1、1分子光谱:由分子的吸收或发光所形成的光谱称为分子光谱（molecular spectrum），分子光谱是带状光谱。2分子荧光分析:某些物质被紫外光照射激发到单重激发态后，在回到基态的过程中发射出比原激发波长更长的荧光，通过测量荧光强度进行定量分析的方法。 3气相干扰：是指干扰发生在气相过程中（如电离干扰、激发干扰）以气相化学反应引起的干扰。4LP-PCR：利用同位素、荧光素等对引物进行标记，用以直观地检测目的基因。5毛细管电泳:是指离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。6红外吸收光谱：又称为分子振动转动
2、光谱。当样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收了某些频率的辐射，并由其振动或转动运动引起偶极矩的净变化，产生分子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁，使相应于这些吸收区域的透射光强度减弱。7Fermi 共振：当一振动的倍频与另一振动的基频接近时，由于发生相互作用而产生很强的吸收峰或发生裂分。8荧光发射：电子由第一激发单重态的最低振动能级基态（ 多为 S1 S0跃迁），发射波长为2 的荧光； 10-710 -9 s 。9原子光谱: 原子的电子运动状态发生变化时发射或吸收的有特定频率的电磁频谱.原子光谱是一些线状光谱,发射谱是一些明亮的细线,吸收谱是一些暗线.10分子吸收光谱:分子对辐射选择性
3、吸收使基态分子跃迁至更高能级的激发态而发出的特征光谱为分子吸收光谱.11内转化：处于相同的重态的两个离子间的非辐射跃迁.12宽带吸收：是用紫外可见分光光度法测量溶液中分子或离子的吸收，吸收宽带宽从几纳米到几十纳米，是用的是连续光源，这种测量方法叫13塔板理论：在每一块踏板上，被分离柱分在气液两相间瞬时达到一次分配平衡，然后随载气从一块踏板以脉动式迁移，经过多次分配平衡后，分配系数小的组分先离开精馏塔，分配系数大的后离开，从而使分配系数不同的组分分离。14高效液相色谱法：是一种新型分离分析技术，它是在经典的液相色谱基础上，引入气象色谱理论，在技术上采用高压输液泵，梯度洗脱技术，新型高效填充剂以及
4、各种高灵敏度检测器。15化学发光反应：在化学反应过程中，某些化合物接受能量而被激发，从激发态返回基态时，发射出一定波长的光。16超临界流体色谱：是以超临界流体作为流动相的色谱方法，是 20世纪 80年代以来发展迅速的一个色谱分支，所谓超临界流体，是指在高于临界压力和临界温度时的一种物质状态。17原子光谱：由原子的吸收或发射所形成的光谱称为原子光谱18振动弛豫：同一电子能级内以热能量交换形式由高振动能级至低相邻振动能级间的跃迁。发生振动弛豫的时间 10 -12 s。19内转换：同多重度电子能级中,等能级间的无辐射能级交换。通过内转换和振动弛豫，高激发单重态的电子跃回第一激发单重态的最低振动能级。
5、20紫外可见吸收光谱:利用物质的分子或离子对紫外和可见光的吸收所产生的紫外可见光谱及吸收程度对物质的组成、含量和结构进行分析、测定、推断的分析方法。21分子发光:基态分子受到能量激发，吸收了一定能量后，跃迁至激发态，激发态分子在很短时间内以辐射跃迁（发光）形式释放能量并返回基态，便产生了分子发光。22化学干扰：是指在凝相或气相中，任何导致待测元素离解成基态原子发生变化的化学反应。23电泳技术：电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术（electrophoresis tech
6、nique）。24高效液相色谱法:以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。25电渗流：毛细管内壁表面的电荷所引起的管内液体的整体流动，来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用26生物传感器：通常是指由一种生物敏感部件和转化器紧密结合,对特定种类化学物质或生物活性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。27电磁波谱：按照波长的大小顺序排列可得到电磁波谱，不同的波长属不同的波谱区，对应有不同的光子能量和不同的能级跃迁。二、填空题（每空 1分，共 26分）1、色谱分析法是利用各待测组分在互不相溶的两相中的吸附、分配、离子交换、排斥渗透等性质方面的不同而进行分离和分析的方法。2
7、、通常情况下，样品池需要放在盛液氮的石英杜瓦瓶内，来测定低温磷光。3 、消除物理干扰的最常用方法是配制与被测组成相似的标准溶液。当试液组成不完全知道时，也可用标准加入法来消除物理干扰。4 、凝胶电泳是由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。5 . PAG孔径的大小主要由 Acr和 Bis这两种单体的浓度决定。可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的单体浓度。6 、根据生物传感器中生物分子识别元件上的敏感材料可分为酶传感器、微生物传感器、免疫传感器、组织传感器、基因传感器、细胞及细胞器传感器。7 、原子吸收光谱分析中的主要干扰因素是化学干扰8 、原子吸收分光光度法是基于从光源辐射
8、出待测元素的特征谱线的光，通过样品的蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收 9 、原子吸收分光光度计常用的光源是空心阴极灯10 、被测元素在火焰中与氧形成难离解的氧化物。这是气相干扰的情况。14 、PAG 是由丙烯酰胺（acrylamide，Acr）单体和 N，N- 亚甲双丙烯酰胺（N，N，N，N-methylene bixacrylamide，Bis）交联剂通过自由基聚合而成的一种多孔三维网状结构。15 . 根据生物传感器的信号转换器可分为电化学生物传感器、半导体生物传感器、测热型生物传感器、测光型生物传感器、测声型生物传感器等16 、紫外可见分光光度法的适合检测波长范围是 200760n
9、m 17 、在光学分析法中, 采用钨灯作光源的是可见光谱18 、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是 400760nm19 、吸光度为 0.20.7 时，相对误差较小。20 、原子吸收光谱是线状光谱21、仪器分析以物质的某些物理或物理化学性质（光、电、热、磁等）为基础，并借助于特殊的仪器，对待测物质进行定性、定量及结构分析和动态分析的一类方法。12 、根据激发方式不同，分子发光可分为光致发光、热致发光、场致发光和化学发光等。其中，光致发光根据激发态不同可分为荧光和磷光两种。15 . 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛细管电泳等。16 、电泳
10、技术优点：快速、准确、重现性好。18 、按被测物质对辐射吸收的检测方法差别（明背景下测吸收暗线或暗背景下测共振明线）分为：吸收光谱与共振波谱。19 、某些物质被紫外光照射激发到单重激发态后，在回到基态的过程中发射出比原激发波长更长的荧光，通过测量荧光强度进行定量分析的方法。 三、简答题1、比较紫外-可见分光光度计与可见分光光度计有什么不同?(1)区别是测定波长范围不同,紫外一般用氢灯,测定波长范围 180-350nm，可见一般用钨灯，测定波长范围 320-1000nm.所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源，能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物，发现吸光度超过 2，便不再显示，
11、是正常现象。吸光度是透光率的负对数，吸光度超过 2 就是说透光率小于 1%，低于仪器的检出限，就不再显示了，至于能不能用分光光度计，取决于你测定的波长。2、简述蛋白质电泳技术基本原理及其应用?聚丙烯凝胶电泳：是利用聚丙烯凝胶为介质来对蛋白质进行分离。一般制成凝胶柱或凝胶板凝胶是由两部分组成。这两部分凝胶的浓度、蝗虫也组分和例子强度、PH 以及电场强度都是不同的，即不连续，这样电泳对样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带，然后再进行电泳分离。3、哪些测定条件影响原子吸收光谱分析的灵敏度?A、物理干扰：由于试液和标准溶液的物理性质的差异，引起进样速度，晋阳两，原子化效率所产生的干扰。B
12、、化学干扰：由于待测元素与共存组分发生了化学反应，生成了难挥发或难竭力的化合物，使基态原子数目减少所产生的干扰。C、电离干扰：某些易电离元素在火焰中产生电离，是基态原子数减少，降低了元素测定的灵敏度。D、光谱干扰：抓哟有谱线干扰和背景干扰。4、说明原子吸收光谱仪的主要组成部件及其作用?（1）锐线光源：作用是发射谱线宽度很窄的元素共振线；（2）原子化器：将试样蒸发并使待测元素转化为基态原子蒸气；（3）分光系统：分为两部分；即外光路和单色器。外光路的作用是使锐线光源辐射的共振发射线能正确的通过或聚焦于原子化区，并把透过光聚焦于单色器的入射狭缝。单色器是将待测元素的吸收线与领近谱线分开；（4）检测系
13、统：作用是将待测光信号转换成电信号，经过检波放大，数据处理后显示结果。（5）同步调制系统。5、简要说明气相色谱法的分离原理?气相：气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。21、导数光谱法主要优点？1.可分辨两个或两个以上重叠光谱，只要光谱的吸收峰有一定的距离，或吸收峰虽完全重叠，但峰宽不同，导数光谱均可分离；2.可从强吸收光谱陡峭处，辨认另一组分的弱吸收峰；3.可从宽大吸收带中精确确定最大吸收波长；4.可消除浑浊背景和干扰吸收的
14、影响，提高选择性；5.解决多组分同时测定问题。22、生物发光分析?1. 灵敏度极高例：荧光素酶和磷酸三腺甙(ATP)的化学发光分析，可测定 210-17。Mol/L 的ATP，即可检测出一个细菌中的 ATP 含量2. 仪器设备简单 不需要光源、单色器和背景校正； 3. 发射光强度测量无干扰 无背景光、散射光等干扰；4. 线性范围宽 5. 分析速度快 缺点：可供发光用的试剂少；发光反应效率低（大大低于生物体中的发光）；机理研究少。24、双向凝胶电泳（二维电泳）？第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的 PI 的不同，将蛋白质进行分离。第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳
15、（SDS-PAGE）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状 。25、确证性测序、从头序列序列分析的目的？1、确证性测序 通过测定对突变进行定位和鉴定，应用时测定野生型基因上同源区和突变体的相应序列直接在一张胶片上比较二者序列差异。（已知基因序列）2、从头序列 目的是提供一段 DNA 准确的核苷酸序列。（未知基因序列） .26、PAGE 的 特 点?1.具有分子筛效应，分辨率高2.样品不易扩散，用量少，灵敏度可达 10-6g3.化学性质稳定，分子结构中富含酰胺基具有稳定的亲水基团4.凝胶不带电荷，消除了电渗现象5.机械强度好，有弹性，在一定浓度范围内
16、无色透明6.网孔可调节27、超临界流体的特性?对于某些纯物质来说，具有三相点和临界点，如图所示，从图中可以看出，物质在三相点，气、液、固三态处于平衡状态，当处于临界温度和临界压力以上时，则不论施加多大压力，气体也不会液化，此时即非气体，也非液体，而是以超临界流体形式存在。21、紫外可见分光光度计基本原理?基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 分为:光谱分析法和非光谱分析法。光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。22、荧光与磷光的根本区别：?荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的；
17、而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。磷光具有如下三个特点：（1）磷光辐射的波长比荧光长（2）磷光的寿命比荧光长（3）磷光的寿命和辐射强度对于重原子和顺磁性离子敏感23、克服电离干扰的方法有：?1.采用较低温的火焰。2.加入消电剂。加入的消电剂，电离电位越低越好，至于加入量要根据实验来决定，不能无限量增加。25、电泳的基本原理?物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不
18、同，因此可使它们分离。27、什么是电动进样和压力进样?电动进样是将毛细管柱的一端及其相应端的电极从缓冲池中移出，放入试样杯中，然后在一准确时间范围内施加压力，使试样因离子移动和电渗流进入毛细管柱。 压力进样是用压差使试样溶液进入毛细管。产生压差的办法可以采用在检测器端抽真空，或者通过提高试样端液面。四、计算题（共 17 分，41 题 7 分，42 题 10 分，g 取 10 牛 / 千克）五、论述（共 2 题，每题 7 分）29、红外光谱法的特点？（1）特征性高。就像人的指纹一样，每一种化合物都有自己的特征红外光谱，所以把红外光谱分析形象的称为物质分子的“指纹”分析。（2）应用范围广。从气体、
19、液体到固体，从无机化合物到有机化合物，从高分子到低分子都可用红外光谱法进行分析。（3）用样量少，分析速度快，不破坏样品。30、FTIR 光谱仪具有以下优点 ?A 光学部件简单，只有一个动镜在实验中转动，不宜磨损。b 测量范围宽，其波数范围可达到 45 0006cm-1c 精度高，光通量大，所有频率同时测量，检测灵敏度高。d 扫描速度快，可作快速反应动力学研究，并可与气相色谱 GC、液相色谱 LC 联用。e 杂散光不影响检测。f 对湿度要求不高。四、计算题1、将下列的溶液吸光度换算为透光度（%）（1）0.22 （2）0.431 答：由于 A=-lgT，T=-10 A（1）T=-1.66（2）T=
20、-2.672、激发原子和分子中的价电子产生紫外和可见光谱需要激发能量为 1.58.0 eV，问其相应的波长范围是多少？解：由于 E=hc/所以，能量为 1.50 eV 时1=hc/E=826(nm)能量为 8.00eV 时2=hc/E=154(nm)因此，激发能量为 1.508.00eV 时，相应的波长范围是 826154 nm。五、论述1、在气相色谱法中，怎样选择载气？载气为什么需要净化？如何进行净化处理？答:气相色谱中,常用的载气有氢气、氮气氩气、氦气等气体。选用何种气体及气体的纯度应根据检测器的种类和分析要求来确定。如，氮气扩散系数小，可用于氢陷检测器，但要除去载气体中的烃类组分。气相色
21、谱进行定性分析时，一般要将试样的色谱图与纯物质的色谱图进行对照以确定试样的组成；如果缺少纯物质，定性就比较困难，因此需要净化载气。29、琼脂糖凝胶的优缺点？（一）优点1.因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗2.对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象。3.凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合物、核酸、病毒 等大分子物质。4.透明度较好，可直接或干燥成薄膜后进行染色。5.不吸收紫外光，可直接利用紫外光吸收法作定量测定6.有热可逆性（二）缺点1.机械强度差，易破碎，浓度不能太低。2.易被细菌污染，不易保存，临用前配制。3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散，电泳后必须立即固定染色。4.与 PAGE 相比
22、，分子筛作用小，区带少。30、生物传感器优点?(1)根据生物反应的特异性和多样性,理论上可以制成测定所有生物物质的传感器 ,因而测定范围广泛(2)一般不需进行样品的预处理,它利用本身具备的优异选择性把样品中被测组分的分离和检测统一为一体，测定时一般不需另加其他试剂,使测定过程简便迅速,容易实现自动分析(3)体积小、响应快、样品用量少,可以实现连续在位检测(4)通常其敏感材料是固定化生物元件,可反复多次使用(5)准确度高,一般相对误差可达到 1%以内(6)可进行活体分析(7)传感器连同测定仪的成本远低于大型的分析仪,因而便于推广普及(8)有的微生物传感器能可靠地指示微生物培养系统内的供氧状况和副产物的产生，能得到许多复杂的物理化学传感器综合作用才能获得的信息34、生物传感器组成部分？一是生物分子识别元件(感受器 ),是具有分子识别能力的生物活性物质 (如组织切片、细胞、细胞器、细胞膜、酶、抗体、核酸、有机物分子等);二是信号转换器(换能器),主要有电化学电极(如电位、电流的测量)、光学检测元件、热敏电阻、场效应晶体管、压电石英晶体及表面等离子共振器件等，当待测物与分子识别元件特异性结合后,所产生的复合物(或光、热等) 通过信号转换器变为可以输出的电信号、光信号等,从而达到分析检测的目的。
