1、第36讲基因工程与生物技术的安全性和伦理问题,第十单元 现代生物科技专题,考纲要求,1.基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)()。3.基因工程的应用()。4.蛋白质工程()。5.转基因生物的安全性()。6.生物武器对人类的威胁()。7.生物技术中的伦理问题()。,考点一基因工程的基本原理和操作技术,考点三生物技术的安全性和伦理问题,考点二基因工程的操作过程与应用及蛋白质工程,矫正易错强记长句,重温高考 演练模拟,内容索引,课时作业,基因工程的基本原理和操作技术,考点一,1.基因工程的概念基因工程也叫DNA重组技术，它是在 水平上进行的一种外科手术式的遗传操作，采取类似于
2、工程建设的方式，按照 的蓝图，借助于 的技术，将某种生物的 提取出来，在 进行加工改造或重新组合，再转移到另一种生物中去，从而 地改变生物的 ，创造出新型的生物。,知识梳理,分子,预先设计,实验室,基因或基因组,生物体外,定向,遗传特性,2.基因工程研究的理论基础(1)分子基础：在20世纪40年代证实了DNA是主要的遗传物质，它是_的携带者；DNA是生物大分子， 是DNA分子上具有遗传功能的DNA片段。(2)重组基础：在20世纪50年代确立了DNA的 构型，遵循 原则，DNA进行 复制，从而解决了基因的自我复制和世代交替问题。(3)转移基础：在20世纪60年代，相继提出了“ 法则”和操纵子学说
3、，成功地破译了 ，阐明了遗传信息的流动与表达机制。,遗传信息,基因,双螺旋,碱基互补,半保留,中心,遗传密码,3.基因工程操作技术的突破(1)DNA分子的切割技术限制性内切酶特点：a.会识别DNA上某种核苷酸的 和位置。b.能在这个位置上将DNA分子 。例子：限制性内切酶EcoR只能识别 序列的位点，并且在 之间将这段序列切开。黏性末端：被限制性内切酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个 的核苷酸，它们之间正好是互补配对的。与基因的位置关系：用限制性内切酶可以 地切下一个或几个基因，正好符合基因工程的要求。存在：主要存在于 中。,序列,一刀两断,GAATTC,G和A,伸出,完整,微生物,(2)
4、DNA分子的连接技术DNA连接酶作用：能在 之间“架起桥梁”，把它们连接起来。特点：只要在同一种限制性内切酶切割的两种DNA片段中加上这种_ ，它就会把片段缝合得天衣无缝。,两个DNA片段的末端,DNA,连接酶,(3)DNA分子的运载工具条件：第一，运载体必须是一种能够自我复制的 分子，能够比较自由地进出细胞。第二，能使带进去的DNA在 进行复制，并且仍然保持 的特性。第三，作为载体最好具有某些简单的特性，如 、免疫性等。种类： 、 和动植物病毒。细菌质粒：它是细菌 外的一种很小的环状DNA分子。它不仅能进行 ，还带有某种 ，能在细胞之间钻进穿出。镶嵌上一段_ 的质粒，就成为一个“杂种质粒”。
5、杂种质粒进入细胞后，便能出色地完成基因工程师交给它的使命在新的宿主细胞里繁殖并发挥作用，使受体细胞产生相应的 。,较小的DNA,细胞里面,原有,抗药性,质粒 噬菌体,染色体,自我复制,抗性基因,外来,DNA片段,表达产物,深化拓展,运载体上标记基因的作用 运载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。当含有抗生素抗性基因的运载体进入受体细胞后，抗性基因在受体细胞内表达，使受体细胞能够抵抗相应抗生素，所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入运载体的受体细胞，原理如下图所示：,1.有关工具酶的判断(1)限制性内切酶只能用于切割目的基
6、因( )(2)切割质粒的限制性内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列( )(3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来( )(4)限制性内切酶也可以识别和切割RNA( )(5)限制性内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶( ),2.有关载体的判断(1)运载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因()(2)每个质粒DNA分子上至少含一个限制性内切酶识别位点()(3)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的运载体()(4)运载体的作用是将携带的目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达()(5)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制(),下图中的图1和图2
7、分别表示的是EcoR限制性内切酶和Sma限制性内切酶的作用示意图，据图分析：,(1)请说出EcoR限制性内切酶和Sma限制性内切酶识别的碱基序列及切割的位点。提示EcoR限制性内切酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在G和A之间；Sma限制性内切酶识别的碱基序列是CCCGGG，切割位点在G和C之间。(2)以上实例说明限制性内切酶有何特性？提示说明限制性内切酶具有专一性。,提示,命题点一工具酶的应用分析1.下图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将目的基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的是 A.Hind B.EcoRC.EcoB D.Pst,命题探究,答案,解析,解析A处有3处(BamH
8、、EcoB、Cla)限制性内切酶的切点，只有使用EcoB限制性内切酶切割时，才能让目的基因插入到A处且使原有基因失活。,2.用限制性内切酶EcoR单独切割某普通质粒，可产生14 kb(1 kb即1 000个碱基对)的长链，而同时用限制性内切酶EcoR、Mbo联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图(其中*表示EcoR限制性内切酶切割后的一个黏性末端)。若用Mbo限制性内切酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为 A.2.5和5.5 B.2.5和6C.5.5和8 D.6和8,答案,解析,解析依图示可知，该质粒上有1个EcoR限制性内切酶的切点、2个Mbo限制性内切酶的切点，故用
9、限制性内切酶Mbo单独切割该质粒时，将产生长度为6和8的两种片段。,3.(2016全国，40改编)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR、BamH和Sau3A三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(运载体上的EcoR、Sau3A的切点是唯一的)。,根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经BamH酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是_。,答案,两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端,解析,解析分析图(a)可知，限制性内切酶Sau3A与BamH切割DNA后形成的黏性末端相同，故经这两种酶切割得到的产物可以用DNA连接酶进
10、行连接。,Sau3A,(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_，不能表达的原因是_ _。,答案,甲、丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录,解析,解析构建基因表达载体时，为保证目的基因能在宿主细胞中成功表达，目的基因应插入在启动子和终止子之间，据此可判断甲、丙均不符合要求，目的基因均不能表达。,(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有_ _和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。,答案,T4DNA连接酶,
11、解析,解析常见的DNA连接酶有EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。,EcoliDNA连,接酶,T4DNA连接酶,方法链接,限制性内切酶的选择方法根据目的基因两端的限制性内切酶切点确定限制性内切酶的种类。(1)应选择切点位于目的基因两端的限制性内切酶，如图甲可选择Pst。(2)不能选择切点位于目的基因内部的限制性内切酶，如图甲不能选择Sma。(3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制性内切酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Pst和EcoR两种限制性内切酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。,命题点二运载体的应
12、用分析4.质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同，如图表示外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供细菌的生长情况，推测三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是,A.是c；是b；是aB.是a和b；是a；是bC.是a和b；是b；是aD.是c；是a；是b,答案,解析,解析第组中重组后细菌能在含氨苄青霉素和含四环素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因和抗四环素基因没有被破坏，因此外源基因插入点是c。第组中重组后细菌能在含氨苄青霉素培养基上生
13、长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上生长，说明抗四环素基因被破坏，因此外源基因插入点是b。第组重组后细菌不能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏；细菌能在含四环素培养基上生长，说明抗四环素基因没有被破坏，因此外源基因插入点是a。,5.(2016全国，40) 某一质粒运载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒运载体用BamH酶切后，与用BamH酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被
14、转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒运载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：,(1)质粒运载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_ _(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。,答案,解析,解析质粒作为运载体应具备的基本条件有：能自我复制、具有标记基因、含有一个至多个限制性内切酶切割位点等。,能自我复制、具有标记基因,(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_ _；并且_ 和_的细胞也是不能区分的，其原因
15、是_。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有_的固体培养基。,答案,解析,二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒运载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 四环素,解析由题意可知，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞中均不含有氨苄青霉素抗性基因，所以在含有氨苄青霉素的培养基上均不能生长。质粒运载体上含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，插入了目的基因的重组质粒中仅含有氨苄青霉素抗性基因，所以含有质粒运载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞均能在含有氨苄青
16、霉素的培养基上生长，但前者可以在含有四环素的培养基上生长而后者不能，所以可用含有四环素的培养基，筛选出含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落。,(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为运载体，其DNA复制所需的原料来自于_。,答案,解析,解析噬菌体属于病毒，病毒增殖过程中所需的原料、酶等均来自于受体细胞。,受体细胞,基因工程的操作过程与应用及蛋白质工程,考点二,1.基因工程的操作程序(一)目的基因的获得目的基因的含义：是指人们 的基因，如抗虫基因、抗病基因等。(1)化学合成法含义：是指利用 直接合成基因。适用范围：主要适用于 核苷酸序列的、相对分子质量 的目的基因的制备。,知识梳理,
17、所需要的进行研究,化学反应,已知,较小,(2)从基因组中直接分离法“鸟枪法”分离基因的主要步骤a.提取基因组的DNA，然后进行“散弹射击”， 即用 或其他机械方法将完整的双链DNA分子 适当长度的片段。b.把上述片段连接到合适的 上，通过 分别转入不同的受体细胞中，使外源DNA随着运载体的复制而复制，从而进行 的增殖。c.采取合适的方法，对含有外源DNA片段的受体细胞进行 ，找出目的基因所在的运载体。,限制性内切酶,随机切割成,运载体,运载体,目的基因,检测,由于真核生物基因组较大，分离目的基因时，往往要根据已获得的信息，采用很多综合的分子生物学技术。例如：利用 直接扩增目的基因；也可以利用
18、法，合成双链DNA，从而获得所需要的目的基因。,DNA扩增仪(PCR仪),反转录,相关视频,(二)基因表达载体的构建(1)方法用 去切割质粒和目的基因。在 的作用下，有切口的质粒就会与同样末端的目的基因连接在一起。(2)结果：形成一个含有目的基因的新环状质粒DNA分子 。(3)原因：把目的基因包装一下，就很容易逃过受体细胞的防御系统，免遭“灭顶之灾”。,同一种限制性内切酶,DNA连接酶,表达载体,(三)目的基因的导入根据受体和运载体的类型不同，所采取的导入方法也往往不一样。目前经常使用的目的基因导入方法有：(1)花粉管通道法含义：指外源基因利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道进入受体细胞，借
19、助天然的种胚系统形成含有目的基因的种胚。导入外源基因有如下两种方法： 法、 法。优点：基本上适用于 植物，并且操作 。缺点： ，且后代的遗传情况较复杂。,柱头滴加,花粉粒携带,任何开花,简便,工作效率较低,(2)氯化钙法运载体与受体细胞：运载体是 ，受体细胞是 。原理：受体细胞经过一定浓度的氯化钙处理后， 的通透性会发生变化，可以允许含有目的基因的运载体分子进入感受态细胞。优点：这一方法也是 的常用方法，在很短的时间内，就可以获得大量的目的基因及目的基因的表达产物。,大肠杆菌,细胞膜,质粒,扩增表达载体,(3)农杆菌介导的遗传转化法农杆菌：是一种 细菌，它侵染植物细胞后，会使植物组织形成 。介
20、导的原理：a.质粒上的一段DNA能够从一个细胞转移到另一个细胞，这段DNA被称为 ，它包含有 和_ ，而且可以插入植物基因组，引起植物细胞的变化。b.由于T-DNA转移频率很高，而且Ti质粒上可插入几百至几千个碱基大小的DNA片段，因此可以利用这种天然的遗传转化体系，将 到植物细胞。优点： 高、成本低、操作简单，而且转基因后代的遗传组成 。,土壤,肿瘤,转化DNA(T-DNA) 生长素基因 细胞分裂素基因,目的基因转移,转化频率,比较容易分析,(4)基因枪法原理：将连接到运载体上的目的基因的 与 共同保温，使DNA吸附于 ，然后，在一个真空的小室中，利用高压放电将带有基因的金粉或钨粉轰击进入受
21、体，实现转基因的目的。,DNA溶液,金粉或钨粉,金属颗粒表面,(四)目的基因的检测与表达产物的测定(1)形态检测如果目的基因的表达产物具有明显的表型性状，可以根据_来判断目的基因是否表达。如果目的基因的表达产物没有明显的表型，可以通过 的表达情况来检测目的基因的表达。,目标性状的有无,报告基因,(2)分子检测PCR检测a.含义：根据目的基因的序列设计引物，采用PCR技术对目的基因进行扩增，如果能扩增出 ，说明目的基因已整合到受体细胞中。b.实例：对除草剂基因的检测，就可以根据 的序列设计引物，然后提取受体细胞的基因组DNA，进行PCR扩增，根据 ，判断目的基因是否整合到受体生物基因组中。,目的
22、基因片段,除草剂基因,电泳扩增条带的有无,分子杂交检测a.方法：把 进行放射性同位素标记或进行生物素荧光标记，用 作探针，与受体生物的 进行杂交。b.结果预测：如果有杂交斑点，说明 已经被导入受体细胞内，反之，则说明目的基因没有进入受体细胞中。,目的基因片段,标记好的基因片段,基因组DNA,目的基因,2.基因工程的应用及产业化前景(一)植物基因工程成果(1)突破了传统杂交育种的局限性转基因技术的应用：科学家发现，在一些野生品种和非栽培品种中，存在着很多优质、抗逆的性状，但是不同物种之间存在着天然的 ，远缘杂交不育。 技术可以实现不同物种之间的基因转移，克服这一障碍。实例：科学家利用转基因技术，
23、把 基因引入烟草和马铃薯，培育出了抗病毒的烟草和马铃薯。,生殖障碍,抗病毒,转基因,转基因技术优点：通过转基因技术大大扩展了可利用 ，克服了远源种及种间杂交不育或不能杂交的障碍，使得生物界存在的抗病虫害基因、优良的品质基因等都可以重组到 上，并使之在植物体内遗传和表达，从而培育出优良的品种，同时还缩短了 ，为农业生产带来广阔前景。(2)开辟了生产疫苗的新途径科学家培育出一种可以生产 的转基因胡萝卜，通过生吃或者榨汁食用，就可以达到接种疫苗的效果，简便易行。但该方法还需进一步试验来验证疫苗的疗效及安全性。,基因的种类,乙肝疫苗,育种周期,植物染色体,(二)动物基因工程成果(1)改良畜禽经济性状的
24、新思路新思路：通过转基因技术，可使受体动物合成 ，或改变动物的 系统，进而促进动物生长、提高饲料的利用效率等。实例：1985年，科学家第一次将人的 基因导入猪的受精卵获得成功，转基因猪与同窝非转基因猪比较，生长速度和饲料利用效率显著提高。(2)动物生物反应器为医药事业开辟了新途径目前利用转基因动物生产基因药物，最理想的表达场所是乳腺，因为乳腺是一个 ， 不进入体内循环，不会影响到转基因动物本身的生理代谢反应。,某些必需的氨基酸,外分泌器官,生长激素,生长调节,乳汁,(三)基因治疗(1)基因治疗的基本原理含义：是将 的基因通过某种运载体导入人体细胞中有缺损或有变异基因的部位，并使 在有机体内有效
25、表达，达到防治疾病的目的。治疗策略及程序主要包括目的基因的 、运载体的选择， 、目的基因进入靶细胞的方式及 。(2)基因治疗的成绩及展望基因治疗的概念在不断扩展，不再局限于用正常基因替换体内的异常基因，还可以导入人体内 ，对人体的生理代谢进行调节。,健康和正常,靶细胞的选择,选择和制备,目的基因,外源基因表达的检测,没有的基因,3.蛋白质工程的诞生(1)蛋白质工程的含义：根据蛋白质的 与生物活性以及结构与功能之间的相互关系，利用 的手段，按照人类自身的需要， 地改造天然的蛋白质，甚至创造新的、自然界不存在的、具有优良特性的蛋白质分子。(2)改造和设计蛋白质的方法：一种是 法，即利用多肽合成仪，
26、从组成蛋白质的第一个氨基酸合成起，合成一种全新的蛋白质；另一种是 手段，对负责编码某种蛋白质的基因进行设计，合成出更符合人们要求的蛋白质。,精细结构,基因工程,定向,多肽合成,采用基因工程,4.蛋白质工程的研究与应用(1)蛋白质工程的研究主要包括以下几个方面：通过基因工程技术分析蛋白质的DNA编码序列，对蛋白质进行 ，测定蛋白质的 并对其 进行分析，通过计算机辅助设计突变区，对编码蛋白质的DNA进行 改造等。,分离纯化,定点突变,结构与功能,序列,(2)应用在工业上的应用：人们运用蛋白质工程技术来改造 ，使其能够适应特殊的工业过程；或者设计制造出全新的人工酶或人工蛋白，以生产全新的医用药品、农
27、业药物，等等。大家熟悉的 ，就是利用蛋白质工程改造的产物。在农业生产中的应用：提高 是农业增产的关键。光合作用与光呼吸这两个过程都是由一种名为 催化的，如果对这个酶加以改造，使固定二氧化碳的作用加强，光呼吸作用减弱，就能提高光合作用的效率。,天然生物酶,光合作用效率,加酶洗衣粉,核酮糖1,5二磷酸羧化酶,在环境保护中的应用：例如，植物、微生物体内有一种能与重金属_等结合的金属硫蛋白，科学家对这种 进行了改造，使含有这一新基因的微生物或植物都具有很强的吸附重金属的能力，保护了生态环境。,镉、汞,金属硫蛋白的基因,1.有关基因工程原理与操作的判断(1)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列
28、( )(2)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列( )(3)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体( )(4)抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达( )(5)检测目的基因是否成功表达可用抗原抗体杂交技术( )(6)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表达( ),2.有关基因工程的应用及蛋白质工程的判断(1)将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株( )(2)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中( )
29、(3)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用( )(4)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质( )(5)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构( ),据图分析抗虫棉的培育过程(1)该基因工程中的目的基因和运载体分别是什么？一般情况下，为什么要用同一种限制性内切酶处理目的基因和运载体？提示目的基因是Bt毒蛋白基因，运载体是Ti质粒。用同一种限制性内切酶处理目的基因和运载体，可以获得相同的黏性末端，便于构建基因表达载体。,提示,(2)该实例中，采用何种方法导入目的基因？为什么目的基因可以整合到染色体的DNA上？提示采用的方法是农杆菌介导的遗传转化法，由于T
30、i质粒上的T-DNA可转移到受体细胞且能整合到受体细胞的染色体DNA上，而目的基因又插入到了T-DNA上，所以目的基因可以整合到受体细胞的染色体DNA上。(3)该实例中，检测目的基因是否成功表达的常见方法有哪两种？提示抗原抗体杂交法、用棉叶饲喂棉铃虫。,提示,命题点一基因工程操作程序的分析1.(2017全国，38)真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题：(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是
31、_ _。,命题探究,答案,解析,基因A有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白A,解析从人的基因组文库中获得的基因A中含有内含子，而大肠杆菌属于原核生物，不能切除基因A初始转录产物中与内含子对应的RNA序列，故基因A在大肠杆菌中无法表达出蛋白A。,(2)若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种运载体中，不选用_作为运载体，其原因是_。,噬菌体,答案,解析,噬菌体的宿主是细菌，而不是家蚕,解析由于病毒对宿主细胞的感染具有特异性，噬菌体只能寄生在细菌细胞中，不能感染家蚕细胞，故应选用可感染家蚕的昆虫病毒作为运载体。,解析与真核生物相比，
32、大肠杆菌等原核生物具有繁殖快、容易培养、遗传物质相对较少等优点。,(3)若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有_(答出两点即可)等优点。,繁殖快、容易培养,(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是_(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。,蛋白A的抗体,答案,解析,解析检测基因A是否翻译出蛋白A，一般用抗原抗体杂交的方法，即用蛋白A的抗体与从细胞中提取的蛋白质进行杂交，观察是否出现杂交带。,(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，
33、这一启示是_ _。,DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体,答案,解析,解析肺炎双球菌转化实验的实质是S型细菌的DNA进入R型细菌体内，并可在R型细菌体内完成表达，这证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体，为基因工程奠定了基础。,2.2,4-D作为除草剂在农田中大量使用，研究认为它是某种淋巴癌的致病因子。为降低2,4-D的危害，科研人员通过基因工程技术构建了能高效降解2,4-D的基因工程菌。请回答下列问题：(1)在农业生产上常会使用_浓度2,4-D对麦田进行除草，在杀死杂草的同时却不会对小麦生长造成损害，原因是_。,高,答案,解析,解析2,4-D是生长素类似物，利用不同植物对
34、其敏感程度不同，可用其除去麦田杂草。,不同植物对2,4-D的敏感程度不同,(2)从被2,4-D污染的土壤中得到能降解2,4-D的细菌，从该细菌中提取RNA，构建_文库，进一步获得目的基因。,cDNA(部分基因),答案,解析,解析从工程菌中提取RNA构建成的基因文库是部分基因文库(cDNA文库)。,(3)PCR技术扩增目的基因的过程：含目的基因的DNA受热变性后解旋为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在_酶作用下进行延伸，如此重复循环多次，使目的基因的量呈_形式扩增。,热稳定DNA聚合酶(或Taq),解析PCR技术用热稳定DNA聚合酶(Taq酶)延伸，多次循环，目的基因的量呈指数(2n)增长
35、。,指数,(4)一个基因表达载体的组成中要有标记基因，标记基因的作用是鉴别受体细胞中_。欲知基因工程成功与否，需要进行_水平的检测，有时还需进行_水平的鉴定。,是否含有目的基因,答案,解析,解析标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，欲知基因工程成功与否，需要进行分子水平的检测，有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。,分子,个体生物学(个体),命题点二基因工程与蛋白质的关系的分析3.(2015全国，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的
36、功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_ _进行改造。,氨基酸序列(或结构)(其他答案合理也可),答案,解析,解析由题干信息可知，改造蛋白质的功能可以通过改变蛋白质的结构来实现。,(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因，所获得的基因表达是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_ _的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：_ _。,P,答案,解析,解析依据蛋白质工程的定义及题中信息可知，获得P1基因的途径有修饰现有(P)基因或合成新(P1)基因。中心法则的全部内容包括DNA的复制，RNA的复制
37、、转录、反转录和翻译。,P1,DNA和RNA (或遗传物质) DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、反转录、翻译),(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_和_，进而确定相对应的脱氧核糖核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。,设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列,答案,解析,解析蛋白质工程的基本途径：从预期蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列。通过蛋白质工程合成的蛋白质还需要进行生物活性的鉴定即功能鉴定，看是否达到人们的需求。,功能,4.胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体后，会堆积在皮下，并要经过较长的时间才能进入血液中，而进入血液的胰岛素又容易被分解，因此，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：,(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是_。,蛋白质的预期功能,答案,解析,解析蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计，因此，图中构建新的胰岛素模型的依据是预期胰岛素(即速效胰岛素)的功能。,(2)人工合成的DNA与_结合后，被转移到_中才能得到准确表达。,运载体,
