1、文件编号东莞市食品药品检验所作业指导书 版本/修订号 第 6 版/第 0 次修订岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪操作维护规程 页 数 第 1 页 共 5 页1 技术参数LC-20AT 低压梯度泵梯度方式：低压混合 混合溶剂数：4 液 混合浓度准确度：1%以下SIL-20AC 自动进样器：进样量：0.1L100L进样量准确度：1%以下进样量精密度：RSD：0.3%以下（10mL 进样时指定条件下）2 适用范围适用于药物的分离、定性、定量分析3 操作步骤3.1 仪器组成：由 DGU-20A5 脱气机、LC-20AT 低压梯度泵、SIL-20AC 自动进样器、CTO-20A 柱温箱、 SPD-2
2、0A 紫外 -可见检测器、RF-20A 荧光检测器、 CBM-20A 系统控制器、LC Solution 工作站等组成 。3.2 开机 在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品。流动相抽滤后超声脱气 15 分钟，标样和样品 0.45um 膜过滤。接通电源，依次开启 A 泵、B 泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。泵排空操作：打开 LC-20AT 泵排空阀（逆时针 90 度以上） ，按 Purge 键，泵开始排空运行。检查流动相入口 Teflon 管路没有气泡后，再按 Purge 键停止排空。自动进样器
3、排气操作：按 Purge 键，自动进样器开始排气，系统默认排气时间为25min，且自动进样器排气过程中可同时进行其他操作。 （除进样外）压力调零：按 LC-20ATvp 泵 Func 键选择 CONTROL 项，按 FUNC 键直至屏幕显示 *ml 文件编号东莞市食品药品检验所作业指导书 版本/修订号 第 6 版/第 0 次修订岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪操作维护规程 页 数 第 2 页 共 5 页ZERO ADJ 项，按 Enter 键，再按 CE 键，即完成调零。然后关紧排空阀（顺时针旋紧） 。再双击 OperationAnalysis 14 进入实时分析窗口：（根据不同的检测器选
4、择）在开机画面中，User ID 选中 Admin，不需输入 Password，点击 OK（可听到峰鸣一声） 在下面操作中 AB 表示在 A 菜单下选择 B，以此类推。选中表示在中打号。3.3 参数设置在左侧助手栏给出了引导顺序操作的图标，自上而下顺序执行即可：（可以跳过执行）System configuration 系统配置（第一次安装或更换检测器时配置，通常跳过不操作）System Check 编辑仪器检查参数：并且 RUN 运行检查。通常不操作（跳过）点击 Data acquisition 进入采集数据编辑方法界面点击 Instrument Parameter 进入仪器参数设置界面：选中
5、 Normal（通用简单）或 Advanced（高级详细）项，分别设定 Pumps 泵参数，Oven 柱箱参数，Detecter 检测器参数，Controller 系统控制器参数，Time Program时间程序参数等。仪器配置不同，控制单元项的数目多少不同。Pumps 泵参数：Mode 控制方式，Flow 流速，B，C，D Conc 各项浓度，P Max 最大压力Oven 柱箱参数：Oven 设定温度，T Max 最大保护温度Detecter 检测器参数：Cell 设定池温。Wavelength 设定波长。Controller 系统控制器参数：Data acquisition 选中 Acqu
6、isition Time 后，设置分析时间，等等LC Time Prog 时间程序参数：编辑泵梯度洗脱程序，也可以控制柱箱，检测器，等等。点击 MethodData Analysis Parameter 编辑积分参数：文件编号东莞市食品药品检验所作业指导书 版本/修订号 第 6 版/第 0 次修订岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪操作维护规程 页 数 第 3 页 共 5 页设置 Width 峰宽，Slope 斜率，Min Area 最小峰面积等等。新建方法推荐使缺省值，待分析完样品后再设置此项参数，得到优化的色谱数据结果后，将参数保存在当前方法中。保存方法：点击 FileSave Metho
7、d as起文件名*保存后，该方法即作为当前运行的方法。下载方法：点击 Down Load 键，向仪器传送参数。3.4 运行方法：点击图标（Instrument On/Off 系统 开/关）系统开始运行，检查各单元参数应与方法设定一致。等待系统平衡。一般情况下，由于流动相不同，交换平衡时间不定。可以观察 Detecter 检测器吸收变化,如果吸收值稳定不变，即认为接近平衡，可以调零等待，确认不变后，准备进样分析。可以通过改变衰减或予览基线观察基线变化，待基线平稳，准备进样操作。3.5 进样分析：单针进样分析：点击 Single Start 图标：编辑样品参数：Sample ID 样品信息，Met
8、hod Name 方法文件名，Data Path 数据存储路径，Data Name 数据文件名，Vial 样品瓶号(无)，Tray#架号(无)，Injection 进样量等。点击 OK 后，开始进样操作。 （重复单针进样，重复执行此步骤即可）每个样到时间分析结束，根据方法中的积分参数，所有色谱数据会自动进行积分处理。批量分析：点击批处理图标 Batch Processing，点击 New 新建批处理文件，点击向导 Wizard，设定新建、文件方法、试样开始位置、进样量，点击下一步；设定试样名、试样瓶数、进样次数，并选择是否打印报告后，点击完成。待系统平衡，基线稳定后，点击批处理开始图标 Bat
9、ch start 即可。需变更在执行中的分析时间时，点击分析时间变更图标，设定数值。需分析中止时，点击中止图标。需批处理分析暂停时点击暂停/重开图标，可对批处理表进行变更，点击暂停/重开图标（批处理实时分析重新开始） 。文件编号东莞市食品药品检验所作业指导书 版本/修订号 第 6 版/第 0 次修订岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪操作维护规程 页 数 第 4 页 共 5 页3.6 报告预览和打印：点击 Top 返回上级引导操作栏。点击 Post Run Analysis 进入数据后处理界面：点击 report 进入报告界面：点击 report format 进入格式界面：调入报告格式文件，
10、也可以自己编辑报告格式然后点击 Data 打开数据文件，将左侧数据文件拖入右侧报告栏即可。关于报告格式，可以通过内容选择图标，在报告中确定位置后，添加即可。右键功能很强大，用户可以参考说明书灵活使用。选择快捷图标的预览或打印图标执行报告预览或打印。3.7 关机步骤：更换洗液清洗流路系统（如用缓冲液，先用水清洗 1 小时，再用有机溶剂清洗 30 分钟以上） ，最后用有机溶剂封存。清洗结束后，停止系统运行，在 LC SOLUTION 工作站中，按 Instrument on/off 键即停止所有单元工作。退出 LC SOLUTION（可听到峰鸣一声） ，再完全退出。关系统控制器 CBM-20A 电
11、源开关关主机 SPD-20A（或 RF-20A）检测器，LC-20AT 泵，CTO-20A 柱箱电源开关。清洗流路系统要求：如果使用缓冲液，先用水更换缓冲液，清洗 1 小时，然后更换甲醇清洗 40 分钟，如果使用有机溶剂（水） ，直接更换甲醇清洗 40 分钟即可。4 注意事项4.1 如果使用前色谱柱中保存的流动相为纯甲醇或纯乙腈，而新流动相中含有缓冲盐时，应先用纯水冲洗色谱柱十分钟左右再使用流动相，以免盐析出损坏系统。4.2 流动相的 pH 值应在 2.39.5 之间。如系统为正相和反相交换使用，应先将所有管文件编号东莞市食品药品检验所作业指导书 版本/修订号 第 6 版/第 0 次修订岛津
12、LC-20AT 高效液相色谱仪操作维护规程 页 数 第 5 页 共 5 页路用异丙醇清洗后再更换新流动相使用。四氢呋喃和氯仿等不可长期停留在塑料管道内。4.3 流动相应过滤，不要使用存放超过两天的水相。液相本身的溶剂过滤头不能超声。4.4 注意不同厂家接头问题，防止漏液和损坏柱子或接头。4.5 检测器的灯应节约使用时间，但不要频繁开关灯。必要时进行波长校准，废液管不可以剪短。5 仪器维护5.1 每三个月至少清洗一次溶剂过滤头（35%硝酸浸泡 1 小时后用水冲洗至中性）5.2 根据情况更换 purge 阀内的滤芯（纯水 5ml/min 排液时，压力超过 10Bar 应更换）5.3 经常使用盐溶液
13、时，定期用水冲洗所有通道。5.4 保持自动进样器的传动杆、针座的清洁，平时关门防尘。5.5 定期进行仪器的诊断程序，检查仪器状态。6 期间核查6.1 在两次检定之间，如较长时间不用，或使用过程中发现有可疑现象时，应对本仪器进行期间核查。6.2 采用与本所另外的液相色谱仪比对方式进行，两台仪器测定值相对标准偏差小于1.5%时，可判定仪器期间核查合格。6.3 可根据国家技术监督局 JJG705-90“实验室液相色谱仪检定规程” （详见中检所实验室仪器检定规程 ） ，用于自检。7 相关记录7.1 仪器使用登记表 DGSYJ/CX-23-06-05 7.2 设备期间核查记录表 DGSYJ/CX-25-01-05
