1、第三次实验,溶菌酶的溶菌作用,溶菌酶的溶菌作用,实验原理溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是正常体液与分泌液中所含的一种小分子碱性蛋白质。它能水解革兰阳性菌细胞壁中的肽聚糖成分(作用于-1,4糖苷键),使细胞壁崩解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。是非特异性免疫中一种重要的体液物质。,实验材料与器材1、人的唾液(含有溶菌酶)、溶菌酶标准品、生理盐水。2、细球菌(M.Lysod
2、eikticus)。3、1.0%盐水琼脂管(7-8mL/管)、灭菌的1mL吸管、毛细吸管、打孔器、平皿、竹签和橡皮乳头等。,注:唾液 生理盐水(阴性对照) 溶菌酶(阳性对照),实验步骤: 1、取灭菌的小平皿一个,用灭菌1mL的吸管吸取0.5mL(9亿/mL)细球菌活菌菌液注入平皿内。 2、取已溶化并冷却至45-55的生理盐水琼脂管一支,倾注于上述平皿内,迅速水平混匀,平放待凝。 3、用打孔器(孔径为6mm)打孔,用竹签挑出孔中琼脂。 4、先用清水漱口,略待片刻将唾液吐于灭菌平皿内,用毛细吸管吸出(注意不要有气泡,不要溢出),并分别加入生理盐水和溶菌酶标准品。置37,18h后观察结果。,预测实验结果阳性结果:加在唾液空周围出现一圈很明显的溶菌环。 注意事项在实验中应该注意无菌操作,否则杂菌生长会影响溶菌环的观察,谢谢!,