1、 湖 南 福 来 格 生 物 技 术 有 限 公 司 企 业 标 准Q/ABVK 0092010阿莫西林合成酶（IPA-SA）2010-10-10 制订 2010-10-10 实施湖 南 福 来 格 生 物 技 术 有 限 公 司发 布Q/ABVKQ/ABVK 0082010I前 言本标准依据GB/T1.1-2000标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则编写。本标准化由湖南福来格生物技术有限公司提出。本标准化由湖南福来格生物技术有限公司起草。本标准主要起草人：柳杏辉、陈梅。本标准的复审周期为三年。本标准 2010 年 10 月制定并实施，现用标准为 2010 年版。Q/ABVK 008
2、20101阿莫西林合成酶（IPA-SA）1 范围本标准规定了阿莫西林合成酶（IPA-SA）的技术要求，试验方法，检验规则、包装、运输、贮存。本标准适应于合成阿莫西林等其他相关产品的生物催化剂（酶）。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，但鼓励根据本标准达成协议的各方研究使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 191 包装储运图示标志QB/T 1803-1993 工业酶制剂通用试验方法QB/T 1804-1993 工业制剂通用检验规则和标志Q
3、B/T 1805.3-1993 工业用蛋白酶制剂JJF 1070-2005 定量包装商品净含量计量检验规则国家技术监督局 172 号（1997） 产品标识标注规定国家质量监督检验检疫总局令（2005）第 75 号定量包装商品计量监督管理办法中国药典2005年版二部。3 定义阿莫西林合成酶（IPA-SA）：即本标准中的阿莫西林合成酶（IPA-SA）。4 技术要求4.1 理化指标4.1.1 外观： 本品为黄色或棕色球形颗粒4.1.2 粒径(250450m)： 95 %4.1.3 活力(28、湿品)： 80 u/g4.1.4 -内酰胺酶： 不得检出(开环值0.5ml) 4.1.5 含水率 60 %4
4、.2 净含量偏差应符合定量包装商品计量监督管理办法规定5 检验方法检测样品的准备不含保护溶液的成品酶：直接取样品进行检测。含保护溶液的成品酶:取样品约30g，置50100ml的2#砂芯漏斗中，用去离子水洗涤三次，抽干至无水滴流出后备用（若暂不进行检测应用干净干燥的容器密封保存以防水份蒸发）。5.1 外观检测取样品1g左右置透明玻璃容器中，室内自然光下目测。5.2 粒径检测Q/ABVK 00820102取样品少量，在微钠粒度仪（winner 99）下，按微钠粒度仪（winner 99）操作规程对样品进行检测。5.3 活力(28、湿品)检测5.3.1 原理青霉素(Pen G)在阿莫西林合成酶（IP
5、A-SA）作用下转化成 6-APA 和苯乙酸，用 NaOH 滴定苯乙酸，根据 NaOH 的消耗量计算阿莫西林合成酶（IPA-SA）的活力。5.3.2 酶活力定义在一定反应条件下，每克阿莫西林合成酶（IPA-SA）每分钟转化 Pen G 生成 6-APA 的微摩尔数。5.3.3 溶液配制（1）0.02mol/L、pH8.0 的磷酸盐缓冲液称取 4.76g K2HPO43H2O、0.55g KH2PO4溶解于 950ml 去离子水中，用 0.1mol/L 的 NaOH 溶液调 pH 至 8.0，再用去离子水定容至 1000ml。（2）5%青霉素钾溶液称取青霉素钾盐 10.00g，用 0.02mol
6、/L、pH8.0 的磷酸盐缓冲液溶解（加 150ml 左右） ，再定容至 200ml，溶液现配现用。（3）0.1mol/L NaOH （参照中华人民共和国药典）5.3.4 仪器自动滴定装置（浆式搅拌，恒温，pH 自动滴定仪） 。5.3.5 检测精确称取样品 200mg 于 50ml 的烧杯中，加入预热到 28 的 40ml 5%的青霉素钾溶液，开启搅拌，控制反应温度 28，反应中用 0.1 mol/L NaOH 溶液调 pH 至 8.0，控制反应 pH8.0，记录约 10 分钟左右 NaOH 的消耗体积（ml） 。5.3.6 活力(28、湿品)计算活力(28、湿品) （u/g）min10/Tg
7、WLolClVNaOHaVNaOH：滴定中消耗的 NaOH 体积（ml）CNaOH：NaOH 溶液的摩尔浓度（ mol/L）W：样品的重量（g）T：滴定时间（min）5.4 -内酰胺酶检测5.4.1 溶液配制（1）磷酸盐缓冲液（pH7.0）取磷酸氢二钾 9.64g与磷酸二氢钾 3.14g，加去离子水至1000ml。（2）6-APA溶液配制称取0.627g6-APA，用100ml磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解。（3）醋酸钠缓冲液（pH4.5）取冰醋酸 69.3 ml，加水至 1250 ml,另取结晶醋酸钠 136.5g，加去离子水至 1000 ml,再将两Q/ABVK 00820103溶液混合均
8、匀。（4）0.005mol/L碘滴定液 （参照中华人民共和国药典）0.05mol/L的碘滴定液用pH4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液稀释10倍即得。该溶液最好现配现用。（5）0.005mol/L硫代硫酸钠滴定液 （参照中华人民共和国药典）0.01mol/L硫代硫酸钠滴定液用去离子水稀释20倍即得。该溶液最好现配现用。5.4.2 测定样品：量取6-APA溶液50ml，置100ml的锥形瓶中，加入总酶活为100U左右的固定化酶，记录固定化酶的重量 （g），置恒温振荡器37振摇1小时（振荡频率160rppm），快速取出过滤。样W精密量取滤液2ml(也可直接从上层取清液，注意不能有酶)，立即加至已加入0.0
9、05mol/L碘滴定液10ml的250ml的碘量瓶中，在室温暗处放置15分钟，用0.005mol/L的硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液5滴，继续滴定至蓝色消失，记录消耗的硫代硫酸钠滴定液体积（ml）。样V空白：除不加样品外，其余操作同上，记录消耗的硫代硫酸钠滴定液体积 （ml） 。空V5.4.3 计算：开环值 =（ - ）100U (ml)空V样 样W5.5 含水率检测称取样品约1g，用快速水份测定仪（红外），按水份测定仪（红外）操作规程，于130对样品进行检测（可采用其它干燥设备在130下干燥失重的方法检测）。5.6 净含量偏差检测按JJF1070规定进行。6 检验规则6.1
10、组批生产中混料后，同一罐消毒固定化酶为一个批号。6.2 出厂检验产品需经生产单位的质检部门按本标准的要求检验合格，开具合格证书后方可出厂。出厂检验项目：外观、酶活力、-内酰胺酶。抽样：同一批产品中，分别从上、中、下部位各取 30-40g，混合均匀，随意抽检。6.3 型式试验产品在下列情况之一时应进行型式试验：a)新产品试制鉴定正式生产后，如材料、结构、工艺有较大改变，可能影响产品性能时；b)产品长期停产，恢复生产时；c)出厂检验结果与上次型式试验有较大差异时；d)国家质量监督机构提出型式检验要求时；Q/ABVK 00820104e)连续生产时每两年进行一次。型式试验项目：为本标准规定的全部项目
11、或按检验细则的规定执行。抽样：从出厂检验合格的产品中随机制取有代表性的样品进行检验，或按检验细则的规定执行。6.4 判定检验中若有不合格项目，可从该批产品中重新加倍抽样复检，并以复检结果作为最后判定依据，或按检验细则的规定执行。7 标志、包装、运输和贮存7.1 标志产品的包装标志必须符合国家技术监督局172号（1997）产品标识标注规定，有以下内容：7.1.1 制造厂名称及地址；7.1.2 生产日期；7.1.3 产品名称/型号；7.1.4 产品标准编号。7.2 包装固定化酶采用硬质聚乙烯容器包装，内衬聚乙烯薄膜袋；包装容器应能密闭，遮光，防潮；有利于保证产品的质量和方便运输和贮存。7.3 运输与贮存产品运输中应避免剧烈撞击和日晒。产品贮存在干燥、通风好，无腐蚀气体的仓库，贮存环境应不得有暖源，贮存温度为28。7.4 产品负责期产品负责期从生产日期起算为1年。负责期也可由双方约定。
