1、实验五 蔬菜中维生素C含量测定,维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3 -二酮古乐糖酸，失去生理作用。,根据它具有的还原性质可以测定维生素C的含量。常用的测定方法有： （1）2，6-二氯靛酚法 （还原型VC） （2）2，4-二硝基苯肼法 （总VC） （3）碘酸法 （4）碘量法 （5）荧光分光光度法,【目的】1了解蔬菜中维生素C测定的原理。2掌握定量测定蔬菜
2、中维生素C的基本操作技术。 【原理】用活性碳使样液中的还原型抗坏血酸氧化成脱氢型抗坏血酸，然后使之与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎。脎的生成量与样液中总抗坏血酸量成正比。将脎溶于硫酸后进行比色定量。,【仪器】 1组织捣碎机 2刻度吸管 3100ml容量瓶 450ml具塞量筒 5烧杯、三角烧杯 6电炉、滤纸 7漏斗 8移液管 9水浴锅 10722分光光度计,【试剂】 19N硫酸 22%2,4-二硝基苯肼溶液 310%硫脲 485%硫酸 5活性碳 61%草酸溶液，2%草酸溶液。 7标准抗坏血酸应用液 (100g/ml ),样品分析 （1）样品提取 取西红柿100g，放料理机中，加2%草酸100
3、ml，制成匀浆。称取匀浆4g,用1%草酸稀释、定容至100ml容量瓶中，过滤。 （2）氧化 取上述滤液25ml于150ml锥形瓶中，加活性碳0.5g,振摇1min，过滤，滤液备用。,【操作】,（3）脎的形成 取试管2支按下表操作。,样品分析,（4）脎的溶解 各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以空白管调零，测样品管吸光度值。,样品分析,2、标准曲线制备 （1）氧化 取标准抗坏血酸应用液25ml于100ml锥形瓶中，加活性碳0.5g，振摇1min,过滤。取滤液10ml于100ml容量瓶中，用1%草酸稀释至刻度(含抗坏血酸10g /ml)。 （2）脎的形成 取试管5支，按下列顺序操作。,2、标准曲线制备 （3）脎的溶解各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以0号管调零，测定各管吸光度值。以吸光度值为纵座标，抗坏血酸含量（g）为横座标绘制标准曲线。根据样品管吸光度值查得样品中抗坏血酸含量。,式中：X 样品中总抗坏血酸含量，mg/100gC 样品管中相当于标准抗坏血酸的量，g W 用于测定样液中所含样品量，g,【计算】,X=,Thank You !,
