优化探究2017届高考生物一轮复习 第十二单元 生物技术实践（课件+试题）（打包6套）新人教版.zip

1传统发酵技术的应用1．根据相关知识，回答关于果酒、果醋和腐乳制作的相关问题。(1)当________________时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。(2)在________条件下，重铬酸钾与酒精发生反应呈现________色。(3)如图为腐乳制作的实验流程示意图，据图回答下列问题。①图中 A 代表________，其主要目的是________________________，同时还能_______________________________________________；②在配制卤汤中酒的含量一般控制在________左右，酒精含量过高腐乳成熟时间将会________；酒精含量过低，________，可能导致豆腐腐败。解析：在氧气、糖源都充足的条件下，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精发生反应呈现灰绿色；在腐乳制作过程中，在豆腐上长出毛霉后需加盐腌制，盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。卤汤中加酒需适量，酒精含量过高使腐乳成熟时间延长，酒精含量低，不足以抑制微生物的生长。答案：(1)氧气、糖源都充足(2)酸性 灰绿(3)①加盐腌制 析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬 抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质②12% 延长 不足以抑制微生物的生长2．(2016·景德镇模拟)如图表示葡萄酒酿制的简单过程，请据图分析：(1)从上图可知，甲图是为了使酵母菌进行________，以增加酵母菌的数量，乙图是为了使酵母菌发酵获得葡萄酒。最后，可以用________试剂检验是否有酒精生成。整个酿制过程一般将温度控制在 18～25℃，原因是___________________________________________________________________________。(2)为防止发酵液被污染，对使用的发酵瓶要________，并用________________消毒。(3)泡菜的制作离不开________菌，在泡菜的腌制过程中，还要跟踪检测亚硝酸盐的含量，2膳食中的亚硝酸盐一般________(填“会”或“不会”)危害人体健康。亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物________。解析：(1)甲图中容器留有一定的空间，以便于酵母菌进行有氧呼吸，有氧条件下酵母菌大量增殖，而在无氧条件下酵母菌进行无氧发酵，产生的酒精可用重铬酸钾试剂检验，且必须在酸性条件下。(2)为防止发酵液被污染，对发酵瓶要清洗干净，并用体积分数为 70%酒精消毒。(3)泡菜的制作离不开乳酸菌；膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康；亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——亚硝胺。答案：(1)有氧呼吸 重铬酸钾 这一温度最适合酵母菌生长和繁殖(2)清洗干净 体积分数为 70%的酒精(3)乳酸 不会 亚硝胺3．(2016·唐山月考)十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用________来检验。(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括________。A．温度控制 B．溶氧控制C．pH 控制 D．酶的控制(3)苹果酒在________的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是________________________________。(4)腐乳是用豆腐发酵制成的，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是________。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于________。解析：(1)在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。(2)酵母菌发酵需要控制条件：温度 18～25 ℃；溶氧控制，即要先通气后密封；pH 控制，偏酸性；利用酵母菌自身的酶进行发酵，不需要对酶进行控制。(3)苹果醋制备需要醋酸菌，温度要严格控制在 30～35 ℃，由于只有氧气充足时，醋酸菌才能进行旺盛的生理活动，所以要适时向发酵液中充气，保证有氧环境。(4)腐乳是用豆腐发酵制成的，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉，在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于培养基。答案：(1)重铬酸钾 (2)D(3)醋酸菌 只有在氧气充足的条件下，醋酸菌才能进行旺盛的生理活动(4)毛霉 培养基4．(2016·湖北八校联考)请回答下列与发酵技术和植物组织培养技术有关问题：3(1)腐乳一直受人们的喜爱，制作过程中发挥作用的微生物主要是毛霉，其代谢类型是________；吃腐乳时，会发现腐乳外部有一层致密的“皮” ，其实质是微生物的________，对人体无害；各地腐乳风味迥异，在原料和菌种相同时，可通过________制作出不同风味的腐乳。(2)俗话说“心急吃不了热豆腐” ，泡菜也不能急着吃，从防癌的角度考虑，应等到________________时食用。(3)人们常用化学药剂消毒法进行消毒，如碘氟擦拭伤口、氯气消毒水源；日常生活中也常用到________，如有人每周都会将碗筷放在开水中烧泡一段时间；实验室里使用接种室之前一般都要进行一项物理性的操作是____________，以杀死物体表面或空气中的微生物。解析：(1)毛霉以豆腐中现成有机物为营养物质，且生长在有氧气的环境，所以它的代谢类型为异养需氧型。腐乳外部有一层致密的“皮” ，其实质是微生物的毛霉菌丝。由于毛霉在不同的控制条件下，代谢产物不同，所以可通过控制不同的发酵条件制作出不同风味的腐乳。(2)亚硝酸盐是一种化学致癌因子，在制作泡菜初期，由于产生的亚硝酸盐多，所以最好等亚硝酸盐含量减少后开始食用。(3)日常生活中常采用高温加热煮沸消毒法。实验室里使用接种室之前一般都要进行一项物理性的操作是 30 min 或更长时间的紫外线照射。答案：(1)异养需氧型 (匍匐)菌丝 控制发酵的条件(2)亚硝酸盐含量(稳定且)较低(3)煮沸消毒法 紫外线照射(30 min 或一段时间或足够长时间)5．发酵食品加工中离不开微生物，例如果酒和果醋的制作离不开酵母菌和醋酸菌，腐乳的制作离不开毛霉等微生物。(1)腐乳是通过微生物发酵制成的佐餐食品，其制作流程如下所示，请回答有关问题：豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制①制作腐乳的原料中哪种有机物的含量比较高？____________________。毛霉可利用体内的酶将该成分分解成哪些小分子有机物？________________________。②在用盐腌制腐乳的过程中，若盐的浓度过低会出现什么现象？___________________________________________________________________。③卤汤中酒的含量为什么要控制在 12%左右？___________________________________________________________________。(2)如图是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，请回答相关问题：①酵母菌和醋酸菌在结构上的主要区别是酵母菌________________________。②葡萄汁装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，用________________消毒。4③制作________时应将开关 2 打开，胶管 1 长而弯曲在发酵过程中的作用是____________________________________________________。(3)用鲜牛奶发酵制作酸牛奶时，起作用的微生物是________________。解析：制作腐乳的原料豆腐，蛋白质含量高。毛霉可利用体内的蛋白酶将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸。在用盐腌制腐乳的过程中，若盐的浓度过低不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败变质。卤汤中酒的含量控制在 12%左右，酒精含量过低，不足以抑制杂菌生长；含量过高，腐乳成熟的时间将延长。酵母菌是真菌，属于真核生物，有真正的细胞核；醋酸菌是原核生物，无细胞核。葡萄汁装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒。制作果醋时应将开关 2 打开通入空气，因为醋酸菌是好氧菌，长而弯曲的胶管 1 可防止空气中杂菌的污染。制作酸牛奶时，起作用的微生物是乳酸菌。答案：(1)①蛋白质 小分子肽和氨基酸 ②不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败 ③酒精含量过低，不足以抑制杂菌生长；含量过高，腐乳成熟的时间将延长 (2)①有核膜包围的细胞核 ②体积分数为 70%的酒精 ③果醋 防止空气中杂菌的污染 (3)乳酸菌6．农村中泡菜的制作方法：将新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后加入盐水、香料及一些“陈泡菜水” 。密封后置于阴凉处，最适环境温度为 28～30 ℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸” ，前者是用盐过多，后者用盐过少。(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是________________________________________。(2)菜坛要密封的原因是________________________________________________________________________________________________________________。若菜坛有裂缝，可能会出现的结果是_____________________________________________________________________________________________________。(3)若制作的泡菜“咸而不酸” ，最可能的原因是___________________________________________________________________________________________。(4)加入一些“陈泡菜水”的作用是________________________________________________________________________________________________________。(5)制作泡菜的过程中，有机物的干重如何变化？菜坛内有机物的种类如何变化？ _________________________________________________。解析：泡菜制作是应用了乳酸菌的发酵原理，提供的新鲜蔬菜是它的培养基。乳酸菌是厌氧微生物，在缺氧的环境条件下发酵可产生大量乳酸，能抑制其他厌氧菌的生存；在有氧情况下，自身受抑制，不能进行乳酸发酵，使需氧菌繁殖而变质。乳酸菌生长繁殖需要消耗有机物，发酵过程中乳酸菌将一些大分子物质如蛋白质、脂肪、糖类分别分解成小分子的氨基酸、甘油、脂肪酸、葡萄糖等，因此，泡菜坛内有机物的种类增多，干重减少。答案：(1)消毒 (2)乳酸菌为厌氧微生物，密封后造成缺氧环境 将导致乳酸菌不能正常5生长，而一些杂菌大量繁殖，泡菜会变质 (3)盐过多，抑制了乳酸菌的发酵 (4)提供乳酸菌菌种 (5)有机物的干重减少，种类增加7．葡萄发酵可产生果酒、果醋，请利用相关的知识回答以下问题：(1)如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，④过程需要________等适宜条件。(2)自己在家中制作的果醋很容易腐败，而包装瓶上写着 105 ℃高温瞬时灭菌的果醋瓶上写着“不含任何防腐剂，最长保质期为一年” ，其中的奥秘是________。(3)在下图中用曲线表示正常果酒发酵阶段酵母菌种群个体数量的变化情况。解析：(1)④过程为制作果醋的阶段，用到的醋酸菌为好氧型细菌，生长的最适温度为30～35 ℃。(3)在有氧气的环境中，酵母菌大量增殖；在无氧环境中，酵母菌不能增殖。答案：(1)氧气、30～35 ℃ (2)高温杀死了微生物 (3)如图。若密封培养后期曲线有下降趋势也可。1生物技术在其他方面的应用1．请回答下列与菊花茎段组织培养实验操作有关的问题。(1)由于菊花茎段组织培养比较容易，故在配制 MS 固体培养基时，________(填“必须添加”或“不必添加”)植物激素。培养基配制完毕后，还需进行________灭菌。(2)应选用生理状况好的菊花嫩枝茎段作为________，这是因为其更容易被诱导________。(3)菊花茎段在接种前要用适当浓度的________溶液进行表面消毒。(4)接种前，工作台要用体积分数为 70%的酒精擦拭一遍。之后，所有的接种操作都必须在________旁进行，并且每次使用器械后，都需要用________灭菌。(5)接种后的锥形瓶最好放在________中培养。培养期间应注意的事项主要有：定期________，控制好________，并每日给予适当时间光照。解析：(1)菊花茎段自身能合成植物激素，因此培养基中不必添加植物激素，培养基配制完毕后需进行高压蒸汽灭菌。(2)外植体的选择直接关系到实验的成败，因此应选择容易被诱导脱分化和再分化的菊花嫩枝作为外植体。(3)为防止微生物污染，菊花茎段在接种前要用适当浓度的酒精和氯化汞溶液进行表面消毒。(4)为避免接种前、接种中污染外植体以及接种后污染环境，因此接种前，工作台要用体积分数为 70%的酒精擦拭一遍，接种过程中所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。(5)外植体在培养过程中要保持无菌环境，控制好温度，并给予适当光照。答案：(1)不必添加 高压蒸汽 (2)外植体 脱分化和再分化 (3)酒精和氯化汞 (4)酒精灯火焰 火焰灼烧 (5)无菌箱 消毒 培养温度2．下面是关于月季花药培养的相关问题，请回答下面的问题。(1)通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一种是花粉通过________发育成植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成________，再将其诱导分化成植株。两条途径主要取决于培养基中________。(2)通常选择________的花蕾作为实验材料，对花药取样后用________对其染色，镜检发现大多数的花粉含有两个核，该时期花药________(适宜、不适宜)进行接种。(3)在花药培养过程中发现：接种花药的培养基中，花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常。出现该现象的原因最可能是___________________________________________________________。(4)花药培养在育种上有特殊意义。采用花药培养的方法，可使花药粒发育成________倍体植株，在经过人工诱导________，使其能够正常生殖。该育种技术的最大优点是_______________________________________________。解析：(1)花药离体培养可以有两条产生植株的途径，除了花粉在诱导培养基上先形成愈伤2组织，再将其诱导分化成植株的途径外，还可以通过胚状体进一步分化产生植株。两种发育途径主要取决于激素的种类及浓度比。(2)通常选择完全未开放的花蕾作为实验材料，可以用醋酸洋红或龙胆紫溶液对花药进行染色，如果镜检发现大多数的花粉含有两个核，则该时期花药不适宜进行接种。(3)如果在接种花药的培养基中发现花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常，出现该现象可能由于花蕾消毒不彻底。(4)采用花药培养的方法获得的植株是单倍体植株，再经过人工诱导染色体加倍，使其能够正常生殖。单倍体育种最大优点是缩短了育种周期。答案：(1)胚状体阶段 愈伤组织 激素的种类及其浓度配比(2)完全未开放 醋酸洋红 不适宜(3)花蕾消毒不彻底(4)单 染色体加倍 缩短了育种周期3．育种工作者常采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株。下面过程是采用水稻的花药进行培养的步骤：选取水稻花药→对花药消毒→接种和培养→植物体请据此回答下面的问题：(1)诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素的影响，其中________、________是主要的影响因素；选择合适的________也是提高诱导成功率的重要因素。(2)花粉在发育过程中要经历____________、____________、____________等阶段，选取的水稻花药应为________期的花药，此时细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。(3)在剥离花药时，要尽量不损伤花药，原因是________________________________________________________________________________________________；同时还要彻底去除花丝，原因是______________________________________________________________________________________________________________。(4)通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径：一种是花粉通过________阶段发育为植株；另一种是在诱导培养基上先形成________，将其诱导分化成植株。(5)试管苗形成过程中，必须从培养基中获得无机盐或矿质元素和小分子有机物等营养物质。要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有________和________两类激素。解析：诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素的影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素；选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。花粉在发育过程中要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段，选取的水稻花药应为单核期的花药；在剥离花药时要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤的部位产生愈伤组织；同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成；通过花药培3养产生单倍体植株一般有两种途径：一种是通过胚状体阶段发育为植株；一种是先形成愈伤组织再将其诱导分化成植株。答案：(1)材料的选择 培养基的组成 花粉发育时期(2)四分体时期 单核期 双核期 单核(3)如果花药受损，接种后容易从受损伤的部位产生愈伤组织 与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成(4)胚状体 愈伤组织(5)细胞分裂素 生长素4．某年，我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。(1)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是________法，用这种方法提取橘皮精油的主要步骤是：石灰水浸泡、漂洗、_______、_______、静置、________。(2)在提取橘皮精油时，橘皮在石灰水中的浸泡时间为________以上，并且橘皮要浸透，这样最后才会得到高的出油率。(3)从橘皮中提取的橘皮精油的特点是______________，具有诱人的橘香味。(4)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，但组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至________期的花药进行培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有________法，某些植物的花粉细胞不易着色，需采用________法。解析：(1)提取橘皮精油的方法为压榨法，主要步骤有浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置、再次过滤。(2)橘皮在石灰水中的浸泡时间为 10 h 以上。(3)橘皮精油的特点是无色透明。(4)单核期细胞核由中央移向细胞一侧时期的花药培养成功率高。确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。某些植物的花粉细胞不易着色，需用焙花青­铬钒法，此种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。答案：(1)压榨 压榨 过滤 再次过滤 (2)10 h (3)无色透明 (4)单核 醋酸洋红 焙花青­铬钒5．请回答下列有关“胡萝卜素提取”的问题。(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。以下为提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→A→过滤→B→胡萝卜素。其中，A 过程叫________，B 过程叫________。(2)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将________和________控制在一定范围内。(3)图甲为提取胡萝卜素的装置示意图，请指出图中一处错误并改正：_____________________________________________________________________________。4(4)图乙是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。该鉴定方法的名称是________法。图乙中⑤为________，实验过程中点样时应注意_______________________________。(5)在图乙的胡萝卜素的结果示意图中，A、B、C、D 四点中，属于提取样品的样点是____________________________________________。解析：(1)根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点，一般用萃取法提取。(2)新鲜的胡萝卜含有大量的水分，在干燥时要注意控制温度和时间，温度太高、时间太长会导致胡萝卜素分解。答案：(1)萃取 萃取 浓缩(2)温度 时间(3)应避免明火加热，而采用水浴加热(4)纸层析 样品原点 快速细致并注意保持滤纸干燥(5)B 和 C6．如图为胡萝卜素粗品的鉴定实验装置示意图，请据图回答下列问题：(1)胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是________。(2)①的作用是____________________，⑥常用________，如果层析液没及⑤会导致_____________________________________________________。(3)A、B、C、D 四点中，属于提取样品的样点是_________________________。(4)该层析的目的是________________________________________________________________________________________________________________________。(5)在胡萝卜素的萃取过程中，一般采用水浴加热，而避免明火加热，这是因为______________________________________________________________。解析：胡萝卜素粗品的鉴定常用纸层析法，图示装置为纸层析装置，其中①为玻璃盖，其作用在于防止层析液挥发。②是色谱容器，③是滤纸，④是 U 形扣，⑤是样品原点。⑥是溶剂，常用石油醚，因为它具有沸点高、能充分溶解胡萝卜素、不与水混溶等优点。如果层析液没及样品原点⑤，会导致胡萝卜素溶解于层析液中，达不到鉴定的目的。答案：(1)纸层析法5(2)防止层析液挥发 石油醚 胡萝卜素溶解在层析液中，使鉴定失败(3)B 和 C(4)把 β­胡萝卜素分离开，便于鉴定(5)有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸7．(2016·石家庄质检)如图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料 A 可以是________等，研磨前加入的 B 应该是________。(2)通过上述所示步骤得到滤液 C 后，再向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液的目的是________________，再过滤得到滤液 D，向滤液 D 中加入蒸馏水的目的是________________。(3)在该实验中，将含有一定杂质的 DNA 丝状物分别放入体积为 2 mL 的 4 种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的 4 种滤液，含 DNA 最少的是滤液________。1 B 液中 搅拌研磨后过滤 滤液 E2 2 mol/L 的 NaCl 溶液中 搅拌后过滤 滤液 F3 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中 搅拌后过滤 滤液 G4 冷却的 95%的酒精溶液中 搅拌后过滤 滤液 H(4)DNA 鉴定的原理是__________________________________________。解析：选用洋葱、菜花等植物材料提取 DNA 时，要在切碎的材料中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨；DNA 在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度较高，而在 0.14 mol/L 的NaCl 溶液中的溶解度最小。向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液可以使 DNA 溶解，过滤除去不溶的杂质。向滤液中加入蒸馏水可降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析出，除去溶解在低盐溶液中的杂质；DNA 不溶于冷酒精，可利用这一原理进一步提纯 DNA；鉴定 DNA 的原理是在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。答案：(1)洋葱(菜花等) 洗涤剂和食盐(2)使 DNA 溶解 使 DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H(4)在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色8．(2016·吉林质检)回答下列有关从生物材料中提取某些特定成分的问题：(1)薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似，因此适合选用________法来提取。用此方法收集到的液体__________(是/不是)纯的薄荷油，原因是________________________________________________________________。6在此过程中，影响薄荷油提取量的主要因素有________和________。(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、________、________。(3)如图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果。图中实验组是________，实验得出的结论是________________。解析：(1)薄荷油和玫瑰精油都是芳香油，易挥发、难溶于水、化学性质稳定，因此可用水蒸气蒸馏法进行提取。由于薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物，不是纯的薄荷油。蒸馏温度太高、时间太短，产品品质就比较差。(2)胡萝卜素易溶于有机溶剂，可用有机溶剂进行萃取，步骤是：粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩。(3)胡萝卜素萃取后溶于有机溶剂，图中实验组是 B、C，对照组是 A、D。答案：(1)水蒸气蒸馏 不是 薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物 蒸馏时间 蒸馏温度(2)萃取 过滤 浓缩(3)B、C 萃取样品中不含 β­胡萝卜素9．(2016·衡水模拟)请回答下列相关问题：(1)在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用________消毒；在提取植物细胞的 DNA 时，需要先用洗涤剂溶解________。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用________法来分离提取，还可以用________和________等提取植物芳香油的方法。(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在 37 ℃培养箱中培养 24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有 A、B、C 三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 A________(填“敏感”或“不敏感”)；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 B________(填“敏感”或“不敏感”)；含 C 滤纸片周围的透明圈比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是________。(4)用来判断某选择培养基是否起到了选择分解纤维素的细菌作用，要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基7B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基解析：(1)在制作腐乳时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒；在提取植物细胞的 DNA 时，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。(2)提取植物芳香油的最常用方法有萃取法、蒸馏法和压榨法。(3)若含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对相应抗生素敏感，若含抗生素的滤纸片周围没有透明圈出现说明该致病菌对此抗生素不敏感。(4)将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于在选择培养基上生长的菌落数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。答案：(1)沸水 细胞膜(2)萃取 蒸馏 压榨(3)敏感 不敏感 抗生素 C 的耐药菌(4)C1微生物的培养与应用1．(2016·锦州模拟)回答下列微生物培养的问题：(1)如表是某培养液成分含量表，该培养液培养的微生物同化作用类型是________；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去的成分是________，应加入的物质是________。编号 成分 含量① (NH4)HCO3 0.5 g② KH2PO4 3.0 g③ CaSO4 0.5 g④ FeCl2 0.5 g⑤ 维生素 少许⑥ 水 1 000 mL(2)下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl H2O含量 0.5 g 1 g 0.5 g 100 mL①牛肉膏、蛋白胨在培养基中的作用是提供________、________、________等营养。②要用表中所给材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是________。③表中各成分含量确定的原则是________________________。④培养基配制好后，分装前应进行的工作是________。⑤从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法是________、________、________等。(3)微生物接种的方法很多，最常用的是________和________。解析：(1)培养基中不含有机碳源，可判断培养的生物同化类型为自养型；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去氮源(NH 4)HCO3，但需加入有机物提供碳源。(2)根据所培养微生物对各营养成分的需要量配制培养基的成分，若需观察细菌菌落状况需用固体培养基，还需添加琼脂；微生物培养时需对培养基、接种工具进行无菌处理，并进行严格的无菌操作。(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。答案：(1)自养型 (NH 4)HCO3(或①) 有机物(2)①碳源 氮源 维生素(或磷酸盐等) ②琼脂(凝固剂) ③所培养微生物对各营养成分的需要量 ④调整 pH ⑤高压蒸汽灭菌 烧灼接种环 酒精棉擦手(或棉塞塞试管口、在火焰旁接种)(3)平板划线法 稀释涂布平板法2．(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透2压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、____________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析：(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤 DNA 的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的鉴定。(5)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：(1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌 消毒 损伤 DNA 的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)灭菌3．(2016·银川统考)人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有________、________和________。(2)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在________旁进行操作。接种后的培养皿进行________，并在 37 ℃的________中培养。(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于________培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的________使 pH 升高，酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力________。3(4)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )A．多 B．少C．相等 D．几乎为零解析：(2)微生物培养注意严格按照无菌操作步骤。为防止培养皿中水汽蒸腾凝在盖子上再滴下来导致污染，所以将接种后的培养基倒置后再进行恒温培养。(3)加入酚红指示剂后在分解尿素细菌菌落周围出现红色环带，以鉴别细菌的分解能力，属于鉴别培养基。(4)以尿素为氮源的培养基中仅分解尿素的细菌能存活，故菌落数较少。答案：(1)高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌(2)酒精灯火焰 倒置 恒温培养箱(3)鉴别 氨 越强 (4)B4．从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从________环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择________的培养基，并在________条件下培养。(3)接种前要对培养基进行________处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在________条件下进行。(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。获得图 A 效果的接种方法是________，图 B 效果的接种方法是________。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是________，应当怎样操作才可避免此种现象？________。(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是______________________，应该保持________________(至少答两项)等不变。解析：本题考查微生物的纯化培养技术及实验过程的注意事项。(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中寻找，故培养嗜盐菌应从高盐环境中采集。(2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁殖。(3)微生物的分离及培养中必须保证无菌，包括培养基的灭菌和操作过程的灭菌等。(4)纯化培养中，接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后一种方法形成的菌落分布较均匀，前一种方法形成的菌落分布不均匀，先划线的部分菌落密集甚至相连，后划线的部分菌落分布稀疏。(5)探究温度对酶活性的影响时，温4度为自变量，酶活性为因变量，其他变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无关变量。答案：(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温(3)高压蒸汽灭菌 无菌 (4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌 每划一个新的区域前都要对接种环进行灭菌处理)(原因与操作要对应) (5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH5．(2016·辽宁统考)利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。某研究所为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。请进一步完善实验内容并回答相关问题：(1)实验步骤：①配制以________为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是________。②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现________和透明圈。③将接种针用________法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种至________(填“固体” 、 “半固体”或“液体”)培养基，在恒温摇床上培养 24 h，使细菌大量繁殖。④取与①培养基中相同的成分及配比，并加入少量碘液，使制作的培养基呈蓝紫色，灭菌并调节 pH，用________________法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化及其范围的大小，周围出现________的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。(2)上述实验步骤中，倒平板和接种的操作都应在超净台上的________附近进行。(3)上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基，④和⑤所用培养基属于________培养基。解析：(1)①欲筛选出能高效分解淀粉的菌株，培养基中应只有淀粉为唯一碳源，而无其他碳源；②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现菌落和透明圈；③为了避免杂菌的污染，接种过程中要进行无菌操作，如对接种针进行灼烧处理，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种至液体培养基进行有氧发酵；④用稀释涂布平板法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到题中制作的培养基上；⑤培养一段时间后，淀粉分解菌菌落周围会出现透明圈。(2)整个实验操作应是无菌的，倒平板和接种的操作都应在超净台上的酒精灯火焰附近进行。(3)从用途看，①所用培养基属于选择培养基，④和⑤所用培养基属于鉴别培养基。答案：(1)①淀粉 琼脂 ②菌落 ③灼烧 液体 ④稀释涂布平板(涂布分离) ⑤较大透明圈(浅色范围大)5(2)酒精灯火焰(3)选择 鉴别(鉴定)6．金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题：(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行________呼吸。(2)7.5% NaCl 肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括________________，用 7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。(3)操作中在血平板上的接种方法是________，接种操作前后需要对接种工具进行________灭菌。(4)在制备血平板时需将 pH 调节至________(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。(5)经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是____________________________。解析：(1)金黄色葡萄球菌是一种细菌，属于原核生物。培养过程无密闭处理，故它进行有氧呼吸。(2)7.5% NaCl 肉汤培养基可为微生物提供生长所需要的碳源、氮源、水和无机盐。用 7.5% NaCl 肉汤培养基进行选择培养是为了增加高度耐盐性的金黄色葡萄球菌的数量。(3)图示用的接种工具是接种环，说明在血平板上接种的方法是平板划线法。接种工具在接种前后都要进行灭菌处理。(4)金黄色葡萄球菌的生长环境为弱碱性，培养基在灭菌前要先调节 pH，因金黄色葡萄球菌能破坏红细胞，使其褪色，血平板上出现周围存在透明圈的菌落，说明有金黄色葡萄球菌，故血平板是鉴别培养基。(5)为增强实验结论的严谨性，应增加空白对照组。答案：(1)原核 有氧(2)碳源、氮源、水和无机盐 增加金黄色葡萄球菌的数量(3)平板划线法 灼烧(4)微碱性 冷却 鉴别(5)周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶但其他操作均相同的对照组7．(2016·邯郸模拟)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A。研究6人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题：(1)培养基中加入化合物 A 的目的是________，这种培养基属于________培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是________________。(4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法。(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是__________________________________________________________。(6)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用 10－4 、10 －5 、10 －6 稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了 3 个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________________________________________，此对照实验的目的是_____________________________________________________。解析：(1)在选择培养基中加入特定物质，可以筛选出特定的细菌。(2)根据题目所给的培养基配方， “目的菌”生长所需的氮源和碳源只能来自培养基中的化合物 A。异养需氧型细菌在培养时需要振荡。(3)获得纯净特定“目的菌”的关键是防止外来杂菌入侵。(4)平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是接种环，操作时一般采用灼烧灭菌。(5)为防止造成环境污染，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉。(6)计数目的菌数量时，注意设置一组不接种的空白培养基对照实验，此对照实验的目的是证明培养基制备过程中未被杂菌污染。答案：(1)筛选目的菌 选择(2)化合物 A 异养需氧型(3)防止外来杂菌入侵(4)接种环 灼烧(5)防止造成环境污染(6)不接种的空白培养基 证明培养基制备过程中无杂菌污染