1、8 生物样品内中药制剂化学成分的测定,生物样品内分析的性质、意义与任务,又称体液药物分析、生物药物分析、是随着临床药学、临床药理学的发展和需要而建立起来的一门新兴学科。,1 概述,（一）生物样品内药物分析的性质,旨在通过各种分析手段，了解药物在生物药品内的数量和质量变化，获得药物代谢动力学的各种参数、药物在生物样品内的生物转化、代谢的方式和途径等信息，从而为药品生产、临床医疗、实验研究等方面对所研究的药物做出估计和评价，对药物的改进与发展做出贡献。,（二）生物样品内药物分析的意义,1.生物样品内药物分析在新药评价和新药研发中的意义,2.生物样品内药物分析在临床合理用药中的意义,生物样品内分析的
2、性质、意义与任务,1 概述,（三）生物样品内药物分析的任务,1.分析方法的研究,2.在药物浓度检测中的应用,3.在药代动力学研究中的应用,4.生物样品内内源性物质的测定,生物样品内分析的性质、意义与任务,1 概述,1.生物样品内药物分析的对象：生物样品内药物到达之处。,2.特点,1.干扰杂质多 2.样品量少 3.要求较快提供结果,生物样品内药物分析的对象和特点,1 概述,药物进入生物体内后要经过吸收、分布、代谢、排泄等过程。生物样品内药物量经常保持在某一水平，而随时间在不断变化。,2 药物的存在状态与生物转化,存在状态,1.了解药物进入生物体内后的状态，及其与生物系统的相互作用，以保证临床用药
3、安全、合理有效。 2.研究药物代谢的途径、酶催化机制、结构与药理作用的关系，避免药物的毒性及寻找新药具有重要意义。 3.研究药物的相互作用、毒性作用机制，使临床用药更加安全、合理4.对药物代谢充分了解，有利于生物样品内药物分析方法的建立，避免代谢物的干扰，同时测定代谢物。,2 药物的存在状态与生物转化,药物的代谢,2 药物的存在状态与生物转化,药物的代谢,药物代谢反应第一阶段（一相）：P450等催化下的氧化、还原、水解等反应，增大极性 第二阶段（二相）：与葡萄糖醛酸、硫酸盐等结合，进一步增大极性，随尿排出,3 生物样品的制备,常用生物样品,常用生物样品的种类、特点与采集血浆(plasma) 血
4、样 血清(serum)全血(whole blood) 尿液(urine)用于药物剂量回收、药物肾清除率及生物利用度的研究 尿液药物浓度变化大，应测定一定时间内尿中药 物总量。 尿液与血液中药物的相关性差。,3 生物样品的制备,常用生物样品,唾液(saliva)用于药物浓度监测和药代动力学研究 其他动物脏器组织匀浆等样本的代表性力求取样条件标准化 样品的贮存血样离心，冷冻保存尿液立即测定，否则应冷藏或加防腐剂,（一）提取方法的选择依据,1.药物的理化性质,2.药物的浓度范围,4.生物样品的类型,3.药物测定的目的,5.样品处理与分析技术的关系,3 生物样品的制备,样品预处理,（二）药物的提取,1
5、.蛋白质处理,1. 脱水沉淀 2.形成不溶性盐沉淀 3.其他方法,2.缀合物水解,1. 酸水解 2. 酶水解 3. 溶剂解,3.冷冻干燥,3 生物样品的制备,样品预处理,（三）药物的分离与净化,液液萃取法,液固萃取法,pH 值 提取溶剂 离子强度 离子对提取,3 生物样品的制备,样品预处理,固相提取柱（使用硅藻土、氧化 铝、离子交换树脂、活性炭等填充剂） “干混合物”萃取,3 生物样品的制备,样品预处理,（四）待测组分的富集真空挥发或通气流挥发 （五）衍生化处理待测物的损失吸附、化学降解、衍生化反应、络合、蒸发 （六）样品玷污,第四节 生物样品内药物分析方法,一、分析方法的设计与评价,二、常用的测定方法,一、分析方法的设计与评价,1.分析方法的设计依据 2.方法建立的一般步骤 3.方法的评价,2.方法建立的一般步骤,1.以纯品进行测定 2.空白样品测定 3.以水代替空白样品,添加对照品后测定 4.空白样品添加对照品后测定 5.生物样品内实际样品的测定,3.方法的评价,1.准确度 2.精密度 3.灵敏度 4.方法的专属性 5.线性范围 6.稳定性,二、常用的测定方法,1.光谱法 2.色谱法 3.连用技术 4.免疫分析法,
