化验室建设的基本要求 设备的配置与要求 分析方法.doc

1、化验室建设的基本要求 设备的配置与要求 分析方法化验室建设的基本要求一、化验室的基本布局实验室面积在不小于 200 m2，整 实验室面积在不小于 个化验室电力配备不小于20KW。 个化验室电力配备不小于 。 由接样室、样品干燥室、 由接样室、样品干燥室、样品研磨 样品保存室，仪器药品贮藏室、 室、样品保存室，仪器药品贮藏室、 危险品贮藏室，制剂室、浸提室、 危险品贮藏室，制剂室、浸提室、 分析室，总控室等组成。 分析室，总控室等组成。化验室布局要求样品干燥室不小于 10 m2，需要自然或强制通风，该室可安装远红外加热设备，但室温 不宜超过 40。 样品研磨室 8 m2 左右，主要用于土壤样品的

2、研磨和编号，需要强制通风、除尘。 样品保存室需要有 40 m2 以上的面积，一般样品需保存 36 个月，肥料田间试验的基础 土壤样品应长期保存。同时存放用于测试化验质量控制的参比样。 贮藏室 1020 m2 即可。是化验室备用物品贮藏的场所，主要是备用的化学试剂和仪器 设备、备件等，必须独立。 制剂室 10 m2 左右，配置空调、冰箱，用于配制各种试剂、浸提剂和标准溶液。 浸提室面积应不小于 40 m2，配置空调，配置空调用于样品浸提、稀释、显色等。 分析室 40 m2 左右，配置空调，用于原子吸收分光光度计（强排风） 、紫外-可见分光 光度计、酸度计使用。 每台仪器需配置计算机，用于数据自动

3、采集。 制水室 8 m2 左右。 总控室 30 m2 左右，是化验管理人员办公和数据采集、发送的控制中心。 危险品贮藏室（可以不设）6 m2 左右，最好设于大楼以外，主要存放少量易燃、易爆 和剧毒危险品，必须有防渗、防爆、防盗设计。 制剂室、浸提室、分析室、制水室等均需上下管线。制剂室、浸提室、分析室需要配 置防溅洒防护装置，如洗眼器、淋浴喷头等。化验室人员分析测试工作人员 34 名 学历应在中（大）专以上 土壤农业化学（资环）专业二、分析项目为全面满足测土配方施肥的需求，完 成对本区土壤大、中、微量元素进行分 析，查找区域土壤肥力的限制因子，分 析测试土壤速（有）效氮（氨态氮和硝 态氮） 、

4、磷、钾、钙、镁、硫、铁、铜、 锰、锌、硼等营养元素和有机质（碱 溶） 、pH 以及交换性酸等。三、测试能力按测土配方施肥技术规范（试行） 要求， 设计日土壤样品分析能力达 120 个以上。一般样品的分析结果在 10 个工作日内提供 加急样品的分析结果应在 5 个工作日内提供 县级化验室年土壤样品分析能力达 10000 个以 上。仪器设备的配置与要求一、前处理设备配备批量化前处理设备。实现土 壤样品从编号、风干、研磨、量取、 浸提到分析测试全过程批量化处理， 并将相关信息录入电脑。1、风干 、 2、粉碎 、 3、排序 、4、量样 、5、加液 、6、搅拌 、7、过滤 、8、稀释 、9、显色 、10

5、、联体杯 、11、前处理辅助设备 、洗涤过程二、测试设备为实现批量化分析化验，检 测仪器设备应做到自动进样， 检验结果通过实验室内部网络 直接存入电脑。2、原子吸收分光光度计 、原子吸收分光 光度计。 光度计。原子吸收 有火焰即可， 有火焰即可，可不 配石墨炉和自动进 样器， 样器，但要具有计 算机控制功能， 算机控制功能，最 好是 6 个以上灯架 个以上灯架。 好是 个以上灯架。 数据输出格式可修 改、计算机系统可 扩充。 扩充。1、分光光度计 、分光光度计。 要有紫外波段（ 分光光度计 。 要有紫外波段 （ 205210nm） ， ） 除能满足一般比色分析外还能用紫外测定硝态氮。 除能满足

6、一般比色分析外还能用紫外测定硝态氮。配 置自动进样装置、 数据采集接口。 置自动进样装置、RS232 数据采集接口。 数据采集接口3、酸度计 、 酸度计。配备自搅拌装置、 酸度计。配备自搅拌装置、自动清洗装 置和有明确数据结构的 RS232 接口。 接口。 置和有明确数据结构的 接口三、通用设备通用设备是指所有化验室 都能使用的，而在土壤养分测 试中也是必备的设备。如：电 冰箱、电子天平、烘干箱、磁 力搅拌器等。四、辅助设备1、纯水机 、 出水口水质要求 18M 以上，出 以上， 出水口水质要求 水量每小时30 升以上 升以上。 水量每小时 30 升以上。2、网络设备 、实验室批量化验前处理设

7、备价目表 单位：元 设备名称 规格 单位 单价 数量 主控设备 CP-1 套 32700 1 搅拌机 JB-1 台 8600 1 洗涤槽 WS-1 台 6800 1 加液器 3V-3S 架 3000 1 加液器 2V-3S 架 2900 3 加液器 1V-1S 架 2750 3 加液器 TS-5 架 2600 1 土样量样器 TD-3 套 100 2 土样测定车 套 3500 5 联体杯 个 200 2 土样风干盘 个 20 300 样品托盘 台 50 60 泵吸式进样器 套 3600 自洗式搅拌器 2800 专用试剂 2500 备用件 台 1000 土样粉碎机 PU-2 套 5800 纯水加

8、压装置 只 5600 专用流动比色皿 9500 合计合计 32700 8600 6800 3000 8700 8250 2600 200 17500 400 6000 3000 3600 2800 2500 1000 5800 5600 950 120000分析设备 名 称 子吸收人 光光度计 子吸收分 光度计 外可见分 光度计 外可见分 光度计 酸度计 型 分 光 光 光 号 厂 家 参考（元） 8600 8600 16000 16000 3000原 原 紫 紫W fx -1 0 0 c TA S - 9 8 6 S T6S U V -1 8 0 0 C F -3 3 C北京瑞利分析仪器公司

9、 北京普析 责 北京普析 责 通 任 通 任 用 公 用 公 仪器有限 司 仪器有限 司北京瑞利分析仪器公司 北京屹源分析仪器 开发公司名称 纯水器 数据采集型号 C A H T -3 0 L H P -D X 2 0 0 0厂家 HP参考价（元） 24000 13400分析方法我国测土配方施肥目前存在 的问题我国目前使用较多的,主要是土壤养 我国目前使用较多的 主要是土壤养 分的常规分析方法。 分的常规分析方法。化学浸提剂提取的 元素单一、分析过程繁琐、 元素单一、分析过程繁琐、不能实现系 列化操作，因而分析速度慢，成本高， 列化操作，因而分析速度慢，成本高， 分析结果难于及时应用， 分析结

10、果难于及时应用，常常使测土推 荐施肥不能真正实行, 亟待改进. 荐施肥不能真正实行 亟待改进现阶段土壤有效养分的测定的推荐方法近二十年来，在土壤测试方法研究，特别是 土壤有效养分的浸提方法方面取得了较大的进 展，如采用一种浸提剂同时浸提出多种营养元 素，并与现代仪器分析方法相结合，使土壤测 试的速度和效率大大提高。现推荐土壤有效养 分测定的 Mehlich 3 和 ASI 方法，应用联合浸 提剂，全面考虑土壤中大、中、微量元素状况 及平衡，采用系列分析设备,分析高效、快速， 使施肥量的确定更加合理。第一部分Mehlich 3 分析方法 3 分析方法Mehlich 3 浸提剂 浸提剂组成: 0.

11、2mol/L HoAc 0.25mol/L NH4NO3 0.015mol/L NH4F 0.013mol/L HNO3 0.001mol/L EDTA Ph 2.50.1M3 法的优点如下： 法的优点如下： 法的优点如下M3 浸提剂不仅适用于各类酸性和中性土壤，在一定范围内也可用于碱性 和石灰性土壤中多种有效大量和微量元素的浸提； 在同一浸提液中测定的多元素值，与植物反应有很好的相关性，可以表 征土壤中这些有效养分含量的水平； M3 浸提剂本身很稳定，便于配置和长期贮存； 浸提剂反应迅速，仅需要在室温震荡 5min 即可完成； 容易于取得清亮的浸提液，因土壤有机和无机胶体在酸性介质中被絮凝

12、滤出； M3 浸提剂若与多元素分析仪器联用，更可大大提高土壤测试工作效率； 用 ICP 或 AAS 定量各元素时不留“盐疤”，无基质影响，干扰因素较少。 M3 测定值一般较高，各土壤间的变幅较宽，便于养分水平的分级或施肥 量建议的提出。方法原理试剂中的 0.2mol/L HoAc-0.25mol/L NH4NO3 形 成了 Ph 2.5 的强缓冲系并可浸提出交换性 K、 Ca、Mg、Na 、 Mn、Zn 等阳离子； 0.015mol/L NH4F-0.013mol/L HNO3 可调控 P 从 Ca、Al、Fe 从无机磷源中的解析； 0.001mol/L EDTA 可浸提出螯合态 Cu、Zn、

13、 Mn、Fe 等。试剂： 试剂：试剂与仪器硝酸铵、氟化铵、冰乙酸硝酸、乙二胺四 乙酸（EDTA） 、酒石酸锑钾、钼酸铵、 硫酸、抗坏血酸、磷酸二氢钾、M3 贮备 液、M3 浸提剂、锑抗试剂、P 标准溶液、 K 标准溶液、Ca 标准溶液、 Mg 标准溶液、 Fe 标准溶液、Mn 标准溶液、 Cu 标准溶液、Zn 标准溶液 注：未特殊标明，药品一律要用分析纯。浸提剂的配制EDTA 贮备液 3.75mol/L NH4F-0.25mol/L EDTA 贮备液称取 NH4F（分析纯）138.9g 溶于约 600mL 去离 子水中，摇动，再加入 EDTA(分析纯)73.1g,溶解 后用去离子水定容至 10

14、00mL，充分混匀后贮存于 塑料瓶中( 在冰箱内可长期使用)，可供 5000 个标 本用，如工作量不大可按比例减小贮备液的数量。Mehlich 3 浸提剂 浸提剂用 1000mL 或 2000mL 容量瓶准确量取 2000mL 去 离子水，加入 5000mL 塑料瓶桶中，称取 NH4NO3 （分析纯）100.0g ，使之溶解，加入 20.00mLNH4F-EDTA 贮备液，再加入冰醋酸（即 17.4 mol/L，分析纯） 57.5mL 和浓 HNO3（即 15.8mol/L，分析纯）4.10mL ，用 1000mL 容量 瓶加水定容至 5000mL，充分混合均匀。此溶液 Ph 应为 2.50.

15、1，贮存于塑料瓶中备用注 1。仪器： 仪器：分光光度计。 火焰光度计。 恒温振荡机（温度控制 251） 。原子吸收分光光度计（如果不测中微量元素，不 需该仪器） 。浸提步骤称取 5.00g 风干土壤（过 2mm 尼龙筛）于 100 200mL 塑料瓶注 2中，加入 50mL Mehlich 3 浸提剂，盖严后于往复振荡机（振荡强度为 180 转分钟）上振荡 5 分钟。然后干过滤， 收集滤液 注 3于 50mL 塑料瓶中。整个浸提 过程应在恒温条件下进行，温度控制在 251注 4 。M3 有效磷的测定 M3 有效磷的测定试剂配制： 试剂配制：锑抗试剂称取酒石酸氧锑钾（K（ SbO）C4H4O6,

16、 分析纯）0.5g 溶于 100mL 去 离子水中，配制成 0.5%的溶液。另称取钼酸铵（ NH4）6MO7O244H2O， 分析纯）10.0g 溶于 450mL水中，慢慢加入 153mL 浓 H2SO4（分析纯） ， 边加边搅动。再将 100mL 0.5%酒石酸氧锑钾铵溶液中，最后加水至 1000mL，充分摇匀，贮存于棕色瓶中，此为钼锑贮备液。 临用前（当天） ，称取抗坏血酸（即维生素 C，分析纯）1.5g，溶 于 100mL 钼锑贮备液中，混匀，此为钼锑抗试剂，有效期 24 小时，如保 存于冰箱中则有效期较长。上试剂中 H2SO4的浓度为 5.5mol/L（1/2 H2SO4） ，钼酸铵为

17、 1%，酒石酸氧锑钾为 0.05%，抗坏血酸为1.5%。P 标准溶液 5 mg/L P 标准溶液称取 105烘干 2 小时的磷酸二氢钾（KH2PO4，分析纯） O.2195g，置于 400mL 去离子水中，加入浓 H2SO4 5mL（防长 霉菌,可使溶液长期保存） ,转入 1000mL 容量瓶中，用水定容。 此溶液为 5 mol/L P 标准溶液。准确吸取此贮备溶液 25.00 mL， 稀释至 250 mL,即为 5 mg/L P 标准溶液（此稀溶液不宜久存） 。标准系列曲线准确吸取 5mg/L P 标准溶液 0 、 1.00、2.OO、 4.OO、6.00、8.00mL ，分别放入50mL

18、容量瓶中，加水 至约 3OmL，加入 5 00mL 钼锑抗试剂显色，定容摇匀。 显色 30分钟后,在 880nm 处比色。测定： 测定：准确吸取 2.0010.00ml 土壤浸出液（依肥 力水平而异）于 50mL 容量瓶中,加水至约30mL， 加入 5.00mL 钼锑抗试剂显色，定容摇匀注 5 。 显色 30 分钟后，在 880nm 处比色。如冬季气温较 低时,注意保持显色时温度在 15以上，最好在 恒温室内显色，以加快显色速度、测定的同时 做空白校正注 6 。结果计算： 结果计算：mgkg c 土壤有效 P， mgkgc（P）显色液 分取倍数 m 体积 分取倍数m 式中： C （P）待测液中

19、 P 浓度（mg/L） ； 显色液体积 50mL； 分取倍数浸出液体积吸取滤液体 积； m 土样质量（g） 。M3 速效钾的测定 M3 速效钾的测定试剂配制： 试剂配制：=100mg K 标准贮备液c （K ）=100mgL 标准贮备液 c准确称取氯化钾（KCI， 105110 干燥 2 小时，分析纯） 0.1907g，溶于去离子水中，定客至 100O mL，摇匀后待用。工作曲线准确吸取 100mgL K 标准贮备液 0、1、25、5、10、15、 20mL，分别放入50mL 容量瓶中，用 Mehlich 3 浸提剂定容,摇 匀，即得 0、 2、 5、 10、 20、 30、40 mgL K

20、标准系列 溶液测定： 测定：M3 浸出液注 7中钾可直接用火焰光度计测定。结果计算： 结果计算：土壤有效 K，mgkg c（K ） V m mgkg mg式中: C（K）待测液中 K 浓度（ mgL） ； V 浸提剂体积, mL； m 土样质量，g。M3 有效钙、 M3 有效钙、镁的测定 有效钙试剂配制： 试剂配制：Ca 标准贮备液c（Ca）=100mgL Ca 标准贮备液c（Ca）=100mg 标准贮备液c准确称取碳酸钙（CaCO3，110干燥 4 小时，分析纯）0.2497g，溶 于 1.0 molL HCI 溶液中，煮沸赶去 CO2，用去离子水洗入 1000mL 容量 瓶中，定容。Mg

21、标准贮备液 （Mg）=100mgL 标准贮备液c（ ） 标准贮备液准确称取 0.1000g 金属镁（光谱纯）溶于少量 6 molL HCI 溶液中， 用去离子水洗入 10O0mL 容量瓶中，定容。工作曲线Ca 标液浓度范围：024mgL，用 M3 浸提剂定容；测定波 长：422. 67nm。 Mg标液浓度范围：06mgL,用 M3 浸提剂定容；测定波长： 285.21nm。M3 有效钙、镁的测定： M3 有效钙、镁的测定： 有效钙M3 浸出液适当稀释后注 8可直接用原子吸收分光 计（AAS） 注 9测定。结果计算： 结果计算：土壤有效 CaMg, mgkg= c（CaMg）x f x V （

22、） m 式中： c（Ca Mg）待测液中 Ca 或 Mg 的 浓度（ mgL） ； f 稀释倍数； V 浸提剂体积，mL； m 士样质量，g。M3 有效微量元素的测定 M3 有效微量元素的测定试剂配制： 试剂配制：Fe 标准溶液 Fe 标准溶液准确称取 0.1000g 铁丝（光谱纯）或硫酸亚铁铵 （Fe(NH4)2(SO4)26H2O） 0.7023g,溶于 20mL 0.6molL HCI 溶液中，必要时加热使之溶解，转入 1000mL 容量瓶中。 用去离子水定容。此为 100mg/L Fe 贮备标准液。Mn 标准溶液 Mn 标准溶液将 MnSO47H20 于 150下烘干，移入高温电炉中于

23、 400灼 烧 6 小时后成为无水MnSO4。准确称取无水 MnSO4 0.2479g ， 溶于水中，加入 lmL 浓硫酸，用去离子水定容至 1000mL，即 得 100mg/L Mn 贮备标准液。Cu 标准溶液 Cu 标准溶液准确树取 CuSO45H20（分析纯，未风化的）0.3928g ，溶 于 1.0 molL（1/2 H2SO4）溶液中、并用 1.0 molL（1/2 H2SO4）溶液定容至 10OOmL,即得 100mg/L Cu 贮备标准液。Zn 标准溶液 Zn 标准溶液取少许金属锌粒（分析纯）于表面皿上，用 10HCI 将其 表面的氧化物溶去，再用去离子水将 HCI 洗净，最后用

24、无水乙 醇（分析纯）洗 23 次，放在干燥器（氯化钙作干燥剂）中 干燥 24 小时。准确称取 0.1000g 金属锌，放在 1000mL 容量瓶 中，加 50mL 去离子水和 lmL 浓 H2SO4 溶解，加水定容，即得 100mg/L Zn 贮备标准液。或准确称取ZnSO4 7H20（分析纯， 未风化的） 0.4398g, 溶于去离子水中,加几滴 HCI 酸化,定容 至1000mL，即得 100mg/L Zn 贮备标准液。工作曲线Fe 标液浓度范围：010mg L ，用 M3 浸提剂定 容；测定波长：248.3nm。 Mn 标液浓度范围：05mgL，用 M3 浸提剂定 容；测定波长：279.

25、5nm 。 Cu 标液浓度范围：04mgL，用 M3 浸提剂 定容；测定波长： 324 .8nm。 Zn 标液浓度范围： 01mgL，用 M3 浸提剂定 容；测定波长： 213.8 nm。M3 有效微量元素 10的测定： M3 有效微量元素注 10的测定： 有效微量元素 的测定M3 浸出液适当稀释注 11后可直接用原子吸收分光计（AA ） 测定。结果计算： 结果计算：土壤有效微量元素，mg kg 元素） 土壤有效微量元素，mgkg c（元素） f m式中：c（元素）待测液中某一元素的浓度（mgL） ； f 稀释倍数； V 浸提剂体积，mL； m 士样质量，g 。 V注释注 1为了避免 F- 以

26、 CaF2 形态沉淀和磷的再吸附， 应将 Mehlich3 浸提液的 pH 控制在 2.9 以下。配制 Mehlich3 浸提剂时应尽量准确，这样可不必每次都测 定 pH 值。因为溶液中的 F-容易对玻璃电极或复合电 极造成损坏。 注 2玻璃器皿不会造成污染，但橡皮塞尤其是新塞 子会严重引起 Zn 的污染,建议最好使用塑料瓶盛试液。 如果同时测定大量与微量元素，玻、塑器皿最好事 先用 0.2% AlCl3? 6H20 或 810% HCL 溶液中浸泡过 夜,洗净后备用，以防微量元素的污染。注 3 Mehlich3 法的土壤浸出液常带颜色,有粉红色、 淡黄色或橙黄色，深浅不一，因土而异。粉红色可

27、能与 Mn 含量高或浸提出的某些有机物质有关，黄色可能与 Fe 含量高或有机物质有关。溶液颜色可加入活性 C 脱色， 但会对 Zn 造成污染,故以不加活性 C为宜。 注 4 注意浸提温度的控制。冬季气温较低时，可采取 一些保温措施。 注 5 比色液中 NH4+和 EDTA 终浓度高时对 P 比色均有于 扰， NH4+多时生成兰色沉淀,EDTA多时不显色或生成 白色沉淀（EDTA 酸） 。试验表明，在一般钼锑抗比色 法的条件下NH4+不得大于 0.01molL， EDTA 不得大于 0.00lmol L。注 6 研究发现,若在工作曲线中分别加入一定量的 M3 浸提剂，显色后很快会在较高P 浓度的

28、各点出现沉淀,从 而影响测定结果的准确性。故选用空白校正的方法消除 试剂的误差,即：根据未知样品吸取浸出液的体积数， 相应地做空白测定，再从未知样品的结果中扣除掉空白 值。 注 7若浸出液中钾的浓度超过测定范围，应用 M3 浸 提剂稀释后再测定。 注 8使用 AAS 法测定有效 Ca、Mg 时，浸出液需要用 M3 浸提剂适当稀释120 倍后方可测定，可根据具体情 况确定稀释倍数。注 9 如果条件具备，可直接用电感耦合等离子发射 光谱仪（ ICPAES）进行测定，而不需要稀释；而且 在同一浸出液中可同时测定 P、K 、Ca、Mg、Fe、Mn、 Cu、Zn、B、Cd、Cr、Pb 等多种元素。 注

29、10应特别注意浸提过程的标准化。同时应进行空 白测定。 注 11使用 AAS 法测定有效微量元素 Fe、Mn、Cu 、 Zn 时，浸出液需要用 M3 浸提剂适当稀释后方可测定。 一般测 Fe 时，可能稀释 110 倍；测 Mn 时,可能稀释 2 10 倍；测 Cu、Zn 时一般不需要稀释。可根据具体情 况确定稀释倍数。第二部分ASI 分析方法 ASI 分析方法ASI 法分析项目pH OM P、K、Cu、Fe、Mn、Zn 、 、 、 、 、 NH4-N、Ca、Mg、(Na)、交换性酸 、 、 、 、 S、B 、ASI 土壤养分测定方法的优点： 土壤养分测定方法的优点： 土壤养分测定方法的优点在

30、M3 土壤养分通用提取剂的基础上改进而成； 该方法可以测定土壤中的 14 个指标、11 种营养元素； 应用联合浸提剂；全面考虑土壤中大、中、微量元 素状况及平衡； 不仅可以提高分析的效率，还是实现了土壤养分的 测定的系列化操作； 考虑主要营养元素吸附特性，使施肥量的确定更加 合理。ASI 分析方法pH : 土 : 水 = 1: 2.5 浸提， pH 计测定。 OM: 碱溶性有机质 活性有机质 腐质酸 碱溶性有机质-活性有机质 腐质酸) 活性有机质( 腐质酸 0.2 mol / L NaOH -0.01 mol / L EDTA2%甲醇浸提，比色法测定。P、K、Cu、Fe、Mn、Zn : 、 、

31、 、 、 、0.25mol/L NaHCO30.01mol/L EDTA0.01mol/L NH4F 浸提。 有效 P: 钼锑抗比色法。 K、Cu 、Fe、Mn 、Zn: 原子吸收分光光度计, 其中 K 用发射光 谱法分析测定, 其它用吸收光谱法即用元素灯测定。Ca、Mg、(Na)、交换性酸: NH4-N、Ca、Mg、(Na)、交换性酸:1mol/L KCl 浸提。 NH4-N: 靛酚蓝比色法。 Ca、Mg、(Na):原子吸收分光光度计, Na用发射光谱法分析测 定. Ca、Mg 用吸收光谱法即用元素灯测定,是但需加入镧或 锶盐做释放剂。 0.08 mol/L CaH4(PO4)2 浸提。 S

32、 - 比浊法; B 姜黄素比色法。S、B:主要试剂氢氧化钠、EDTA、甲醇、Superfloc127碱溶性有机质-活性有机质 (腐质酸） OM: 碱溶性有机质-活性有机质( 腐质酸） P、K、Cu 、Fe 、Mn、Zn : Cu 、Fe、Mn 、碳酸氢钠、 EDTA、氟化铵 、Superfloc127、三氧化 二锑、浓盐酸、浓硫酸、钼酸铵、明胶、硝酸银、抗 坏血酸、各元素的标准储备液。Ca、Mg、(Na)、交换性酸: NH4-N、Ca、Mg、(Na)、交换性酸:氯化钾、 Superfloc127、苯二甲酸氢钾、苯酚、次氯 酸钠、三氧化二镧、浓盐酸、酚酞指示剂、各元素标 准溶液。S、B:磷酸二氢

33、钙、 Superfloc127、浓盐酸、硝酸银、浓硝 酸、冰醋酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP-K30） 、硫酸钡、 姜黄素、浓硫酸、无水甲醇、硫硼混和标准溶液。pH :Ph4.01、6.87、9.18 的标准缓冲溶液仪 器仪器： 仪器：紫外分光光度计； 搅拌器； 加液器； Ph 计； 原子吸收分光光度计。1、土壤有机质(OM)的测定 土壤有机质(OM)的测定 (OM) 原理： 原理：土壤有机质有 90%以上是腐殖质组成的，土壤 的腐殖质中的胡敏酸和富啡酸均溶于碱，且呈棕 褐色，当用碱提取土壤中的腐殖质时，在一定的 浓度范围内，腐殖质的量与其颜色呈正比，既提 取液的颜色越身，土壤有机质的含量越高。在

34、一 定的波长条件下，进行比色，可测定土壤有机质 的含量。试剂配制： 试剂配制：浸提剂的配制 称取 160g NaOH、74.4g EDTA 二钠，放入 1000ml 烧 杯中，加水溶解，倒入已经加水 5L 的 25L 塑料桶中，再 加入 400ml 甲醇，最后加水至 20L，摇匀。最后各成分 的浓度为 0.2mol/L NaOH0.01 mol/L EDTA 2%甲醇。 Superfloc127 溶液 将已溶解的 0.5g Superfloc127，加水定容至 10L。操作步骤： 操作步骤：取 1ml 土样，放入样品杯中，用浸提剂加液 器加入 25ml 浸提剂，在搅拌器上10min，然后 再加

35、入 25ml Superfloc127 溶液，摇匀后放置 20min。再用专用稀释加液器取2ml 上清夜，加 10ml 水，用 1cm 光径的比色杯，在 420nm 波长处 读取其吸光度。土壤有机质标准曲线： 土壤有机质标准曲线：称取在 105下烘干 4h 的纯腐殖酸 0.5g（如果纯度不 是 100时，换算成 0.5g 纯腐殖酸所需的重量） ，放入 500ml 容量瓶中，放入浸提剂 250ml，再用 Superfloc127 溶液定容至 500ml，该溶液相当于 5的 土壤有机质含量。然后用移液管分别吸取该溶液 10ml、 8ml、6ml、4ml、2ml 和 0ml 于不同的土样杯中，此时土

36、 样杯中的有机质含量分别相当于5%、4%、3% 、2%、1% 和 0%。然后，用专用稀释加液器取上述标准系列 2ml, 加 10ml水，用 1ml 光径的比色杯，在 420nm 波长处比色， 分别读其吸光度。再用过原点线性方程拟和有机质含 量与吸光度的关系。结果计算： 结果计算：在 ASI 方法中，可用以下公式计算土壤有机质含量： OM（）7.296 A 式中：OM 是土壤有机质含量， 单位为， A 为吸光度。2、土壤有效磷、钾、铜、铁、猛、 土壤有效磷、 锌 的测定 原理： 原理：适用于土壤有效磷、钾、铜、铁、猛、锌 的测定，其主 要成分为 NaHCO3 、EDTA 、NH4F 和 Supe

37、rfloc127。其中的 HCO3离子是石灰性土壤中有效 Ca-P 的理想提取剂，也能 提取出部分的 Fe-P 与 Al-P； F离子是 Al-P 的强力提取剂， 其次是 Fe-P ，再次才是 Ca-P 。 NH4+ 离子可有效提取土壤中 的 K+ 。在浸提剂中的 Superfloc127 可有效阻止可见 ASI 提取 剂对不同形态的 P 皆具有提取作用，可作为一种良好的通用 提取剂。EDTA 作为螯合剂，可把 Cu、Fe、Zn、Mn 浸提出 来，然后用原子吸收分光光度计（AA）测定。试剂配制： 试剂配制：浸提剂的配制 称取 210g NaHCO3、37.2g EDTA 二钠，3.7g NH4

38、F，加水溶解，再加入 0.5g 已溶解的 Superfloc127， 最后，最加水定容至 10L，摇匀。最后浸提剂中各成分 的最终含量为 0.25mol/L NaHCO30.01 mol/L EDTA 0.01 mol/L NH4F 。 Superfloc127溶液 将已溶解的 0.5g Superfloc127，加水定容至 10L。联合浸提步骤： 联合浸提步骤：取 2.5 毫升土样，加入 25 毫升 ASI 浸提液，用每分 300315 转的搅拌机（器）搅拌10 分钟，过滤。(搅拌 速度不要过高，否则使 Superfloc127 的链断裂，降低其 效果)。土壤有效磷的测定试剂配制： 试剂配制

39、：磷溶液“A”： 称取 0.45g 三氧化二锑于 1000ml 烧杯中，加 5ml 浓 HCl 将其溶解，再加 300400ml 水（溶液呈乳状） ，然后将烧杯浸于冷水中，边搅拌，边小 心加入145ml 浓 H2SO4。 将 7.5g 钼酸铵溶解于 300ml 水中。 上述两种溶液冷却至室温后，混合，定容至 1000ml。 磷溶液“B”： 将 7g 无磷明胶溶解于 500ml 热水中， （如明胶含磷，冷却后使其通过 阴离子交换树脂，再用 2000ml 无离子水把明胶洗净即可） ，稀释至 10L， 加入 10ml 0.01 mol/L AgNO3，以防止微生物生长。 磷显色液“C”： 测定的当天

40、，将150ml 磷溶液“A”加到 1000ml 磷溶液“B” 中，并加入 1g 抗坏血酸，溶解后便可使用。磷标准溶液： 磷标准溶液：1000ml/L 磷标准储备液：称取 4.07gCaH4(PO4)2H2O，溶解 在 500ml 水中，加入5ml 浓 HCl，定容至 1000ml。 用移液管分别吸取 1000ml/L 的磷标准溶液0ml、0.25ml、 0.5ml、1.0ml 和 2.0ml 放入 100ml 容量瓶中，用 ASI 浸提液定容 至刻度，即为含磷为 0.0、2.5、5.0、10.0、20.0mg/l 的标准系 列。操作步骤： 操作步骤：用加液稀释器取 1ml 滤液，加 9ml 水

41、和 10ml 磷显色液“C” 于样 品杯中，混匀，半小时后用分光光度计（波长 680nm）测定 磷含量。同时做标准曲线。测磷前，也可用原子吸收分光光度计测定显色液中 K 的含量。结果计算：P(mg/L)= AK25/ V 式中：P 为土壤有效磷的含量，单位为 mg/L。 A 为吸光度。K 为标准系列中拟和的转换系数。 25 为浸提剂的体积（ ml） 。 V 为土壤样品的体积（ml） 。土壤速效钾的测定土壤速效钾的测定除了标准系列外，基本上不需要其它试剂。 土壤速效钾的测定除了标准系列外，基本上不需要其它试剂。钾标准溶液： 钾标准溶液：1000ml/L 钾标准储备液：称取 110烘干 2h 的

42、KCl 1.9068g 于 1000ml 容量 瓶中，溶解后用纯水定容至 1000ml。 标准系列的配制：用移液管分别吸取 1000ml/L 的钾标准溶液 0ml、0.5ml、 1.0ml 和 2.0ml 放入 100ml 容量瓶中，用 ASI 浸提液定容至刻度，即为含磷为 0.0、2.5、5.0、10.0、20.0mg/l 的标准系列。 具体操作时，可将磷和钾配制成混和标准系列，与土壤磷的测定同时 进行。操作步骤： 操作步骤：在钾的测定中，往往和磷的测定同时进行，既用加液稀释器取 1ml 滤液， 加 9ml 水和 10ml 磷显色液“C”于样品杯中，混匀，即可在原子吸收分光光 度计（波长 7

43、66.5nm，狭缝宽 0.7nm，线性范围为 2.0mg/L）上测定钾含量。 同时做标准曲线。结果计算： 结果计算：K(mg/L)= C25/ V 式中：K 为土壤速效钾的含量，单位为 mg/L。 C 为待测液中 K 的浓度，可以从原子吸收分光光 度计直接读出。 25 为浸提剂的体积（ml） 。 V 为土壤样品的体积（ml ） 。土壤速效铜、 土壤速效铜、铁、猛、锌的测定与土壤速效钾的测定一样，在原子吸收分光光度计上测定土壤速效铜、 与土壤速效钾的测定一样，在原子吸收分光光度计上测定土壤速效铜、铁、猛、锌 离子时，仅需配制其标准溶液和标准系列即可。 离子时，仅需配制其标准溶液和标准系列即可。标

44、准试剂： 标准试剂：铜、铁、猛、锌标准储备液：用盐酸溶解纯金属元素，配制 1000ml 的标准储备液。或购买 1000ml/L 的铜、铁、猛、锌标准溶液。用移液管分别吸取铜标准液 10ml、铁标准 液 50ml、猛标准液 20ml 和锌标准液 10ml 于 100ml 容量瓶中，用无离子水稀释至刻度，即 为含铜、铁、猛、锌的浓度分别为 100mg/L、500mg/L、200mg/L 、100mg/L 的混和标准储 备液。 标准系列的配制：用移液管分别吸取上述混合标准溶液 0、0.5、1.0 和 2.0ml 放入 100ml 容量瓶中，用 ASI 浸提液定容至刻度，其中各元素的含量如下表： 系列

45、 1 2 3 4 Cu (mg/L) 0.0 0.5 1.0 2.0 Fe (mg/L) 0.0 2.5 5.0 10.0 Mn (mg/L) 0.0 1.0 2.0 4.0 Zn (mg/L) 0.0 0.5 1.0 2.0操作步骤： 操作步骤：用原滤液在原子吸收分光光度计上分别测定铜、铁、猛、锌离子含量 即可，同时做标准曲线。 铜（波长 324.8nm，狭缝宽 0.7nm，线性范围为 4.0mg/L） 铁（波长 248.3nm，狭缝宽 0.2nm，线性范围为 5.0mg/L） 猛（波长 279.5nm，狭缝宽 0.2nm，线性范围为2.5mg/L） 锌（波长 313.9nm，狭缝宽 0.7

46、nm，线性范围为 1.0mg/L）结果计算： 结果计算： M(mg/L)= C25/ V 式中：M 为土壤有效铜、铁、猛、锌的含量，单位为 mg/L。 C 为待测液中铜、铁、猛、锌的浓度，可以从原子吸收分光光度计 直接读出。 25 为浸提剂的体积（ml ） 。 V 为土壤样品的体积（ml） 。3、土壤交换性酸、铵态氮、有 土壤交换性酸、铵态氮、 效钙和镁的测定原理： 原理：土壤胶体上吸附的 H+、Al3+、NH4+、Ca2+ 和 Mg2+离 子在 K+的代换作用下，可进入到溶液中。然后，分别 采用碱滴定、比色和吸收光谱分析等手段测定其含量， 由于这些离子采用一种浸提剂既能满足要求，所以， 将他

47、们放在一起介绍。浸提剂的配制： 浸提剂的配制：称取 745g KCl 溶解在约 5000ml 的纯水中，并加入 0.25g 已溶解的 Superfloc127，最后，最加水定容至 10L， 摇匀。最后 KCl 的浓度为 1mol/L。 Superfloc127 溶液将已溶解的 0.5g Superfloc127，加水定容至 10L。浸提步骤：取 2.5 毫升土样，加入 25 毫升 lmol/L KCl 浸提液，搅拌 10 分钟，过滤。土壤交换性酸的测定试剂配制： 试剂配制：0.01mol/L 的标准碱溶液 称取 0.40gNaOH 用去离子水溶解定 容至 1000ml。然后用笨二钾酸氢钾标定。

48、 标准碱溶液的标定方法为：称取经 105烘干过的笨二钾酸 氢钾（分析纯）少许，于 100ml 三角瓶中，用 25ml 水溶解后， 以酚酞作指示剂，用待标定的氢氧化钠溶液滴定至终点，计 算出氢氧化钠溶液的准确浓度。 酚酞指示剂：称取0.05g 酚酞溶解于 50ml 乙醇（或甲醇）中， 再加入 50ml 水即可。操作步骤： 操作步骤：用溶液稀释器取 10ml 滤液，加入 15 毫升去离子水，再加入 34 滴酚酞指示剂，边搅边用 0.Ol N NaOH 滴定至粉红色。结果计算：交换性酸(mol/L)= NV2.5C/ W 交换性酸 式中: N 为氢氧化钠溶液的准确浓度 V 为滴定用去氢氧化钠溶液的体

49、积（ml） 2.5 为分取倍数 W 为样品的体积（ml） C 为经验校正系数，一般采用 1.21.5。土壤铵态氮的测定 试剂配制： 试剂配制：NaOH 溶液 将 27gNaOH、3gEDTA 二钠、5g 醋酸钠溶解于 1000ml 水中，储存于聚乙烯瓶中备用。其中 EDTA 二钠做为 金属离子的掩蔽剂，防止干扰。醋酸钠可增加颜色的稳定 性。 90的苯酚溶液：将 90g 苯酚溶解于 100ml 水中。 碱性苯酚溶液：测定当天，将 24ml 90的苯酚溶液加到 250mlNaOH 溶液中，摇匀。 次氯酸钠溶液：在 4L 的水中加入 1000ml 的次氯酸钠溶液即 可。NH+4N、Ca、Mg、 Na 标准液的配制 称取 3.82g NH4Cl（65 烘 4h） 、27.745g CaCl4 （105烘 4h）