1、高密度脂蛋白胆固醇四种测定方法的比较?18?肠促动药,能促进肠壁肌层神经丛释放乙酰胆碱,主要用于治疗胃肠运动障碍性疾病,包括胃食管反流慢性功能障碍和非溃疡性消化不良等.因此我们将 H 受体抑制剂雷尼替丁和促进胃肠蠕动剂西沙必利,在夜间睡前一次顿服,在临床治疗上收到了中国乡村医药杂志 2003 年 2 月第 1O 卷第 2 期与奥美拉唑近似的疗效,既方便病人服用,而且价格低廉,适用于广大基层医院使用.(收稿 2002-01-22 修画 20020821 编辑 罗远超)高密度脂蛋白胆固醇四种测定方法的比较张常武流行病学和临床研究证明,高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)与冠心病发病呈负相关.快速准确地检
2、测 HDLC 成为当今HDLC 检测方法研究中的一个热点.沉淀法“比较成熟但测试步骤繁琐,不利于自动化,并且离心过程中受温度影响.直接测定方法,操作简便,适合自动分析,日益受到检验人员的欢迎,但其特异性差.我们将目前常用的四种分析方法通过实验加以比较,找出它们的差别,以供实验人员参考.1 材料与方法1.1 仪器与试剂1.1.1E0S 一 880(半自动生化分析仪(意大利),8002 型角式十二管离心机(上海).1.1.2 总胆固醇(TCH) 和三酰甘油(甘油三酯)(TG)的测定采用温州东欧生物工程有限公司的试剂盒.TCH:CHLDPAP法,TG:GP0 一 POD 法.HDLC 测定采用四种试
3、剂分别是 温州东欧生物工程公司的试剂盒:PTAMg 沉淀法;上海长征医学科学有限公司试剂盒:聚乙二醇一 6000 沉淀法 ;温州伊利康生物技术有限公司试剂盒:直接测定法;温州东欧生物工程有限公司试剂盒:直接测定法.所用标准品均是盒内所带标准品.1.2 标本1.2.126 份标本为本站社区预防保健科高血压门诊病人标本,患者早晨空腹采血,室温静置 30 分钟,自行凝固后离心分离血清.当天完成 TCH,TG 和 HDLC 的测定.1.2.2 将无黄疸,无溶血,无严重脂浊的正常空腹血血清数份混合后,作为正常血清,经测定其 TCH 含量为 4.53mmol/L,TG 含量为 0.742mmol/L;另外
4、收集高值血清作为高脂血清TCH 为 6.24mmol/L,TG 为 1.23mmol/L.2 结果2.1 四种方法测定 HDLC 的精密度比较将混合的正常血清作为低值血清,高脂血清作为高值血清,再取两者等量混合作为中值血清,分别用四种方法测定 HDLC,每天 2 次,连测 3天,共 6 次,结果见表 1.表 1 四种方法测定 HDLC 的精密度比较(士 s,mmo/L)结果表明前两种方法所测结果的均值相近(其原理实为同一类方法),都低于后两种方法,合并变异系数亦低于后两者,说明前两种方法的精密度较后两种好.用东欧沉淀法代表沉淀法,伊利康直接法代表直接法相互比较,经统计学检验,低,中,高三份样品
5、的均值相比,差异如下低值血清:t 一 4.063,P0.01,差异有显着性;中值血清:f 一 3.850,P0.01,差异有显着性;高值血清 tt=1.778,P0.05,差异无显着性.说明用两类方法测定低,中值血清中 HDLC 的含量存在着明显的方法差异,而高值血清,两种方法的差异不明显.可能在低,中值时非特异因素的影响较明显.2.2 沉淀法与直接法的相互关系由于 2.1 的情形,我们仅选一种沉淀法与一种直接法做比较,选 26 份标本中含低,中,高三种浓度的血清 10 份,用两种方法检测,平行双样,取均值,并计算偏差.以沉淀法为对照,偏差=(Yx)/x100o,4,所得结果如表 2.表 2
6、沉淀法与直接法测定 1O 份标本结果,作者单位:277700 山东省苍山县卫生防疫站用直线回归得伊利康直接法(Y)与东欧沉淀法(X) 的相互关系式为 Y1.34X+0.01485,r=0.9255,说明直接法与沉淀中国乡村医药杂志 2003 年 2 月第 10 卷 2 期法有一定的相关性,直接法测定结果比沉淀法偏高,本实验偏差达 6.1346.39.2.3 低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)对 HDLC 测定的干扰根据 2.2 沉淀法所测结果,利用公式.计算得到 2 号样品中 LDLC 含量为 1.83mmol/L(为低 LDLC 样),10 号样中LDLC 含量为 3.41mmol/L(为高 L
7、DLC 样). 分别取 2 号样和 1O 号样与等量的 3 号样混合,组成新的 2 号样和 10 号样,在同一时间内两样分别用东欧沉淀法和伊利康直接法测定其HDLC 含量,连测 6 次(上,下午各 3 次),得到表 3 的结果.表 3LDLC 对 HDLC 测定结果的影响样品号xs(mmo坠l/L)CV()东欧沉淀法,样品中 LDLC 含量增加,HDLC 测定结果的标准差虽略有增大,但变异系数却有所下降,说明精密度是较好的.而伊利康直接法,样品中 LDLC 含量增加,HDLC 测定的标准差和变异系数都在增加,说明精密度不好,即伊利康法受样品中 LDLC 的影响明显.2.4 温度对东欧沉淀法测定
8、 HDLC 的影响将含量为 4Omg/dl(即 1.04mmol/L)的标准血清分别在夏季(7 月 26 日,气温 32.C)和秋末(1O 月 26 日,气温 15.C)分别连测 6 次的测定结果列于表 4.表 4 温度对 HDLC 测定的影响结果说明气温升高沉淀法测定 HDLC 的结果偏高 ,且精密度差(本次实验在气温高时与标准值相差 5,气温低时与标准值相差 0.38)?19?3 分析与讨论3.1 沉淀法精密度较好,但受温度的影响,特别是气温较商的季节,影响较明显.这可能与气温较高时离心产生高热使沉沱完全所致,可以采取用恒温离心机或稀释血清的方法克服.沉淀法的原理是沉淀含载脂蛋白 B(Ap
9、oB)的脂蛋白,HDLC 巾有极微量的 ApoB,即沉淀剂能使微量的 HDLC 沉淀,但影响是极微小的.3.2 直接法虽然快捷有利于自动化,其结果也与沉淀法有较好的相关性,但本实验表明其结果比沉淀法偏高,精密度较差.这可能与聚阴离子和表面活性剂的特异性差,而使 LDLC 也参与酶的反应,而此种条件下 LDLC 与酶的反应量效关系等一些因素并未确定,所以 LDLC 的影响大小有一定的随机性 ?这与文献.的报道是一致的.本实验中的两种直接法都属于文献.中所研究的 PPD 法,这种方法的缺陷在于无法从根本上消除酶系对 LDLC 的副反应,而使结果偏高.由于人体中 LDLC 远大于 HDLC,所以这种
10、方法不是很准确的.3.3 在 I 陆床检验中选择和使用检验方法及试剂,要根据现有的仪器设备和技术力量,结果分析更要根据使用的试剂和方法,不能凭主观经验处事.检验人员必须真正掌握各种检验方法的特点.参考文献1 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第 2 版.南京:东南大学出版社,1997.2792812 屈步华,董伟,等.两种直接测定高密度脂蛋白胆固醇的方法与沉淀法的对比.临床检验杂志,2001.19(5):2632653HuangYC,KaoJT,TsaiKS.Evalutionoftwohomogeneousmethodsformeasuringhighdensitylipoprotein
11、cholestero1.JbClinMed,1998,132(3):195(收稿;2002 一 O222 修回:2OO2 一 O513 编辑; 马鸣岗)隐球菌性脑膜炎 7 例报告刘群英隐球菌性脑膜炎(以下简称隐脑)是较常见的中枢神经系统感染.近 2O 年来,由于广谱抗生素,肾上腺皮质激素 ,抗肿瘤化疗药物及器官移植术后抗排斥药物广泛长期应用,尤其是艾滋病的流行,免疫缺陷人群的扩大,其发病率有逐年增高趋势,且其起病隐匿,临床表现无特征性,误诊率及病死率较高,已引起医学界的广泛关注.近 1O 年来本院收治 7 例,现报道如下 .1 临床资料1.1 一般资料 7 例隐脑中.男 5 例.女 2 例.年
12、龄 2O 68 岁.平均 38 岁.有基础疾病 4 例:肝硬化失代偿期,重症慢性肺源性心脏病,2 型糖尿病,慢性肾病各 1 例.入院后误诊为结核性脑膜炎 4 例,病毒性脑膜炎 1 例,肺性脑病 1 例,肝性脑病 1 例.起作者单位:650111 武瞢云南总队医院病呈急性 1 例.亚急性 4 例,慢性 2 例,被确诊为隐脑时病程 9天至 2 个月.1.2 确诊依据本组 7 例均为住院病人.腰穿脑脊液(CSF)涂片墨汁染色找到新型隐球菌 6 例,CSF 真菌培养阳性 1 例.1.3II 缶床症状及体征首发症状均有程度不等的头痛,中度发热者 4 例.高热者 1 例,恶心 6 例,呕吐 3 例,神志障碍 3 例,视力下降 1 例,复视 1 例,抽搐 1 例,颈项强直 3 例,颏胸距 2 横指3 例,克氏征,布氏征阳性各 2 例,眼底视盘(视乳头)水肿 3 例.1.4 辅助检查脑脊液检查:7 例腰穿测颅内压均升高 ,其中脑脊液压力3.5kPa 者 3 例 CSF 外观无色透明 5 例,微混浊 2 例.白细胞数量轻至中度增高(1Ob200)10/L6 例.显着增高(20010/L)1 例,分类中皆以淋巴细胞为主 .蛋白质 0.451.83g/L,糖 0.13.2mmol/L,氯化物 92121