1、实验（一）植物有丝分裂（1）实验目的1）学习植物材料的常规压片方法；2）观察在有丝分裂过程中染色体的动态变化；3）掌握染色体形态观察和计数方法。（2）实验原理植物细胞有丝分裂是植物细胞增殖的主要方式，只要能进行细胞分裂的植物组织或单个细胞都可以作为观察染色体的材料。如植物的顶端分生组织（根尖和茎尖） 、居间分生组织（禾本科植物的幼茎及叶壳） 、愈伤组织和胚乳、萌发的花粉管等。（3）实验用具及材料：显微镜、载玻片、盖玻片、指形管、镊子、解剖针、刀片、吸水纸、铅笔；黑麦根尖（2n=14） 。（4）实验方法及步骤：1）材料的准备和取材选取黑麦种子浸泡于水中，使种子吸胀(浸泡时间视不同作物而异) 。然
2、后将种子捞出，放在垫有滤纸的培养皿中。置于 25 度条件下（温箱）发芽。待根长约 11.5cm 时此时大量细胞进行分裂时剪根(一般以上午 10:30-11:30 为宜)。2）预处理：a：目的：获得较多有丝分裂中期分裂相；使染色体收缩变短和分散，便于压片观察。b：预处理方法：化学方法：秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉、- 溴萘。低温预处理(物理法)：小麦 1-5 度；水稻、玉米 -度；20-40 小时。剪取根尖放入盛有蒸馏水的指形管中，再置于冰水共存的冰瓶中，将冰瓶置 0-3 度冰箱处理 24 小时。染色体数较多的材料可适当延长处理时间。3）固定：采用各种渗透力强的固定液将植物的组织、细胞迅速杀
3、死，使蛋白质沉淀并尽量保持其原有状态。 （固定液：Carnoy I: 冰醋酸：纯酒精1：3，时间：24 h）4）解离、染色固定后的材料用蒸馏水洗净后放入 1mol/L 盐酸溶液中，在 60oC 解离 5-20 min，目的是使细胞易于分散，便于压片。 （染液：醋酸洋红）5）压片操作取一条根置于载玻片上，切取根尖分生组织约 0.5mm，大小 2-3 段，加一滴醋酸洋红盖上盖玻片，用挑针尖轻敲根尖材料成雾状，用拇指轻压材料6）镜检（用电子显微镜观察分生区细胞个时期的形态特点）前期 中期 后期 末期1）前期a. 染色质浓缩为染色体 b. 核膜解体 c. 核仁消失 d. 形成纺锤体2）中期 a.核膜核仁消失 b.染色体的着丝点排列于赤道板上c.染色体高度螺旋化3) 后期a.着丝点分裂 b.姊妹染色单体分开并在纺锤丝牵引下移向两极 c.当子染色体到达两极时，此期结束4) 末期a.核膜核仁消失出现细胞质分裂 b.细胞板形成产生 2 个子细胞后期前期中期末期
