA 链，合成方向 53。转录本 RNA 生成后，暂时与 DNA 模板形成 DNARNA 杂交体，长约12bP。杂交体结合不紧密，易于自 DNA 上脱落，随后模板与编码链重新形成DNA 双链分子（3）终止阶段核心酶向模板下游行进至终止信号后停止前进，聚合作用终止。终止信号内有 AT 富集区，使 DNARNA 杂交分子以弱作用力配对，聚合暂停，弱键结合的未端区解开，RNA 游离，核心酶也脱落下来。2、答：hnRNA 即核不均一 RNA，是真核生物 m
18、RNA 的前体。内含子 m 7Gppp polyA hnRNA mRNA剪切 加帽 加尾 修饰第十三章 翻译一、填空1、蛋白质生物合成过程中，氨基酸和特异 tRNA 的连接由 催化完成。成肽过程由 催化。2、蛋白质生物合成过程中，每形成一个肽键，需消耗 个高能磷酸键。3、蛋白质生物合成中有 3 个终止密码，它们是 、 及 。4、蛋白质生物合成过程包括 、 和 。5、蛋白质肽链合成方向是 。二、单项选择题1、翻译的含义是指( )AmRNA 的合成B以 mRNA 为模板合成蛋白质CtRNA 运输氨基酸D核糖体大、小亚基的聚合与解聚2、蛋白质分子中氨基酸排列顺序决定因素是( )A氨基酸的种类 BtR
19、NAC核糖体 Dm RNA 分 子 中 单 核 苷 酸 的 排 列 顺 序 3、原核细胞翻译中需要四氢叶酸参与的过程是( )A起始氨基酰-tRNA 生成 B大、小亚基结合C肽链终止阶段 DmRNA 与小亚基结合4、一个 tRNA 反密码子为 5-IGC-3它可识别的密码( )A5-GCA-3 B5-GCG-3C5-CCG-3 D5-ACG-35、蛋白质生物合成时转肽酶活性存在于( )AEFTu BEFGC核糖体大亚基 D核糖体小亚基6、蛋 白 质 合 成 中 P 位 上 蛋 氨 酰 -tRNA 中 的 肽 酰 基 与 A 位 上 氨 基 酰 -tRNA 的氨基在 A 位上脱水缩合，以肽键相连形
20、成二肽，此过程需要( )A转位酶 B转肽酶C氨基酸-tRNA 合成酶 D转甲酰酶7、已 知 其 mRNA链 碱 基 序 列 为 5 GGUAUGGUAUGGGGU3，氨基酰-tRNA如下图，以上述 mRN A 为模板合成的多肽是( )U A C A C C C A U C C A A缬色甘色 B蛋缬色甘C蛋缬甘色 D缬蛋色甘8、原核生物多肽合成的延长阶段需要将氨基酰-tRNA 带入核糖体 A 位，与 mRNA 密码识别，参与这一作用的延长因子成分应为( )AEFTu-GTP BEFTsCEFTu-GDP DEFTs-GTP9、蛋白质分子中氨基酸排列顺序直接来自( )AtRNA BmRNACrR
21、NA DDNA10蛋白质生物合成的起始密码是( )AAUG BAGU缬 蛋 色甘3 3 35 5 5 53CAUU DAGG11、与 mRNA 上密码 CGA 相对应的反密码是( )AUGC BGCUCGCT DUCG三、不定项选择题（至少有一个答案是正确的）1、肽链合成的终止包括( )A大、小亚基聚合 B终止密码的辨认CmRNA 从核糖体上分离D 肽链从 tRNA 上水解E释放因子的参与2、在蛋白质合成中消耗高能磷酸键的步骤是( )A终止 B氨基酰-tRNA 注册C氨基酰-tRNA 活化 D成肽E起始3、下列有关密码正确的是( )A密码无标点符号 B有终止密码和起始密码C密码有简并性 D密码
22、有通用性E蛋白质中的氨基酸均有相应密码4关于 tRNA 叙述正确的是( )A为氨基酸的运输工具B一种氨基酸与 26 种 tRNA 特异结合C氨基酰-tRNA 合成酶对 tRNA 特异性小D分子中有稀有碱基EtRNA 有反密码5、关于氨基酸密码的描述正确的是( )A密码子第三位碱基决定氨基酸特异性B密码阅读是以 5端到 3端C一种氨基酸可有几组密码D一组密码只代表一种氨基酸E密码无种属特异性6、关于蛋白质合成的叙述正确的是( )A20 种氨基酸都有相应的密码B氨基酸以氨基与 tRNA 共价相连C氨基酸与 tRNA 3端连接D核糖体是蛋白质翻译的场所EmRNA 是多肽合成的直接模板 四、名词解释或
23、简答1密码子2反密码3核蛋白体循环4多核蛋白体五、论述题1试述核蛋白体循环中延长阶段的详细过程。 2试述原核生物与真核生物蛋白质合成体系及过程的差异。参考答案一、填空1、氨基酰 tRNA 合成酶 转肽酶 2、4 3、UGA UAG UAA4、氨基酸的活化与转运 核蛋白体循环 合成后的修饰加工5、N 端C 端 二、单项选择题1、B 2、D 3、A 4、A 5、C6、B 7、B 8、A 9、B 10、A11、D 三、不定项选择题1、B C D E 2、A B C E 3、A B C D4、A B D E 5、B C E 6、A C D E 四、名词解释或简答1、答：mRNA 分子上从 53方向，每
24、三个相邻碱基形成的三联体，组成一个遗传密码，分别代表 20 种氨基酸和起动信号，终止信号。2、答：每个 tRNA 分子上都有 1 个由 3 个相邻碱基组成的反密码子，根据碱基配对原则，与 mRNA 上密码子相应配对，保证了各种氨基酸准确依照遗传信息规定顺序参入肽链中。3、答：按照 mRNA 密码顺序，氨基酸在核蛋白体上经注册，成肽，脱落，转位的循环步骤缩合成蛋白质的过程。4、答：细胞内多个核蛋白体结合在同一条 mRNA 模板上，呈串珠状排列，各自进行翻译，合成相同多肽链，称为多核蛋白体。五、论述题（答案要点）1、答：（1）进位：延长因子 Tu，Ts 促进氨基酰 tRNA 进位于 A 位对应的
25、mRNA 密码上，此过程要 GTP 供能。（2）转肽：大亚基 P 位上转肽酶催化 P 位上甲酰蛋氨酰或氨基酰转接在 A位的氨基酰上，以肽键相连，此步需 Mg2 ，K 。（）脱落：P 位上空载的 tRNA 脱落。（4）移位：延长因子 G 促进核蛋白体沿 mRNA 链由 5端向 3端移动一个密码位置，使原在 A 位的肽酰 tRNA 移位于 P 位，A 位空出。此步需 GTP 供能。（5）另一氨基酰 tRNA 再进位，转肽，脱落，移位的循环，肽链不断延长。5、答：原 核 生 物 真 核 生 物mRNA合成物未结束时已被利用，开始翻译。无帽和尾结构。多顺反子利用共同的启动子，终止子。半衰期长。mRNA
26、 前体在细胞核内合成，合成后需加工成熟为 mRNA 后进入胞浆。有 m7Gppp 帽子和polyA 尾。单顺反子。半衰期短。核蛋白体30S：16SrRNA70S 50S：5SrRNA 23SrRNA60S：28SrRNA80S 5.8SrRNA 5SrRNA40S：18SrRNA tRNA起动氨酰-tRNA 为fMettRNA fMet起动氨酰-tRNA 为不需要甲酰化的 MettRNA fMet合成过程IF 1辅助 IF2，IF 3作用，IF 2使大、小亚基解离，IF 3使fMettRNA fMet结合，消耗GTP。延长因子有EFTu，EFTs，EFG。RF 1识别 UAA，UAG，RF2识
27、别 UAA，UGA，RF3协助两者作用。起动因子 eIF 有 910 种，小亚基经与 Met-tRNA 结合，再与 mRNA 结合，此时需一分子 ATP。延长因子只有 EFT1一种。催化肽酰 tRNA 移位的因子称EFT2。一种终止因子 RF，识别 3 种终止密码，并需三磷酸鸟苷。第十五章 重组 DNA 技术一、填空1、常用的噬菌体载体中 为双链 DNA， 可携带目的基因 DNA 单链。2、PCR 变性温度一般为 ，引物粘合温度一般为 ，引物延伸温度一般为 。3、基因工程的重要工具酶是 。 二、单项选择题1、基因工程中常用限制性内切酶的识别顺序是( )A聚腺苷酸 B4 或 6 个任意核苷酸C6
28、 或 8 个任意核苷酸 D有回文结构2、双 脱 氧 末 端 终 止 法 DNA 测 序 的 4 个 反 应 体 系 中 应 分 别 加 入 不 同 的 ( )A模板 BDNA 聚合酶C标记 dNTP DddNTP3、有关限制性核酸内切酶叙述正确的是( )A由噬菌体提取而得 B可将单链 DNA 随机切开C可将双链 DNA 特异切开 D可将二个 DNA 片段连接起来4、理想的质粒载体特点应是( )A含多种限制性核酸内切酶的单一切点B含同一限制性内切酶的多个切点C其复制受宿主控制D不含耐药基因5、TaqDNA 聚合酶的最适温度是( )A92 B72C55 D526、双 脱 氧 末 端 终 止 法 测
29、 序 体 系 与 PCR 反 应 体 系 主 要 区 别 是 前 者 含 有 ( )A模板 B引物CddNTP D缓冲液7、下述基因工程中目的基因的来源，最不常用的是( )A人工合成 DNA B从 mRNA 合成 cDNAC从真核生物染色体 DNA 直接分离D从基因文库中获取8、免疫球蛋白有种类繁多的基因，主要是由于其基因的( )A转导重组 B转位重组C转化重组 D转染重组9、基因工程操作过程可简单概括为( )A目的基因和载体的分离，提纯与鉴定B将载体和目的基因接合成重组体C将重组体导入宿主细胞并筛选D分、切、接、转、筛10、溶原菌中的噬菌体 DNA，可以从宿主 DNA 整合体中原样分离出来
30、， 也可 以 切 离 时 带 走 宿 主 DNA 的 一 部 分 ， 所 带 走 的 这 部 分 宿 主 基 因 称 ( )A转导基因 B转位基因C转化基因 D转染基因11、质粒 pBR322 含耐四环素(tet-r)和耐氨苄青霉素(amp-r)基因，如将目的基因插入 tet-r 基因构成重组体，转化宿主菌，则筛选结果是，含此重组体的转化菌( )A在含 tet 或 amp 的培养基中均能生长B在含 tet 或 amp 的培养基中均不能生长C在含 tet 的培养基中能生长，在含 amp 的培养基中不能生长D在含 amp 的培养基中能生长，在含 tet 的培养基中不能生长12、将重组 DNA 导入
31、宿主细胞的方式有( )A扩增 B克隆C转染 D颠换三、不定项选择题(每题至少有一个正确答案)1、基因工程中作为载体的物质有( )A病毒 DNA B噬菌体 DNA C质粒D染色体 DNA E组蛋白2、下列哪种物质用作基因工程载体( )A质粒 B 噬菌体 C大肠杆菌基因组D逆转录病毒 DNA E昆虫病毒 DNA3、有关载体与目的基因连接方法的叙述正确的是( )A平端切口直接连接B平端切口可采用“尾接法”C载体与目的基因非共价键连接D均需 DNA 连接酶参与E利用人工连接器也可达到连接目的4、PCR 特点包括( )A只需微量模板 B只需数小时 C扩增产物量大D底物必需标记 E三个步骤循环进行5、基因
32、工程过程包括( )A载体及目的基因的分离 B限制性核酸内切酶酶切CDNA 重组体形成及转化 D重组体筛选与鉴定E重组体序列分析 四、简答及名词解释1、基因工程2、质粒3、载体 4、克隆和克隆化5、分子克隆6、DNA 克隆或重组 DNA五、论述题何谓聚合酶链反应?试述聚合酶链反应基本工作原理及用途。参考答案一、填空题1、 噬菌体或 T 噬菌体 M 13或 FI 2、94 55 723、限制性核酸内切酶二、单项选择题1、D 2、D 3、C 4、A 5、B6、C 7、C 8、B 9、D 10、A11、D 12、C三、不定项选择题1、A B C 2、A B D E 3、A B D E4、A B C E
33、 5、A B C D 四、名词解释或简答1、答：将人工合成的特异的一段基因片段，在体外与载体重组，并通过转化和转染进入宿主 细胞，经过繁殖，提纯和筛选，选出克隆成功的细胞，使其表达出所需的蛋白质和生物学性 状的工程。2、答：存在于细菌染色体外的小型环状 DNA 分子，其本身是含有复制功能的遗传结构，能在宿 主细胞独立自主进行复制，并在细胞分裂时保持恒定地传给子代细胞。3、答：也称克隆载体，是为携带目的基因，实现外源 DNA 无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采 用的一些 DNA 分子。包括质粒、噬菌体 DNA、病毒 DNA等。 4、答：同一副本或拷贝的集合称为克隆。获取同一拷贝的过程称为克隆化。5
34、、答：从众多不同分子群体中分离得到某一感兴趣分子，继而经无性繁殖产生的很多相同分 子的集合，即为分子克隆。6、答：应用酶学方法，将体外的各种遗传物质与载体 DNA 结合成有自我复制能力的 DNA 分子， 继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含目的基因的转化子细胞，再扩增，提取获得大量同 一 DNA 分子，即 DNA 克隆。此过程中外源DNA 与载体所形成的是杂合分子，故 DNA 克隆又称重组 DNA。五、论述题答：有模板 DNA，特别设计合成的引物及合成 DNA 所需要的 dNTP 存在时，向 DNA 合成体系引入 热稳定的 Taq DNA 聚合酶。反应体系经反复变性，退火及扩增循环自动，往复多
35、次进行目的 DNA 片段的酶促合成，这就是聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)。基本工作原理：PCR 反应体系有双链模板 DNA(目的基因)，TaqDNA 聚合酶、dNTP 及一对分别与模板 DNA 两条链的 3特定序列互补、并恰好使选择的互补序列分别位于待合成 DNA 片段两侧的引物。 加入适当缓冲液后，置于 PCR 仪，加热至 94(90s)使模板变性，再通火至 55(2min)使模板 与引物杂交，再升温至 72(3min)使 Taq 酶催化 DNA 聚合。如此反复循环 2530 次后，目的 DN A 可扩增一百万倍以上。应用：如已知某基因的序列，或据氨基酸序列演绎出基因编码序列，结合序列信息设计引物 ，可直接利用基因组 DNA 或 cDNA 为模板，PCR 后获取目的基因。临床中用于基因诊断，产前诊断及病毒性传染病的早早期诊断。是当今生命科学领域基本实验手段之一。
