1、1 / 161. 吸光度：吸光物质对光的吸收程度的度量2. 朗伯比尔定律：在一定条件下，物质的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。A=abc，3. 荧光光谱：固定激发4. 共振线：包括共振吸收线和共振发射线，指原子外层电子从基态跃迁至第一激发态所吸收的谱线或是从第一激发态直接跃迁至基态所辐射的谱线5. 原子吸收光谱： 处于基态的气态原子吸收一定的电磁辐射从基态跃迁至激发态产生的光谱6. 指示电极：电极电位随待测离子活度（浓度）变化而变化，并且二者之间关系符合能斯特方程。7. 保留时间：从进样开始组分浓度出现最大值（色谱峰最高点）所需要的时间8. 分离度：又称分辨率，以相邻两组分色谱峰保留
2、值之差与其平均峰宽值之比表示填空题1. 随机误差服从(正态分布)规律2. 样品采集的原则可以概括为（典型性，适时性，代表性）3. 溶解法是将待测组分溶解于溶剂中，适用于被测组分为（分离）状态、 （易溶于）适当溶剂的样品4. 原子吸收光谱法中原子化法可分（火焰法）和（石墨炉法）两大类5. 在原子吸收分光光度法中，最常用的光源是（空心阴极灯）和（无极放电灯）6. 电解池是将（电能）转变为（化学能）装置7. 以测量电解质溶液电导为基础的分析方法称为- （电导分析法）8. 依据所用固定相的状态，气相色谱分为（气- 固）色谱和（气-液）色谱9. 不被固相吸附或溶解的气体（如空气，甲烷） ，从进样开始到柱
3、后出现浓度最大值所需的时间称为（保留时间）10. 在定量工作曲线范围内，进样量越大，则峰面积（越大）11. 液相色谱分析系统包括-（高压输液）系统、进样系统、 （分离）系统、检测系统和记录系统五部分。12. 在一定温度和压力下，组分在固定相（s ）和流动相（ m）间达到平衡时的浓度之比称为（分配系数 k）第一章 绪论一、分析方法的分类1. 按分析任务分类定性分析（qualitative analysis）：含何种元素、何种官能团定量分析（quantitative analysis） ：测定组分的相对含量结构分析（structure analysis） ： 形态分析、立体结构、结构与活性2. 按
4、分析对象分类：无机分析和有机分析 3. 按待测组分含量分：常量、微量、痕量、超痕量4. 按分析手段分类化学分析：以物质的化学反应及其计量关系为基础的分析方法，包括：重量分析和容量分析 仪器分析：以物质的物理性质和物理化学性质为基础的分析方法，需要较特殊的仪器，通常称为仪器分析，包括电化学分析、光化学分析、色谱分析、其它仪器分析方法5. 按分析目的分类2 / 16常规分析：例行分析，日常分析仲裁分析：权威机构、法定分析，具法律效力：司法鉴定等1、卫生化学：是以分析化学为基础，研究预防医学领域中与健康有关的物质的质、量及其变化规律的一门学科2、卫生化学应用领域：食品卫生，营养卫生，环境卫生，劳动卫
5、生3、卫生化学所包括的主要内容：1) 样品采集、保存与处理2) 误差分析、数据处理和质量保证3) 常用仪器分析方法的基本原理和基本操作(一)一、 准确度和精确度分析结果准确可靠的衡量指标(一) 准确度结果与真实值的接近程度（绝对误差 E 和相对误差 RE）(二) 精密度几次测定结果相互接近程度用偏差来衡量绝对偏差，平均偏差，相对平均偏差，标准偏差，相对标准偏差 RSD是表示和评价精密度最灵敏、最常用的指标卫生分析要求 RSD10%二、 分析数据处理1、 有效数字“四舍六入五留双”2、 可疑数据（即离群值）的取舍，常用：Q 检验法（3-10 次测定）和 G 检验法（多次）3、 平均值的置信区间：
6、置信区间：分析结果真实值所在的范围置信度（P）：真实值在置信区间中出现的几率4、 分析数据的显著性检验：检验是否存在统计上的显著性差异，即有误系统误差存在方法：t 检验法和 F 检验法t 检验法分：平均值与标准值（）的比较和两组数据的平均值比较（同一试样）F 检验法：检验两组测定数据的精密度三、 分析工作的质量保证分为质量控制和质量分析 2 种1、 质量控制：指使测量质量达到预期要求需采取的措施，包括人员素质、实验室仪器设备条件、环境条件和实验室的技术管理制度等。评价主要指标：准确度；精密度；灵敏度；工作曲线的线性范围；稳定性 5 种1）准确度：a）用标准物质评价：相同条件，检验一致性 95%
7、，n=46b）加标回收率评价：越接近 100%越好 卫生分析要求：回收率 85%105%3 / 16c）与标准方法对照评价：检验其显著性（t 检验）2）精密度：验检随机误差的大小 卫生分析要求 RSD0.999，否则准确度受影响c）分析工作的精密度和准确度；（加标回收率；RSD） d）仪器误差和操作误差的检验不同仪器比较和不同人员比较结果2）实验室间：a）分析方法检出限、精密度、准确度b）制定允许误差标准物质c）实验室误差测定RE3）其他方法：a）双样品法：随机标准偏差振动能级转动能级2）能级跃迁：紫外-可见光谱属于电子跃迁光谱。三个能级之间均有跃迁宽谱带3）吸收曲线规律：a、同一种物质不同波
8、长光的吸光度不同。吸光度最大波长为最大吸收波长 maxb、不同浓度同一物质，吸收曲线形状相似 max 不变c、吸收光谱（吸收曲线）可以提供物质的结构信息，作为物质定性分析的依据之一d、不同浓度同一物质，某一波长下吸光度 A 有差异，max 处吸光度 A 的差异最大物质定量分析的依据4 / 16e 在 max 处吸光度随浓度变化幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据4）电子能级和跃迁： 5）生色团（和助色团）是分子产生紫外- 可见吸收的条件及其应用：a、红移：吸收峰位置向 长波方向的移动b、蓝移：吸收峰位置向短波方向移c、增色效应：吸收强度增强的效应d、减色效应：
9、吸收强度减小的效应3、影响紫外-可见吸收光谱的因素1）共轭效应： 电子共轭体系增大， max 红移， max 增大；空间阻碍破坏共轭体系， max 蓝移， max 减小2）取代基：给电子基未共用电子对流动性大，形成 p- 共轭，降低能量， max 红移吸电子基的存在产生 电子的永久性转移， max 红移。给电子基与吸电子基同时存在，产生分子内电荷转移吸收， max 红移， max 增加。 3)溶剂影响：溶剂极性增大 *跃迁波长 红 移；n* 跃迁波长 蓝移吸收光谱的产生1、分子含有生色团和助色团2、吸收紫外可见光并伴随电子能级跃迁3、不同官能团吸收不同波长的光4、 作波长扫描，记录吸光度对波长
10、的变化曲线，得到该物质的紫外-可见吸收光谱二、紫外-可见分光光度法的定量基础吸收定律1、朗伯-比尔定律：在一定条件下，物质的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。A=abc，有关理解如下： 是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量； 吸光系数 a(Lg-1cm-1）相当于浓度为 1 gL-1、液层厚度为 1cm 时该溶液在某一波长下的吸光度； 吸光系数 a 是吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数； 吸光系数 a 不随浓度 c 和光程长度 b 的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关； 吸光系数可作为定性鉴定的参数 m
11、ax 表明了该物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。越大吸光能力越强，方法的灵敏度越高 105：超高灵敏； =(6 10）10 4 ：高灵敏； 富燃贫燃2) 石墨炉（无焰）原子化器：分为四步a) 干燥：蒸发出去溶剂，用稍高于溶剂的沸点b) 灰化：除去易挥发的基体和有机物，减少分子吸收，尽量选较高的灰化温度，以减少灰化时间c) 原子化：使待测元素成为基态原子，温度 1800-3000k，停掉载气，延长基态原子的石墨管中提留时间，提高分析灵敏度d) 净化：高温除去管内残渣3、分光系统：由色散原件，反射镜，狭缝等组成，作用：分出被测元素共振线4、检测系统：5、显示系统
12、四、定量分析方法：标准曲线法，标准加入法，内标法五、定量分析方法评价：灵敏度和检出限六、干扰及其抑制方法：干扰类型有：光谱，电离，化学，物理，背景干扰电位分析法一、 概念与原理：(一) 电化学分析法：是将两支电极插入被测溶液中，组成一个化学电池，通过测量该电池的电学参数或参数的变化，确定被测组分的浓度1. 电位分析法：是通过测量被测溶液组成的化学电池的电池电动势来求得被测组分的浓度2. 库仑分析法：是以测量通过电解池的电量球的被测组分含量的方法(二) 化学电池：实现化学能和电能相互转化的装置，有两种：1. 原电池 ：能自发地将化学能转变为电能的装置2. 电解池 ：需要消耗外电源电能，将其转变为
13、化学能的装置氧化反应 失去电子还原态阳极还原反应 得到电子氧化态阴极负极 电位低正极 电位高(三) 电池电动势与电极电位1. 电池电动势：电池两端的电势差2. 电极电位测量：无法测定单个电极的电极电位，只能测相对电极电位，利用标准电极电位（在 25，参与反应的所有物质的活度都等于 1mol/L 时的电极电位）常用有标准氢电极，并得出参比电极（属于二次标准电极）二、 能斯特方程：表示电极电位与组成电极的物质及其活度、温度之间的关系9 / 16任一电极：氧化态(Ox)+ne 还原态（Red）能斯特方程：25时（T 273K25K） 所以：电极电位的大小有电极的本质及参与电极反应的物质的氧化态和还原
14、态的活度决定三、 液接电位和盐桥1. 在两种不同离子的溶液或两种不同浓度的溶液接触界面上，存在着微笑的电位差，此为液接电位，大小一般不超过 0.03v消除方法：使用盐桥2. 盐桥：连接和“隔离”不同电解质的置，经典为 u 型，充以用琼脂固定 kcl 饱和溶液盐桥的作用：构成原电池的通路维持溶液的电中性消除液体接界电位四、 电位分析法：(一) 原理：两个电极组成一个原电池测定该电池电动势利用指示电极和参比电极1. 参比电极：在温度、压力一定条件下，其电极电位准确已知，且不随待测溶液中离子浓度的变化而改变的电极常用甘汞电极和银/氯化银电极2. 指示电极：电极电位随待测离子活度或浓度的变化而变化，并
15、且二者之间的关系符合能斯特方程 常有：基于电子转移的氧化还原电极（如铜电极，锌电极等）和基于离子交换的离子选择性电极，即膜电极（普遍应用， ）(二) 离子选择性电极：主要有：ph 玻璃电极，氟离子选择性电极，流动载体膜电极，气敏电极四种1、 离子选择性电极的性能评价：线性范围、检测下限、电极斜率、选择性、响应时间和电极寿命等。2、 检测下限：电极能够定性检测出的最小浓度3、 电极斜率：指在响应曲线的线性范围内，待测离子浓度每变化 10 倍，所引起的电极电位的变化值电位法多用于低价离子测定：因为理论上电极斜率 S=2.303 RT/nF， 当离子电荷数越大，级差越小，测定灵敏度也越低，所以一般用
16、于测定低价离子 doxanRelg059.10 / 164、 选择性系数Ki，j 能产生相同电位时待测离子 i 与干扰离子 j 的活度比:表示其他共存离子 j 对响应离子 i 的干扰程度，K 越小，表示干扰越小，选择性越高选择性系数 K 的意义：a) 可以判断电极对测量体系的适应性，粗略地估计干扰离子带来的误差b) 作为选择适当的离子强度调节剂的参考c) 作为试样预处理是选用试剂的参考5、 响应时间：指参比电极与离子选择电极一起接触到试液起直到电极电位值达到稳定值的 95%所需的时间影响因素：a)膜的性质b)离子浓度及浓度改变方向：浓度越高，越短，稀溶液向浓溶液进行，短c)离子到达电极的表面速
17、度：搅拌可缩短时间d)试液中离子强度：存在大量不干扰离子时，能缩短e)试液中共存的干扰离子：干扰越多，时间延长f)试液温度：温度升高，时间缩短五、 电位分析方法：直接电位分析法；电位滴定法(一) 直接电位分析法：标准曲线法；比较法，溶液的 ph 测定；校准加入法（内标法）1. 标准曲线法：用一系列已知浓度测定电动势，绘出标准曲线，再用测得电动势在曲线中得出待测浓度大批量测定2. 比较法：已知浓度测电动势，再测待测浓度电动势，两式相减3. 溶液 ph 测定：ph=-lgH +，两式相减，同比较法4. 标准加入法：先测体积 Vx，浓度 Cx 待测溶液电位值 Ex，再测在待测溶液中加入体积 Vs，浓
18、度 Cs 标准溶液的电位值 Es，两式相减，简化得：浓度增量为： c = cs Vs / V0(二) 电位滴定法：在试液滴加滴定剂，发生化学反应，检测电动势变化，滴定突跃式滴定剂体积和浓度，计算待测组分含量。色谱分析法概论一、 色谱法：利用混合物各组分在固定相和流动相间的相互作用（吸附、分配、离子交换、亲和力、分子尺寸）不同，使固定相对组分的保留作用不同，当两相作相对运动时，不同组分产生反复多次的差速迁移而进行分离的方法。二、 色谱法分类 (一) 按两相的聚集状态：1. 流动相状态：分为 3 类1) 液相色谱法2) 气相色谱法3) 超临界流体色谱法11 / 162. 固定相状态：两大类1) 液
19、相色谱法：液-固色谱法；液-液色谱法2) 气相色谱法：气-固色谱法；气-液色谱法(二) 按操作形式：两大类1. 柱色谱法（固定相装于柱子中）：填充柱色谱法；毛细柱色谱法2. 平面色谱法（固定相呈平面状）：薄层色谱法；纸色谱法(三) 按分离原理：1. 吸附色谱法组分与吸附剂吸附能力强弱不同，包括气固和液固2. 分配色谱法组分在固定液中的溶解度不同，包括气液和液液3. 离子交换色谱组分与离子交换剂的交换能力大小不同4. 尺寸排阻色谱分子尺寸大小不同在多孔固定相中的选择渗透5. 亲和色谱法组分与固定相的高专属性亲和力，三、 气相色谱常用术语：(一) 色谱图：在气相色谱分析中，柱后流出物流经检测器是，
20、载气中各组分的量所产生的信号对时间的曲线1. 基线：在操作条件下，仅有流动相流过色谱柱时的流出曲线2. 保留值定性分析的指标1) 保留时间 tR：从进样到组分浓度出现最大值（色谱峰最高点）所需时间2) 死时间 tM(t0 ): 不被固定相滞留组分的保留时间，即流动相流过色谱柱所需要的时间3) 调整保留时间 ：扣除死时间的保留时间，即组分在固定相中滞留的时间4) 保留体积：组分从进样到出现信号最大值所需要流过流动相的体积5) 死体积：不被固定相滞留组分的保留体积6) 调整保留体积：组分保留体积与死体积之比7) 相对保留值：在相同操作条件下，组分 i 的调整保留值与组分 s 的调整保留值之比，表示
21、色谱柱（固定相）对不同组分的选择性，当 ri,s1时，色谱柱对组分有选择性3. 峰高和峰面积定量参数1) 峰面积：峰与峰底之间的面积2) 峰高：色谱峰最高点至峰底之间距离4. 区域宽度用于衡量色谱柱效能1) 峰宽：即基底宽度，色谱峰两侧拐点出的切线在基线上截取的距离，Wb，2) 半峰宽：峰高一半处的峰宽，W 1/2，3) 标准偏差正态分布色谱峰上两拐点间距离的一半，或是 0.607 倍峰高处峰宽的一半，用 表示色谱柱后流出组分的分散程度程度；越小，峰窄，柱效高4) 上三者关系：RMtt4b 354.2ln2/1607.hW12 / 165. 分配系数：一定温度、压力条件下，组分在两相中达到分配
22、平衡是，固定相中组分浓度与流动相中组分浓度之比6. 分配比：又称容量因子：表示一定温度、压力下，两相平衡是，固相中组分质量与流动相中组分质量之比，质量之比，实际等于滞留在两相中时间之比或相应体积之比，值越大，固定相对组分滞留作用越大，色谱柱容量越大四、 基本理论：塔板理论与速率理论(一) 塔板理论：四个基本假设：1. 色谱柱由若干个小段组成，每一段称为一个理论塔板，塔板的段长称为理论塔板的高度 H2. 塔板中，下层是固定相，上层充满流动相，该空间称为板体积（V） ，载气脉冲式进入色谱柱，每次进气一个V，3. 组分在各塔板内的两相之间迅速达到分配平衡，分配系数恒定不变，与组分浓度无关，4. 开始
23、时，试样组分全部加在第 1 块塔板上，试样沿色谱柱方向的纵向扩散忽略不计(二) 柱效能指标：理论塔板数 n，理论塔板高度 H，有效塔板数 neff三个指标来反映色谱柱对组分的分离效能(三) 塔板理论的贡献：1. 较好地解释了色谱峰形的正态分布规律2. 提出了评价柱效能指标：n 和 H(四) 塔板理论的不足1. 没有考虑动力学因素对色谱过程的影响，不能解释载气流速 u 对理论塔板数n 的影响2. 不能回答色谱峰为什么发生变形3. 不能说明塔板高度受什么因素影响(五) 速率理论：Van Deemter 方程H=A+B/u+Cu A，B，C 为常数， u 为载气的平均线速度1. 涡流扩散项 A：产生
24、原因：随载气一起流动的组分由于固定相的阻碍而改变运动方向，形成“涡流” ，导致不同的组分分子在柱中走过的路程长短不一致，引起峰形的扩张与填充物的平均颗粒直径大小及填充不均匀性有关，与载气性质，线速度和组分无关填充柱填充越均匀规则，载体平均颗粒直径越小，涡流扩散越小，色谱峰扩张变形小2. 分子扩散项 B/u(纵向扩散项)：产生原因：组分被载气带入色谱柱后，以“塞子”的形式存在于柱内很小一段空间中，在“塞子”的前后（纵向）存在着浓度差而形成浓度梯度，使运动着的分子产生纵向扩散 与载气相对分子质量，载气密度，柱温，组分的保留时间有关越小，越小，升高，缩短3. 传质阻力项 Cu：13 / 16传质过程
25、：组分在气液两相中溶解、扩散、平衡和转移的过程传质阻力：影响传质速度的阻力Cu组分随载气流动时，组分在两相中反复扩散分配运动所受的传质阻力。包括液相传质阻力和气相传质阻力1) 气相传质过程：组分从气相移动到气-液界面的过程，试样组分在两相界面上不能瞬间达到分配平衡，从而引起滞后现象，使得色谱峰变宽2) 液相传质过程：组分从固定相的气-液界面进入液相内部，并发生质量交换，达到分配平衡，然后再返回气液界面的过程4. Van Deemter 方程贡献1) 影响柱效的因素:柱温、色谱柱填充的均匀程度、填料颗粒的大小、流动相的种类、流动相的流速、固定相的液膜厚度2) 为色谱分析工作选择最佳分离条件提供理
26、论依据(六) 分离操作条件的选择：1. 分离效能指标：组分分离的前提条件：两组分的分配系数或分配比不等，理论塔板数 n 只能说明色谱柱对某一组分的柱效能高低，不能判断两相邻色谱峰对应组分在柱中的分离情况；相对保留值可以说明色谱柱对难分离的两组分选择性好坏，却不能反映柱效能高低（a）色谱峰距离近且峰形宽，两峰严重相叠选择性和柱效都很差（b）能分开但峰形宽选择性好，但柱效低（c）分离最理想选择性好，柱效也高1) 分离度 R：又称分辨率，以相邻两组分色谱峰保留值之差与其平均峰宽值之比表示：a) 如果 R=1，称为 4 分离，峰分离达 98%b) 如果 R=1.5 ，称为 6 分离，峰分离达 99.7
27、%R=1.5 是两个相邻色谱峰完全分离的标志 R 越大，相邻组分分离越好相邻两组分是否分离的判断依据：R=1.5实际应用中，以最难分离物质对的色谱峰作为计算标准2) 色谱分离方程 分离度与柱效能、柱选择性及柱容量的关系a) R 与柱效的关系：柱效 n 影响色谱峰的宽窄，取决于色谱柱性能及载气流速；增加柱长可改进分离度，但会延长组分的保留时间，使峰产生扩展；设法降低板高，提高柱效，才是提高分离度的最好方法。b) R 与 r2,1的关系：r2,1 越大，选择性好2. 分离操作条件的选择指导原则：Van Deemter 方程与色谱分离方程分离条件色谱柱操作条件载气流速、进样条件及检测器1) 色谱柱的
28、选择a) 固定相（固定液）按“相似相溶”原则；柱温 u 最佳）时，u 越大，Cu 项越小，B/u 项越小，Cu 项起主导作用，选用分子量较小的载气（H2，He） ，减小气相传质阻力，提高柱效(七) 气相色谱检测器1. 常用检测器分类：浓度敏感型检测器，如热导检测器，电子捕获检测器质量敏感型检测器，如氢火焰离子化检测器，火焰光度检测器2. 检测器性能指标：1) 灵敏度 S：单位量的物质通过检测器时所产生的信号大小 S=R/ Q2) 检测限（敏感度）：某组分的峰高恰为噪音的两倍（2N）时，单位时间内引入检测器中该组分的质量（g/s） ，或单位体积载气中所含该组分的量（mg/ml） 。检测限越小，性
29、能越好3) 线性范围：可测定的浓度或质量范围：越宽越好4) 基线漂移和响应时间；前者表示基线在单位时间内单方向缓慢变化的幅值3. 常用：火焰离子化检测器灵敏度高，噪音小，死体积小等；破坏样品，一般只能测定含碳化合物4. 电子捕获检测器：对电负性物质具有极高的灵敏度和选择性，适用于痕量药物、农药及含电负性基团环境污染物的分析 如敌敌畏 (八) 定性定量分析1. 定性分析：a) 利用保留值定性：已知物对照法；色谱峰增高法；相对保留值法；文献保留值对照法b) 联用技术定性：气质联用；与红外吸收光谱联用；与磁共振波谱联用2. 定量分析a) 定量分析依据：检测器的响应信号（峰面积或峰高）与组分量成正比b
30、) 校正因子：同一物质不同检测器，信号不同；同一检测器不同物质，信号不同，绝对校正因子和相对校正因子c) 定量计算方法：i. 归一化法:所有组分流出色谱柱，彼此分离，含量与面积正比ii. 外标法：分为外标标准曲线法和单点外标法iii. 内标法：内标物选择：（1） 试样中不存在的纯物质，与样品中的组分完全分离15 / 16（2）内标物质与待测组分的结构和性质相近（3）内标物质为纯物质或含量已知（4）内标物与样品互溶，不发生不可逆化学反应(九) 气相色谱法应用：室内污染物的测定（挥发性有机物质 VOCs） ；农产品中农药残留的检测生物样品中有毒物质检测： 高效液相色谱法 HPLC(一) 气相与液相
31、色谱比较 1. 相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测2. 主要差别：分析对象和流动相的差别1) 分析对象：2) 流动相差别：3. 基本组成：气相：气路系统，进样系统，分离系统，检测系统，记录系统液相：高压输液系统，进样，分离，检测，数据记录与处理系统1) 高压输液系统：由贮液器，高压输液泵，过滤器，梯度洗脱装置，压力脉动阻滞器组成作用：将流动相在高压下连续地送入液路系统，保证流动相的正常工作2) 进样系统六通阀优点：保持进样系统高压；进样准确，重现性好；自动化程度高；用于分析和制备缺点：连接处有死体积，引起峰展宽3) 分离系统色谱柱，由连接管，恒温器，色谱柱组成4) 检测系统（与气相不同）
32、：有紫外-可见光度检测器荧光检测器示差折光率检测器16 / 16电化学检测器(二) 液一液分配色谱法（LLPC）原理：物质在两相中溶解度的不同，具有不同的分配系数，造成各组分在柱中的差速迁移,从而产生色谱分离1. 正相色谱：固定相极性流动相极性1) 适用：溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物，如各类脂溶性色素、叶黄素2) 分离选择性：极性强的组分 k 大，后洗脱出柱；流动性极性增强，洗脱能力增加，组分 k 减小，tR 减小。2. 反相色谱：固定相极性流动相极性键合极性基团（氰基、氨基、二醇基）低极性有机溶剂较强极性的有机物(溶于有机溶剂)极性弱的物质先出峰增加流动相的极性（增加乙醇等的含量）反相色谱固定相极性流动相极性键合羟基硅烷（烷基、苯基、苯甲基）水为主体+有机溶剂弱极性及中等极性的有机物极性强的物质先出峰减少流动相的极性（增加有机相）
