1、肿瘤标志物检测 从实验室到临床,内容,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的应用影响因素,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的定义,肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及某些癌基因等。,肿瘤标志物简介理想的肿瘤标志物,特异性好灵敏度高与肿瘤分期或肿瘤大小有关与预后相关存在于体液特别是血液易于检测,绝大部分肿瘤标志物既存在于肿瘤中，也存在于正常人和非肿瘤患者中一种肿瘤标志物可在多种肿瘤呈阳性大部分肿瘤往往有多个肿瘤标志物阳性,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的合理应
2、用,筛查/早期诊断诊断 鉴别诊断治疗的监测随访 早期发现肿瘤复发和转移预后,肿瘤标志物的合理应用（一）筛查/早期诊断,仅用于特定人群的筛查!,不能单独用于肿瘤的诊断！,不能用于无症状人群的筛查!,假设（1）CEA诊断结直肠癌敏感性70%，特异性95%（2）结直肠癌在人群中的发病率是1/10,000问CEA用于无症状人群（健康人群）结直肠癌的筛查效力有多大？答10,000人中，如果有1%的患者，将有 例患者被检出； 例患者不能被发现。与此同时，将产生 个假阳性结果。,肿瘤标志物的合理应用（二）肿瘤的诊断与鉴别诊断,肿瘤标志物的合理应用（三）肿瘤治疗的监测,肿瘤标志物水平下降 与半衰期有关 手术或
3、治疗有效,更换试剂需要进行平行试验评估!,初次治疗前（手术、放疗、化疗、激素治疗）初次治疗后任何治疗前随访监测 肿瘤标志物明显增高后46周,采用同种试剂结果才具有可比性！,肿瘤标志物的合理应用（三）肿瘤治疗的监测,CA15-3在乳腺癌治疗检测中的作用,肿瘤标志物的合理应用（四）患者随访和复发的早期发现,肿瘤标志物的水平再次升高/ 肿瘤标志物升高的速度 高度提示肿瘤发生复发或转移 连续动态的监测，以个体患者的基线水平为基础，可避免假阳性和假阴性的出现与基线值相比，如出现100%的增长，具有100%的特异性肿瘤标志物的诊断价值 肿瘤的复发和转移的早期监测不依赖原发肿瘤标志物的释放!肿瘤标志物联合检
4、测 增加肿瘤发生转移的诊断价值,肿瘤标志物的合理应用（五）预后评估,肿瘤发生部位 肿瘤分期 (无 - , 局部的 远处转移) 肿瘤分级治疗前肿瘤标志物的水平肿瘤标志物的高水平提示肿瘤晚期，预后不良正常或轻微升高提示无疾病复发时间长，生存期长,有效治疗后无疾病复发时间的预后指标,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的联合检测,肿瘤标志物简介敏感性、特异性、受试者工作曲线,肿瘤标志物简介敏感性、特异性、受试者工作曲线,肿瘤标志物简介敏感性、特异性、受试者工作曲线,注：采用X2 检验，*表示和其他TM相比在本组中有最高的阳性率。*表示和其他TM相比在本组中有最低的阳性率,特异性为95%，以健康人为对照组，TM的
5、cutoff值及阳性率,三种主要肿瘤标志物在肺癌诊断中的应用,注：采用X2 检验，*表示和其他TM相比在本组中有最高的阳性率。*表示和其他TM相比在本组中有最低的阳性率,特异性为95%，以良性肺疾病为对照组，TM的cutoff值及阳性率,三种主要肿瘤标志物在肺癌诊断中的应用,肿瘤标志物简介敏感性、特异性、受试者工作曲线,图1 TM鉴别NSCLC与BLD,图2 TM鉴别SCLC与BLD,三种主要肿瘤标志物用于肺癌诊断的ROC曲线,内容,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的应用影响因素分析前的影响因素分析中的影响因素分析后的影响要求,样本因素,患者因素,分析前管理,肿瘤标志物应用分析前管理,样本处理,分析前
6、管理样本因素,重视患者的基线水平,合理选择肿瘤标志物,注意样本的采集时机,了解患者的临床状况,避免样本污染,药物、治疗措施及生活方式的影响,患者因素,分析前管理患者因素,分析前管理患者因素,ASCO: American Society of Clinical Oncology 美国临床肿瘤协会NACB: The National Academy of Clinical biochemistry of the American Association of Clinical Chemistry 美国临床生化协会EGTM: European Group on Tumor Markers (EGTM
7、) 欧洲肿瘤标志物专家组中国肿瘤标志物专家组,合理选择肿瘤标志物,肿瘤标志物在临床常见恶性肿瘤中的应用,肿瘤标志物在临床常见恶性肿瘤中的应用,分析前管理患者因素,重视患者的基线水平,治疗前的水平和最低水平随访前的水平,如果实验室更换了检测系统，所有正在随访中的患者都应当重新建立基线值。,分析前管理患者因素,注意样本的采集时机,多数肿瘤标志物没有证据表明存在明显的昼夜差异，可在一天中任何时间采血如需进行与前列腺有关的任何操作，应在操作之前采血检测PSA 不应当在经期采血检测CA125,分析前管理患者因素,了解患者的临床情况,分析前管理患者因素,5还原酶抑制剂导致PSA浓度下降（50%）化疗后肿瘤
8、标志物浓度可能短暂升高大麻可能使血清hCG浓度短暂升高吸烟可能使CEA的测定值轻度升高（与测定方法有关）,药物、治疗措施及生活方式的影响,分析前管理患者因素,避免样本污染,唾液污染 SCC升高 CA19-9升高 CEA升高 TPS升高汗液污染 SCC升高,内容,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的应用影响因素 - 分析前的影响因素分析中的影响因素分析后的影响因素,检测方法的选择与确认,室内质量控制,室间质量评价,分析中管理,为什么不同的检测方法，检测结果相差很大？,肿瘤标志物的溯源性存在很大困难各厂家使用的抗体差别很大检测方法的设计存在差异,肿瘤标志物检测的溯源性,为什么不同的检测方法，检测结果相差很大
9、？,肿瘤标志物的溯源性存在很大困难各厂家使用的抗体差别很大检测方法的设计存在差异,TnI antibodies - epitopes,为什么不同的检测方法，检测结果相差很大？,肿瘤标志物的溯源性存在很大困难各厂家使用的抗体差别很大检测方法的设计存在差异,控制检测的影响因素保证检测结果的改变反应患者自身状态的改变,进行系列血清监测，坚持使用同一仪器/检测系统使用相同的样本类型进行严格的室内质量控制与室间质评 （批内变异5%，批间变异10%),1.制造商应提供用于检测的抗体特异性的说明2.使用者应了解交叉反应的影响并帮助解释结果,1.定期评估携带污染2.使用一次性枪头避免携带污染发生,交叉反应,样
10、本携带污染,分析中管理分析干扰,分析中管理分析干扰,可能临床结果:监测结果的错误分类非必要的随访检测错误的治疗决策不当的疾病预后,嗜异性抗体或人抗鼠抗体（HAMA)的干扰,分析中管理分析干扰,试剂的选择优秀的抗HAMA干扰性能采用阻断蛋白，捕捉片段/示踪抗体和嵌合抗体三种方法,无保护 阻断蛋白 ( 1 in 10.000) 抗体片段( 1 in 100.000) 嵌合抗体( 1 in 1.000.000),干扰程度: 高低 极低,怀疑嗜异性抗体或人抗鼠抗体（HAMA)的干扰,加入固化的正常的非免疫血清,蛋白A或蛋白G,使用商品化抗体阻断试管,用PEG沉淀免疫球蛋白,采用其他方法检测,进行系列稀释以评估稀释线性,内容,肿瘤标志物简介肿瘤标志物的应用影响因素分析前的影响因素分析中的影响因素分析后的影响因素,分析后的要求,常用肿瘤标志物的半衰期,分析后的要求,
