1、糖代谢紊乱检验,本章教学要求：,1、掌握糖尿病的诊断标准、病因学分型；血糖的测定方法 GOD法和己糖激酶法）；葡萄糖耐量试验的原理和方法,2、熟悉胰岛素降血糖的主要机制；各种糖尿病监控指标的 生理意义和测定方法,3、了解糖代谢紊乱的各种疾病；其他体液葡萄糖的测定。,1.氧化供能：分解代谢提供人体75%能量； 2.人体组成成分之一：糖占人体干重的2%; 形成糖原储存在肝脏与肌肉中；形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受体等）、糖脂（神经组织和细胞膜重要组分）； 3.转变：其它糖及糖衍生物（核糖、脱氧核糖、氨基多糖）等；非糖物质（脂肪、氨基酸核酸）。糖代谢紊乱供能障碍一系列代谢变化,糖的生理功能,第一
2、节 概 述,一、血糖及血糖浓度的调节,血糖及血糖水平的概念:,血糖：指血液中的葡萄糖.,血糖水平：即血糖浓度。,正常血糖浓度： 3.96.1mmol/L,（一） 血糖的来源和去路,（二）血糖浓度的调节,1. 肝脏调节转运调控：肝细胞膜G 载体可允许G 快速转运，达到平衡时，肝内外G 浓度几乎相等。酶的双向调控：从器官水平通过神经-激素的作用，使肝细胞内各种糖代谢的酶活性改变。升糖调节1：具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶，可促进肝糖原水解， 补充和升高血糖。 升糖调节2：肝脏具有活性高且易诱导的糖异生酶类，禁食或饥饿时能将非糖物质转化为糖（占55-90%）。 降糖调节：促进组织摄取葡萄糖，促进肝
3、糖原合成、抑制肝糖原分解、抑制糖异生。,2. 神经调节,部位1、下丘脑 2、自主神经（交感和副交感神经）,方式：1、直接作用于肝脏；2、调节激素的分泌而影响血糖。,内脏神经,迷走神经,3、激素调节,降低血糖浓度的激素, 胰岛素 胰岛素样生长因子,升高血糖浓度的激素 胰高血糖素 肾上腺素 生长激素 皮质醇 甲状腺激素,糖代谢紊乱：高血糖症与糖尿病低血糖症酮症半乳糖血症,二、 糖尿病及其代谢紊乱,(一)糖尿病的分型,高血糖症:空腹血浆血糖（FPG）7.3mmol/L（130mg/dl）,生理性：包括饮食性（高糖饮食）或情感性（情绪紧张，肾上腺分泌增加）,病理性：见于糖尿病；内分泌腺（甲状腺、肾上腺
4、皮质或髓质、胰岛细胞 功能亢进；颅内压升高刺激血糖中枢；呕吐、腹泻、高热等引起的脱水。,1、糖尿病概念：是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病，系胰岛素相对或绝对不足，或利用缺陷引起。,尿糖：若血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L，即超过了肾小球滤过率，出现尿糖。,。,糖尿病的分型 国际糖尿病学会推荐依据糖尿病病因分成四类1型糖尿病2型糖尿病特殊类型糖尿病妊娠期糖尿病（GDM）,（1）1型糖尿病胰岛素依赖型糖尿病、免疫介导糖尿病、特发性糖尿病 免疫介导糖尿病发病机制：胰腺细胞的破坏引起胰岛素绝对不足，且具有酮症酸中毒倾向。与遗传因素和环境因素有关。大多数患者体内存在自身抗体：胰岛细胞胞浆抗体（IC
5、A）胰岛素自身抗体（IAA）谷氨酸脱羧酶自身抗体酪氨酸磷酸化酶自身抗体IA-2和IA-2,免疫介导糖尿病特点：青少年多见起病较急血浆胰岛素和C肽含量低，糖耐量曲线呈低平状态胰腺细胞自身免疫性损伤是重要的发病机制治疗依赖胰岛素为主易发生酮症酸中毒遗传因素在发病中起重要作用，与HLA基因型相关,（2）2型糖尿病 胰岛素非依赖型糖尿病发病机制：表现为胰岛素抵抗，即靶细胞膜上胰岛素受体数目减少 或者缺陷，即患者胰岛细胞对胰岛素不敏感，胰岛细胞 功能减退。,2型糖尿病特点：典型病例常见肥胖的中老年人起病缓慢血浆中胰岛素含量绝对值并不降低，但在糖刺激后呈延迟释放IgA等自身抗体呈阴性单用口服降糖药一般可以
6、控制血糖发生酮症酸中毒比例较1型低有遗传倾向，但与HLA基因型无关。,（）妊娠性糖尿病,（）特殊类型的糖尿病1、细胞基因缺陷 2、胰岛素作用基因缺陷3、胰腺的外分泌疾病 4、内分泌疾病,(二）糖尿病的诊断标准,，不主张作第三次OGTT试验。,（三）糖尿病的代谢变化, 高血糖 糖尿、多尿、水盐丢失 高脂血症和高胆固醇血症 蛋白质代谢异常：蛋白分解加速，负氮平衡 酮血症 乳酸性酸中毒,三、低血糖症1、概念： 低血糖症 是指血糖浓度低于2.2mmol/L（葡萄糖氧化酶法）时临床出现一系列因血糖浓度过低引起的症候群。,发病原因：来源 去路,激素效应：升血糖激素缺乏，降血糖激素过剩。肝病变：肝功严重损伤
7、致肝糖原减少和糖异生严重障碍。长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加，血糖消耗过多。,分类：,低血糖症,空腹性低血糖,刺激性低血糖,反应性低血糖症,外源性低血糖症,酒精性低血糖症,半乳糖性低血糖症,餐后性低血糖症,功能性低血糖症,型糖尿病或糖耐量受损伴有的低血糖症,营养性低血糖,四、糖代谢的先天异常 （一）糖原贮积病（自学） （二）半乳糖血症,1、概念：,2、生化缺陷：酶的缺陷,半乳糖,半乳糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸,UDPG,UDP-半乳糖,葡萄糖-6-磷酸,半乳糖激酶,半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶 （最常见）,UDP-半乳糖-4-差向酶,临床表现：酶缺乏导致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉积在肝脏、肾
8、脑、眼晶状体 和红细胞中，引起相应的病变。,代谢过程：,第二节 葡萄糖及其代谢相关物质的检验,一、血清葡萄糖测定,测定方法,无机化学法,有机化学法,酶法,（一）无机化学法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性,（二）有机化学法：邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等,Cu2+,OH-,Cu+,Glu,磷钼酸,显色,邻甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏碱 蓝绿色化合物,缩合,脱水,分子重排,特异性差,干扰因素多,（三）酶法,（1）葡萄糖氧化酶法（GOD法）（2）己糖激酶法（HK）,操作简单，特异性较高，是血糖测定的首选方法但溶血、 GSH、Vc、胆红素，可引起测定结果偏低。,1. 葡萄糖氧
9、化酶法(GOD),原理：,葡萄糖O2+H2O GOD 葡萄糖酸内酯2O2 22O2 + 4-氨基安替比林+酚 POD 红色醌类化合物 + 2O +O2,评价,葡萄糖ATP 葡萄糖-磷酸ADP 葡萄糖-6-磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖内酯+NADPH NADPH在340nm有吸收峰，其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。,原理：,评价：本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化 分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。,2. 己糖激酶法（法）,葡萄糖耐量试验概念适应证操作方法葡萄糖耐量曲线临床意义,二、糖耐量试验,（一）葡萄糖耐量试验,概念：耐糖现象、糖耐量增加、糖耐量降
10、低糖耐量试验：口服或注射一定量葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平，称为糖耐量试验。（GTT）,口服葡萄糖耐量试验（OGTT）静脉葡萄糖耐量试（IGTT）,1、空腹血糖水平在临界值（67mmol/L)而又疑为糖尿病患者； 2、空腹或餐后血糖浓度正常，但有发展为糖尿病可能的人群； 3、以前糖耐量异常的危险人群； 4、妊娠性糖尿病的诊断； 5、临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理解释者； 6、作为流行病学研究的手段。,OGTT试验适应证：,第一步：试验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150g，且维持正常活动影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹1016h.第二步：坐位取血后
11、5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给予，不超75g。糖后每隔30分钟取血1次，共4次。必要时可延长时间，可长达服糖后小时。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验。整个过程不可吸烟、和咖啡、喝茶或进食。,OGGT方法：标准化,参考范围：空腹血糖FPG6.1mmol；服糖后3060分钟血糖升高达峰值， 一般10mmol；服糖后小时内恢复至空腹血糖水平。同时测 定上述各时间的尿糖均为阴性。,临床意义：,1.糖耐量正常NGT： 6.1mmol， h 7.8mmol,2.空腹血糖受损IFG： 6.17.8mmol， h 7.8mmol,3
12、.葡萄糖耐量受损IGT： 7.0mmol， h 7.811.1mmol,4.糖尿病性糖耐量DM： 7.0mmol， h 11.1mmol,三、糖化血红蛋白（GHb）测定、GHb反映测定前周内血糖的平均水平，故可作为糖尿病长期控制的良好指标。、可鉴别糖尿病性高血糖及应激性高血糖，前者GHb水平多增高，后者正常。,四、糖化血清蛋白测定（果糖胺，SP） *临床意义：血清蛋白比血红蛋白半衰期短，约为17 19天，测定SP可有效反映患者过去12周前血糖水平，是糖尿病近期控制的一个指标。,五、胰岛素测定及胰岛素释放试验血胰岛素测定有助于了解胰岛细胞合成和分泌功能以及指导治疗，但不作为诊断糖尿病的依据。正常
13、人口服葡萄糖后，血浆胰岛素水平在3060分钟上升至高峰，可为基础值的510倍，34小时恢复到基础水平。,胰岛素测定临床意义： .对有空腹低血糖的患者进行评估。 .确认需胰岛素治疗的糖尿病患者。 .判断型糖尿病的预后。 .评估胰岛素抵抗。,六、C-肽测定及C-肽释放试验血肽测定有助于了解细胞合成和分泌功能以及指导治疗，但不作为诊断糖尿病的依据。正常人口服葡萄糖后，在3060分钟上升至高峰，肽水平升高5倍。,七、尿液葡萄糖测定,（一）定性测定 （二）尿中糖的鉴定 （三）定量测定：邻甲苯胺法,八、脑脊液葡萄糖测定：定量同血浆葡萄糖,九、酮体的测定,（一）概述：,酮体：乙酰乙酸、-羟丁酸及丙酮三者统称为酮体,20%,78%,2%,酮血症：酮体形成过多引起血中含量增高，称为酮血症。,酮体形成过多的原因,糖尿病：,糖摄取不足：脂肪动员,糖原贮积病：脂肪动员,碱中毒：代偿,酮体的生成：,糖代谢障碍,脂肪酸分解,（二）尿和血酮体的测定：,（不能同时检测酮体三种成分）,Gerhardts 氧化铁试验,乙酰乙酸,硝普纳反应,丙酮,测定,临床意义：1、如有酮体存在，需确定酮酸中毒状态2、酮血症的诊断对指导胰岛素治疗最有价值。,尿酮体测定：,
