1、DNA连接酶与DNA聚合酶的比较,DNA连接酶,DNA聚合酶,催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键,不需要模板,需要DNA的一条链为模板,游离的DNA片段,单个的脱氧核苷酸,形成完整的DNA分子,形成DNA的一条链,基因工程,DNA复制,相同点,不 同 点,模板,作用 对象,作用 结果,用途,PCR技术与DNA复制的比较,DNA复制,PCR技术,解旋酶催化,DNA在高温作用下变性解旋,细胞内（主要在细胞核内）,细胞外（主要在PCR扩增仪内）,DNA解旋酶、普通的DNA 聚合酶等,耐热的DNA聚合酶（Taq酶）,细胞内温和条件,需控制温度，在较高温度下进行,区 别,解旋 方式,场所,酶,温度 条
2、件,合成的 对象,DNA分子,DNA片段或基因,联系,模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 原料：均为四种脱氧核苷酸 酶：均需要DNA聚合酶进行催化 引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧 核苷酸,基因工程的概念,基因工程的别名,DNA重组技术,操作环境,生物体外,操作对象,基因,操作水平,DNA分子水平,基本过程,剪切拼接导入表达,结果,人类需要的新的生物类型 和生物产品,目的基因导入受体细胞,微生物细胞,农杆菌转化法、 基因枪法、花 粉管通道法,显微注射法,常用方法,生物种类,体细胞或受精卵,将含有目的基 因的表达载体 提纯取受精 卵显微注射 受精卵发育 获得具有
3、新 性状的动物,以农杆菌转化 法为例： 将目的基因插 入Ti质粒的 T-DNA上农杆 菌导入植物 细胞整合到 受体细胞的DNA 上表达,转化过程,植物细胞,动物细胞,Ca2+处理法,受体细胞,受精卵,原核细胞,Ca2+处理细胞感受态细胞 重组表达载体与感受态细 胞混合感受态细胞吸收 DNA分子,目的基因的检测与鉴定,方 法,检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了 目的基因,采用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂 交技术,分子 水平 检测,导入DNA分子,转录,翻译,除了分子检测外，还需要进行个体生物学水平 的鉴定，如做抗虫或抗病接种实验等,检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗 原抗体杂交技术,个体水平鉴定,
