1、1微 生 物 的 实 验 室 培 养一选择题（每小题 2 分）1培养基能为微生物的生长繁殖提供（ ）A水 B碳源 C氮源 D水、碳源、氮源和无机盐等营 养2下列有关培养基的说法不正确的是（ ）A培养基是给微生物的生长繁殖提供营养的营养基质B配制固体培养基时要加入琼脂，但不需要加入水C培养基有固体培养基和液体培养基两种类型D培养基除提供主要营养物质外，还应满足微生物生长对 PH、特殊营养、以及氧气的要求3有关微生物培养的说法不正确的是（ ）A培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，并提供无氧条件B在牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏只提供碳源 、蛋白胨只提供氮 源C培养微生物除提供合适的营养和环境条件
2、外，还需保证无菌条件D菌落是微生物在固体培养基上生长形成的，肉眼可见的子细胞群体4在牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为（ ）溶化 灭菌 加棉塞 计算 倒平板 称量A B C D5下列有关微生物接种方法的叙述不正确的是（ ）A微生物接种操作的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度B纯化大肠杆菌常用平板划线法和稀释涂布平板法C平板划线和稀释涂布平板法的依据都是设法将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而获得单个 的菌落D在接种过程中，有些操作是不需要在酒精灯灯焰旁进行的6平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是( )A都要将菌液进行一系列的梯度稀
3、释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养2D都会在培养基表面形成单个的菌落7为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。下列有关叙述不正确的是（ ）A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D对于需长期保存的菌种，可以采用4低温保藏的方法8培养病毒时应选用（ ）A固体培养基 B含有多种无机盐的培养液C活的鸡胚 D牛肉膏蛋白胨培养基9将硝化细菌接种到下列培养基中，其中可以长出硝化细菌菌落的是（ ）A无氮培养基，试管密闭 B
4、无氮培养基，试管口用棉塞塞住C含氮培养基，试管密闭 D含氮培养基，试管口用棉塞塞住10下列所述环境下的微生物，能正常生长繁殖的是（ ）A接种在牛肉膏蛋白胨培养基上大肠杆菌B在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌C 在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌D在灭菌后的碳源和氮源比例恰当的培养液中禽流感病毒11从多种细菌中分离出某种细菌，培养基要用（ ）A固体培养基 B液体培养基C不含碳源的培养基 D不含氮源的培养基12培养基、培 养皿、接种环、实验者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（ ）化学消毒燃烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A BC D13高温灭菌的原理是（ ）A每种微生物生长
5、的最适温度是一定的B高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动C微生物对高温环境不适应D高温降低了环境中的氧浓度314下列制备牛肉膏蛋白质胨固体培养基的叙述错误的是（ ）A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的 牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C将培养基冷却至 50左右时进行倒平板D将平板冷却凝固约 5min-10min 后，将平板倒置15某混合样品中微生物 R 含量极少，要得到大量的 R，比较理想的方法是采用（ ）A液体培养基B稀释涂布平板法C利用适合 R 生长但同时抑制或阻止其它种类微生物生长的选择培养基D用显微镜直接观察、寻找再培养16无菌技术包括以下几 方面的叙述，其中错误
6、的是（ ）A对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌C为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触17无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开，下列常见的无菌技术中，属于灭菌处理的是( )A操作者的双手用酒精擦拭B实验室用紫外线照射C对接种环进行灼烧处理D水源用氯气处理18对无菌操作转接培养物的叙述，正确的是（ ）接种环在火焰上灼烧法灭菌在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞打开棉塞的试管口通过火焰将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中将试管口塞上棉
7、塞接种环进行灭菌A BC D19有关平板划线操作的叙述，不正确的是（ ）A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B每次画线前灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液4D划线结束后灼烧接种环，能及时杀死搁接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者20有关平板划线操作的叙述，正确的是（ ）A使用已灭菌的接种环、培养皿、操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管后，试管口需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖D进行第二次以及其后的操作时，总是从上一次划线的
8、始端开始划线21金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法式错误的是（ ）A对接种环进行灼烧处理B带菌培养基必需经 高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C带菌培养基必需经加热后才倒掉D接种后双手必需经肥皂洗净，再用 75%的酒精棉球擦拭22不同的微生物对营养物质的需求各不相同，下列有关以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是( )A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一23关于牛肉膏蛋白胨固体培养基的配制需要在火焰旁操作的是 ( )A称量 B灭菌 C溶
9、化 D倒平板24将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入 37恒温箱的目的是 ( )A对比观察培养基有没有被微生物利用B对比分析培养基上是否生有杂菌C没必要放入未接种的培养基 D为了下次接种时再使用二简答题25 （12 分） （1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。5（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行 （消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 。（3）若用稀
10、释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的 。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物 的扩散。26 （12 分）某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理 ，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1
11、)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 蒸馏水5.0 g 10.0 g 5.0 g 20.0 g 定容至 1 000 mL其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力 100 kPa，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到 0 时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_。把锅内水加热煮沸并
12、将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱中保藏。 6附加题：（15 分）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下： 配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、 2NaClXHO、 、 ） ； 制作无菌平板； 设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作； 将各组平板置于 37 恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的
13、平均数。回答下列问题：（1）该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤，该培养基中的成分X通常是_。（2）步骤中，实验组的操作是_。（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为 36 个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了 6 个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。若将 30（即 36）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_（填“正确”或“不正确” ） 。736 微生物的实验室培养参考答案1-5DBBBD 6-10DDCDA 11-15AABAC 16-20ACCCC 21-24CBDB25（1）温度 酸碱度 易培养 生活周期短（2）灭菌 消毒 损伤 DNA 的结构（3）比例合适 （4）鉴定(或分类) （5）将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。 （6）灭菌26(1)牛肉膏、蛋白胨 牛肉膏(2)比例 用玻棒搅拌 琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅 121 1530 min 废弃(4)适量水(5)外 冷却 4附加题(1) 牛肉膏和蛋白胨 琼脂；(2) 将平板开盖在不同高度下放置适当且相同时间，每组均设置相同个数的多个平板； (3) （微生物）污染 不正确
