1、淋病奈瑟菌生物危害评估报告一、淋病奈瑟菌的传播与致病淋病奈瑟菌又称淋球菌，是淋病的病原菌，人类是本菌的唯一天然宿主和传染源。淋病是淋菌性尿道炎的简称，是由淋球菌引起的泌尿生殖系统化脓性炎性疾病，它是人类很古老的，也是当前世界范围内流行非常广泛的一种性传播疾病。淋病患者是主要传染源，有症状或无症状的患者均可通过性接触传播，其中轻症或无症状的淋病患者是重要的传染源。其传播途径主要包括性交传染，还可通过非性接触传播，如通过接触患者分泌物污染的用品（衣裤、床上用品、毛巾、浴盆、马桶等）间接感染；孕妇淋病患者当羊膜破裂，可继发羊膜腔内及胎儿感染；新生儿经过患淋病的母体产道时常可引起淋菌性眼炎；另外尚可通
2、过医护人员的手和器具引起医源性感染。本病最初多侵犯尿道、宫颈内膜，继而可波及前列腺、精囊、副睾、子宫内膜及输卵管。有时肛门、直肠、咽粘膜、眼结膜也可受染。尚可经血行播散引起菌血症、关节炎、心内膜炎及脑膜炎，可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狭窄等后果。由于本病潜伏期短、传染性强、后果严重，因此它是我国当前重点防治的性病之一。二、淋病奈瑟菌的生物学特性淋病奈瑟菌属奈瑟菌属，镜下呈肾形，常成双排列，邻近面扁平或稍凹，像两瓣黄豆对在一起，大小 0.6m0.8m。革兰氏染色阴性，呈粉红色，美蓝染色呈蓝色。急性炎症期细菌多在患者分泌物的少部分中性粒细胞的胞浆中，慢性期则多在细胞外，且有些可呈单个球形或四
3、联状。人工培养后形态亦常呈球形、单个、成双或四联排列。淋球菌适于潮湿（相对温度 8085） 、温暖（35.536.5） 、中性偏碱（pH7.27.6） 、含 510二氧化碳的条件下生长。最怕干燥，在完全干燥环境下只能存活 12 小时，对温度变化敏感，超过 38或低于 30则不能生长，在培养基上室温放置 12 天即可死亡，在 39存活 13 小时，42存活 15 分钟，50存活 5 分钟。如在不完全干燥的衣裤、被褥、毛巾、玩具上则可存活 1824 小时。一般消毒剂容易将它杀灭，在 1:4000 硝酸银溶液中 7 分钟死亡， 1石炭酸溶液中 3 分钟内死亡。 淋球菌较为娇嫩，酶系统不完整，初代培养
4、普通培养基不易成功，需在含有动物蛋白的培养基上，且含有二氧化碳的条件下才能生长。淋球菌在血琼脂培养基孵育 24 小时后，可形成直径 0.51mm 的圆形稍隆起，湿润光滑，半透明，边缘呈花瓣状，有粘性的露滴状菌。淋球菌的生化反应不发达，只分解葡萄糖，产酸不产气，不分解麦芽糖及蔗糖。藉助上述生化特性亦可与脑膜炎球菌及其他奈瑟菌相鉴别。淋球菌能产生氧化酶和过氧化氢酶，在诊断上有一定意义。三、淋病奈瑟菌的实验室检查及其诊断细菌的实验室检查及其它检查（1） 涂片检查：取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰氏染色，在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者，此法阳性
5、率在 90%左右，可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为 50-60%，且有假阳性，因此世界卫生组织推荐用培养法检查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低，因此要取前列腺按摩液，以提高检出率。咽部涂片发现革兰氏阴性双球菌不能诊断淋病，因为其他奈瑟菌属在咽部是正常的菌群。另外对症状不典型的涂片阳性应作进一步检查。（2）培养检查：淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养法对症状很轻或无症状的男性、女性病人都是较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊，在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织推荐的筛选淋病的唯一方法。目前国外推荐选择培养基有改良的 Thayer-Martin（
6、TM）培养基和 New York City（NYC）培养基。国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长。在 36，70%湿度，含 5%-10%CO2（烛缸）环境中培养，24-48 小时观察结果。培养后还需进行菌落形态，革兰氏染色，氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定。培养阳性率男性 80%-95%，女性 80-90%。培养后需根据菌落形态、革兰染色、氧化酶试验和糖发酵试验做出鉴定。培养阳性率男性为 8095，女性为 8090。（3）抗原检测1固相酶免疫试验（EIA）：可用来检测临床标本中的淋球菌抗原，在流行率很高的地区而又不能作培养或标本需长时间远送时使用，可以在妇女
7、人群中用来诊断淋球菌感染。2直接免疫荧光试验：通过检测淋球菌外膜蛋白 I 的单克隆抗体作直接免疫荧光试验。但目前在男女二性标本的敏感不高，特异性差，加之实验人员的判断水平，故该实验尚不能推荐用来诊断淋球菌感染。（4）基因诊断1淋球菌的基因探针诊断:淋球菌的基因探针诊断，所用的探针有：质粒 DNA 探针，染色体基因探针和 rRNA 基因探针。2、淋球菌的基因扩增检测 PCR 技术和连接酶链反应的出现进一步提高了检测淋球菌的灵敏性，它具有快速、灵敏、特异、简便的优点，可以直接检测临床标本中极微量的病原体。（5）药敏试验 对培养阳性者可进一步用纸片扩散法做药敏试验，或用琼脂平皿稀释法测定药物最小抑菌
8、浓度（MIC） ，以及用纸片酸度定量法检测 内酰胺酶（使用 Whatman I 号滤纸 PP-NG 菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为 PPNG，阴性为 N-PPNG） ，以确定淋球菌对抗生素的敏感性，合理选择用药。四、淋病的预防淋病奈瑟菌的预防要点如下：1.避免婚外性行为。2.在性生活中提倡使用避孕套等理化屏障，以防止淋球菌感染。3.预防性使用抗生素可减少感染的危险，可应用于已知与淋病患者有性接触者。4.按淋病治疗方案对病人进行合理治疗，彻底消灭传染源。5.对性伴侣应进行检查和治疗。6.患者宜注意个人卫生与隔离，不与家人、小孩（尤其女孩）同床、共浴。7.执行对新生儿硝酸银溶液或红霉素溶液预防滴眼
9、的规定，防止新生儿淋病性眼炎发生。8.病人需经彻底治愈后，方可结婚、生育和安排工作。五、淋病奈瑟菌的生物安全防护根据病原微生物生物实验室生物安全管理条例中的有关规定，人间传播的微生物名录（待颁布）霍乱弧菌属于三类，BSL-2。相关的防护事宜包括：（1）操作要求1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器等。4、注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体的） 。用过的一次性针头必须弯曲、
10、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。5、打碎的器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前，应按照相关的规定进行消毒。6、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关的法规。7、溅出或偶然事件中，明显暴露于
11、传染源时，要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗，保留书面记录。8、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前，要按照相关的规定消毒；在离开设施转移前，要按照相关的规定打包运输。（2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器、采集感染标本等。3、涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。4、当必须在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护措施（跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置） ，以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。5、在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用，不能用于接触“洁净”的表面（键盘、电话等） ，也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。
