1、1-51、 目的：大米新鲜与否，会密切影响成品酒的口味与风味及其保质期。采用此方法把关大米的新陈度。2、 范围：本操作标准适合于检测大米的新陈度。3、 相关文件和参考资料：无4、 原理：酸度指示剂法：大米经过储存，其内的脂肪酸被脂肪酸酶氧化或水解，分解出游离脂肪酸，使溶液的 PH 值发生变化。酸度指示剂在一定 PH 下呈现不同颜色，随大米氧化程度情况依次呈现绿色黄色橙色。愈创木酚法、胚染色法、愈创木酚对苯二胺并用法：利用大米中过氧化氢酶催化过氧化氢，促使过氧化氢放出活性很强的氧，氧化作为氢供给体的愈创木酚生成四愈创醌，从而使其颜色变深，颜色越深，说明大米中过氧化氢酶活性越高，证明大米越新鲜，是
2、利用过氧化氢酶为“ 载体”来表示大米的新鲜程度。目前用单一的显色方法判断大米的新陈度存在一定的缺陷，各方法都有其适用范围。但上述方法之间具有互补性，综合采用新鲜度显色体系能克服单一方法的缺陷，提高大米新陈度判定的可靠性。5、 环境/安卫因素项目 要素内容 控制措施酒精1、易燃2、易挥发3、刺激性1、配制、使用时佩戴防护眼镜和手套。2、一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗。3、远离火种、热源，存放温度30。4、密封保存，与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放。对苯二胺1、致敏作用1、戴安全防护眼镜、戴橡皮手套2、远离火种、热源, 防止阳光直射 , 保持容器密封, 应与氧化剂、酸类、食用化工原料分
3、开存放安卫因素愈创木酚1、 可燃2、 强烈刺激性3、 有毒1、远离火种、热源，存放温度30。2、在通风橱内进行操作3、不可皮肤接触，戴安全防护眼镜、戴橡皮手套4、应与氧化剂、酸类分开存放6、准备：6.1 仪器和设备：2-5名称 最小分度值 数量 用途玻璃棒 5 溶解溶液小烧杯（50ml） 5 盛放待溶解药品小烧杯（5ml ） 1 盛放反应液分析天平 0.1mg 1 称量100ml 容量瓶 5 配制药品25ml 比色管 1 测定试剂瓶 5 储存原液5ml 刻度吸管 0.05ml 1 吸取指示剂50ml 刻度试管 1ml 1 配制使用液培养皿 盛放大米样品6.2 试剂：6.2.1 原液：取甲基红
4、0.1g，溴百里酚蓝 0.3g 溶于 150ml95%乙醇内，加水稀释至 200ml。6.2.2 使用液：将原液与水按 1：50 混合作为使用液。6.2.3 1%愈创木酚溶液：取 1ml 愈创木酚溶于 100ml95%的乙醇溶液中6.2.4 1%过氧化氢溶液：将浓度为 30%的过氧化氢溶液用蒸馏水稀释 30 倍6.2.5 3%过氧化氢溶液：将浓度为 30%的过氧化氢溶液用蒸馏水稀释 10 倍6.2.6 2%对苯二胺溶液：称取 2 克对苯二胺用 95%酒精进行溶解，并定容至 100ml。6.3 标样/控制样无6.4 样品准备：常温下测定7.操作：7.1 设备安装：无7.2 仪器校准：无7.3 操
5、作程序与关键点提示：操作程序 关键点提示1、酸度指示剂法：用天平称取大米试样 2g，放入比色管中，再加使用液 4ml，振动后观察溶液显色情况，大米越新鲜越绿，已氧化的大米粒由黄色变为橙色。1、将加入比色管中的大米试样与使用液充分混合反应。2、摇匀后立刻观察溶液颜色变化3、如果大米测定结果为不新鲜则可直接判定为不新鲜，如果大米测为新鲜，则需用下一步进一步验证3-52、愈创木酚法：取大米约 6g 置于比色管中，加 1愈创木酚溶液 10ml，振动 20 次左右，将愈创木酚液移入另一比色管或小烧杯中，静置后，加入 1过氧化氢溶液 3 滴，在静置状态下，观察愈创木酚液显色程度。如是新米，经过 13min
6、，白浊的愈创木酚溶液从上部开始呈浓赤褐色；陈米则完全不着色；如是新、陈米混合,新米比例大,呈色反应快，而且呈浓赤褐色；陈米比例大，呈色反应慢，而且呈淡赤褐色。1、在静置状态下观察愈创木酚显色2、注意显色时间的控制为 3min 之内3、胚染色法：取 100 粒大米放入培养皿中，加入1%愈创木酚溶液，以浸过米粒为宜，摇动培养皿 12分钟，倒掉愈创木酚溶液，加入 1%过氧化氢 23 滴，浸润米粒，如不够，可补加 12 滴，摇匀放置，观察其颜色变化，新大米颜色为紫红色，越新鲜颜色越深，陈大米颜色浅，或没有颜色。1、应让所有米粒充分接触过氧化氢4、愈创木酚-对苯二胺并用法：取 50100 粒大米置于比色
7、管中，加入 1%愈创木酚溶液 4 ml，振动后静置 2 分钟左右，再加入 3%过氧化氢溶液 34 滴，振动后，加入 2%对苯二胺溶液 3 ml，振动，静置后倒掉试管中溶液，用水冲洗试样进行观察，新鲜大米显色深，为紫黑色，陈大米着色慢而浅。1、应将大米与愈创木酚溶液充分混合反应后再静置2、加入过氧化氢及对苯二胺溶液后都应进行充分混合。7.4 流程图酸度指示剂法测定大米新鲜度操作步骤移取 4ml 甲基红-溴百里酚蓝使用液加入比色管中，使大米和反应液充分混合反应称取大米试样 2g，放入比色管中用酸度指示剂法来判断大米显色是否为绿色？ 判为不新鲜否称取大米试样 6g，放入比色管中加 1愈创木酚溶液 1
8、0ml，振动 20 次左右，将愈创木酚液移入另一比色管或小烧杯中静置后，加入 1过氧化氢溶液 3 滴，在静置状态下，观察愈创木酚液显色程度。用愈创木酚法来判断大米显色是否为赤褐色？ 判为不新鲜否是取 100 粒大米放入培养皿中，加入 1%愈创木酚溶液，以浸过米粒为宜，摇动培养皿 12 分钟，倒掉愈创木酚溶液往培养皿中继续加入 1%过氧化氢 23 滴，浸润米粒，如不够，可补加 12 滴，摇匀放置，观察其颜色变化用胚染色法来判断大米显色是否为紫红色？ 判为不新鲜否大米越新鲜显色越绿经过 13min，白浊的愈创木酚溶液从上部开始呈浓赤褐色；陈米则完全不着色新大米颜色为紫红色，越新鲜颜色越深，陈大米颜
9、色浅，或没有颜色。4-5是是取 50100 粒大米置于比色管中，加入 1%愈创木酚溶液 4 ml，振动后静置 2 分钟左右再加入 3%过氧化氢溶液 34 滴，振动后，加入2%对苯二胺溶液 3 ml，振动，静置后倒掉试管中溶液，用水冲洗试样进行观察用愈创木酚-对苯二胺并用法来判断大米显色是否为紫红色？判为不新鲜否是判为新鲜新鲜大米显色深，为紫黑色，陈大米着色慢而浅。5-58.数据处理：无9.异常结果排查：10.结束/清理：10.1 吸管、小烧杯、容量瓶、玻璃棒、培养皿的刷洗：可使用少量清洗剂进行刷洗，自来水、蒸馏水冲洗干净，室温下放置备用。10.2 比色管的刷洗：可使用少量清洗剂进行刷洗，自来水、蒸馏水冲洗干净，干燥，室温下放置备用。11.维护无12.测量/过程研究无 样品蒸馏？是否蒸馏结束样品蒸馏后需进行管路清洗
