1、,邱群凤,尿液检验,2016 Mar.,龙岩市第一医院,1.尿液理学检查 2.尿蛋白定性检 3.尿本周蛋白定性检查 4.尿糖定性检查,尿液形成过程示意图, 容器 1、 一般检查：清洁干燥 2、 细菌培养：有盖无菌大试管 3、 24小时尿：清洁干燥的大口瓶常规检查可随时留取，但晨尿较浓缩、偏酸性，病理成分多且完整，可提高检查的阳性率。 尿液保存 1、 冷藏 2、 立即送检，夏季1h，冬季2h 3、不能及时送检，以468小时冷藏为宜,尿液的容器要求,保存条件,第一节 尿液理学检查,尿量 (有刻度的容器) 颜色及透明度 (肉眼观察) 比重 (尿比重计),一、尿量测定,一、尿量取决于肾小球的滤过率和肾
2、小管的重吸收 正常成人：1000-2000 ml/24h儿童：大约为成人34倍二、几个重要概念多尿： 2500 ml/24h少尿： 400 ml/24h无尿： 100 ml/24h,【注意事项】1每次留取标本必须排空膀胱。2气温过高时注意防腐。3测定尿量需准确，精确至毫升，误差不得超过20 ml。,二、尿颜色和透明度, 异常 浓茶色或酱油色（血红蛋白尿） 疾病：见于血型不合输血反应、急性溶血性贫血、阵发性睡眠 性血红蛋白尿（PNH）等、 黄色 胆红素定性（+）时，称胆红素尿疾病： 阻塞性或肝细胞性黄疸 乳白色混浊1、菌尿或脓尿：泌尿系统感染，如肾盂肾炎、膀胱炎2、脂肪尿：肾病、挤压伤、骨折、肾
3、病综合征等 3、乳糜尿：丝虫病、肿瘤、腹部创伤等所致淋巴循环受阻,【注意事项】 1盛尿液的容器：必须干燥、清洁、透明。 2标本：新鲜尿液。 3鉴别浑浊尿：新鲜尿液含盐类浓度过高，尤其是尿酸盐排出时遇冷易析出结晶，使尿液浑浊。 4尿液颜色：易受某些食物或药物的影响。,三、尿液比重测定,（一）比重计法 【原理】 尿比重计是一种液体比重计，可测定出规定温度下的尿液比密。尿液比重与所含溶质成正比，溶质越多，尿比重越高，对浮标的浮力就越大，浸入尿液中的比重计部分则越小，读数越大；反之，浸入部分越大，读数越小。,【操作】 1加尿 2放浮标 3读数, 参考值 晨尿1.020，随机尿1.0031.030新生儿
4、：1.0021.004 临床意义：反映肾小管的浓缩稀释功能,【注意事项】1尿比重计通过校正后才能使用。2尿液要求新鲜；尿液过少不足以浮起比重计时。3因低温所致的尿酸或其他盐类沉淀可水浴(37)使其溶解，待尿液温度降至比重计所标定的温度时即可测定。4尿液面应消除泡沫；比重计浮标要垂直悬浮于尿液中；读取比密值要准确。5校正结果 要进行蛋白尿、糖尿和温度的校正。6每次测定完毕都需用纯净水冲洗比重计，若有蛋白质及盐类物质沉积时，需用清洁液洗净后使用。,【原理】 pH广泛试纸是多种指示剂混合的试带,灵敏度约为pH1.0,显色范围为棕红至深黑色,试带蘸取尿液后即可显色,然后与标准色板比较即可测得尿液pH近
5、似值,四、尿酸碱度pH试纸法测定,【操作】1.取试纸2.浸尿3.读取结果4.报告方式, 参考值 新鲜晨尿pH值在5.56.5,平均值6.0 新鲜随机尿pH值在4.58.0 久置可变碱性 临床意义,【注意事项】 1.试带 应避光,密封与干燥保存,远离酸性和碱性物质,以防失效 2.标本 应新鲜,放置过久会因挥发性酸丧失或细菌繁殖而使pH增高,标本不能使用防腐剂,否则可能会影响检测结果 3.比色时间 应在规定的时间内比色,第二节 尿蛋白定性检查,【原理】 生物碱试剂磺基水杨酸，在酸性条件下，其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。,磺基水杨酸法,【操作】 1.调pH : 使尿液
6、PH值在56 2.加尿液: 取2支试管,加入1ml尿液 3.加试剂: 第一支试管加试剂2滴,轻混 匀,另 一支试管不加做对照4.判断结果: 1min内观察结果,1, 优点: 简便快速，灵敏度高0.05-0.1g/L；缺点: 与清/球/本周蛋白反应；假阳性。 干化学法的参考方法，NCCLS推荐的 确证实验。,【评价】, 尿液中蛋白质含量150mg/24h尿中蛋白质浓度100mg/L 蛋白定性为阳性，即蛋白尿。,1.蛋白尿 (proteinuria, PRO),【干扰因素】,【注意事项】 1 .标本:尿液明显混浊，先离心或过滤。患者应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含 碘造影剂时，应告知结果可
7、能产生假阳性。正确采集中段尿，避免混有生殖系统分泌物。 2. 调pH 本法在尿液偏碱或偏酸时（pH9 ，pH3）可呈 假阴性，检测前先测试尿pH(56). 3掌握好结果判断时间,对于微弱阳性的判断，可选用黑色衬纸作背景，以提高分辨力。,第三节 尿本周蛋白定性检查,一、凝溶法,【原理】本周蛋白在pH4.90.1条件下，加热至 4060时可发生凝固，温度升至90100时沉淀消失，当温度降低恢复至4060时又可重新凝固。,【操作】（详见实验课本 P90 ） 1标本处理 2加入试剂 3观察结果 4验证结果,【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液新鲜，减少清蛋白、球蛋白分解变性产生的干
8、扰。混浊尿液须先离心取上清液。2严格控制或调节pH，凝溶法最适pH为4.55.5。 3煮沸过滤时，动作迅速，保持高温，不要振荡，防止BJP夹杂于其他沉淀蛋白中被过滤除掉而造成假阴性。过滤用漏斗、滤纸、试管等用品，需保持高温状态，以避免温度降低使BJP凝固。4凝溶法特异性高，操作繁琐、费时，灵敏度低（0.32.0）g/L。5.操作时一定注意安全!,二、对-甲苯磺酸法,【原理】 对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白，而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。,【操作】 1.加尿液: 取2支试管，分别加尿液1ml 2.加试剂: 测定管加0.5ml试剂,对照管加 0.5ml冰醋酸,轻混匀静
9、置5min 3.观察结果:阳性:测定管浑浊加重或有沉淀,对照管清晰透明或轻度浑浊阴性:测定管清晰透明或与对照管相似,【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液应新鲜，混浊尿液须先行离心取上清液。服用利福平类抗结核药物患者可能出现周蛋白假阳性。2尿液中其他球蛋白5.0g/L可出现假阳性，需进行验证。如果尿液中本周蛋白含量低，则需先对尿液进行浓缩。,第四节 尿葡萄糖班氏法定性检查,【原理】 Cu2+-Cu+ 蓝色 黄色至砖红色.,简易步骤:班氏试剂1ml(煮沸不变色)+尿4滴煮沸1-2min 冷却后观察.,碱性条件+葡萄糖,操作：ml班氏试剂，加热试管底部，煮沸，观察，再加尿液2滴，
10、继续煮沸min，冷却后观察结果。 结果判断： 1.蓝色不变 : - 2.蓝中略带绿无沉淀 : +/- 3.绿色有少许黄绿色沉淀 : + 4.较多黄绿色沉淀 : + 5.土黄色浑浊,大量沉淀 : + 6.大量红棕/砖红色沉淀 : +,【干扰因素】,【评价】,缺乏特异性,灵敏度低,【注意事项】 1、试剂与尿液的比例为101。 2、煮混时应不时摇动试管以防爆沸喷出，试管口朝向无人处。 3、检验糖尿病患者尿液中葡萄糖，空腹或餐后2h留取尿标本。 4、大量铵盐，易致假阴性，应预先加碱煮沸去氨后再检验。 5、蛋白0.5g/L,易致假阴性，加热乙酸法去蛋白取滤液检验。 6、VitC,青/链霉素,头孢菌素,异烟肼,水杨酸盐,氨苄西林等 药物易致假阳性，应停药一段时间再行检测。,【实验报告格式】 一、实验原理 二、器材与试剂 三、操作步骤 四、实验结果与分析（实验报告的重点内容，具体分析自己所做的实验结果，结果与书本原理不相符时，到底什么原因自己要去思考分析） 五、注意事项,
