1、 免疫学教研室 人 工制 备抗体 抗体在疾病的诊断、免疫防治及其生物医学研究中发挥着重要作用，人工制备抗体是大量获得抗体的有效途径。一、多 克隆抗 体 免疫动物制备的抗体（抗血清）多为多克隆抗体，其优点是来源广泛，制备容易，但因其特异性不高、易发生交叉反应和超敏反应，其应用受到限制。图14 多克 隆抗 体的 产生 示 意图 天然抗 原常 含有 多个 抗原 表位，可激 活多 个B 细胞 克 隆并产 生针 对不 同抗 原表 位的特 异 性抗体，故所 获抗 血清 实际 为含有 多种 抗体 的混 合物，称为 多克 隆抗 体 二、单 克隆抗 体 通常将由一个始祖细胞分化、增殖所形成的遗传性状完全相同的细
2、胞群称为克隆。同一 B 细胞克隆中的所 有 B 细胞均表达相同 的 BCR，由一个 B 细胞克隆产生的只作用于单一抗原表位的高度特异性抗体称为单 克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）。每种 mAb其类、亚类及亲和力完全相同，具有高度均一性。1.杂交瘤技术 Kohler 和 Milstein 于 1975 年利用杂交瘤技术首次制备了 mAb（图15）。由于每个杂交瘤细胞均由一个 B 细胞与 一个骨髓瘤细胞融合而成，而每个 B 细胞仅识别一种抗原表位，故一株杂交瘤细胞仅能 合成及分泌针对单一抗 原表位的特异性抗体，经抗原筛选、阳性克隆扩增培养，即可获得分泌所需单克隆抗体的杂交
3、瘤细胞株。免疫学教研室 2 单克隆抗体的优点和应用 mAb 具有分子结构高度均一、纯度高、特 异性强、效价高、少或无交叉反应、制备成本低等优点，且易于在体外大量制备 和纯化，故在实验研究、临床诊断及治疗中已得到广泛应用。图15 杂交 瘤技 术及 单克 隆 抗体的 制备 示意 图 首先用 抗原 多次 免疫 小鼠，诱导抗原特 异性B 细胞 增殖。取 该免疫小鼠 脾细 胞（内含B 细胞），与小鼠 骨髓 瘤细 胞在 聚乙 二醇（PEG）作 用下 融合 为杂 交瘤细胞。在HAT 选 择性 培养 基中 培养，只有融 合的 杂交 瘤细 胞存 活和增殖。将 经抗 原筛 选的 阳性 克隆，经体外 培养 或接 种小 鼠腹 腔，经过一定 时间 后，取培 养上 清或小鼠 腹水，即 可获 得大 量mAb 免疫学教研室 三、基 因工程 抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody）又称重组抗体，是借助于 DNA 重组技术和蛋白质工程技术，在基因水平上对编码 Ab 的基因进行切割、拼接或修饰，并重新组装成新的抗体基因，经 转染适当受体细胞，使 其表达特定重组抗体。根据其制备原理的不同，基因工程抗体 又 可分为多种类型，如 人-鼠嵌合抗体、改 型抗 体、双特异性抗体、小分子抗体等。
