实验四 氨基酸纸层析

1、肌肉组织氨基移换作用 （纸层析法）,一、实验目的,1. 了解氨基移换作用的原理。 2. 熟悉纸层析法的基本原理。 3. 掌握纸层析法分离鉴定氨基酸的方法。,氨基移换作用（转氨基作用）,在转氨酶的作用下，某一氨基酸去掉-氨基生成相应的-酮酸，而另一种-酮酸得到此氨基生成相应的氨基酸的过程。,二、实验原理,人体内最重要的两种转氨酶：,谷丙转氨酶（GPT）/丙氨酸转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（GOT）/天冬氨酸转氨酶（AST）,正常人各组织中GPT及GOT 活性 (单位/克湿组织),血清转氨酶活性，临床上可作为疾病诊断和预后的指标之一。,谷氨酸 丙酮酸。

2、实验一、氨基酸的分离鉴定,纸层析法,一、实验目的,通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作技术。,二、实验原理,纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。利用不同物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数不同而得到分离。展层剂由有机溶剂与水组成。在纸上，水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相，当有机相沿纸流动经过层析斑点时，层析点上的溶质就在有机相和水相之间进行分配。当有机相不断流动时，溶质就沿着有机相流动方向移动，不断进行分配，溶质中各组分的分配系数不同，移动速率不同，因而彼此分开。,各组分由于移动。

3、2019/4/14,氨基酸的薄层层析,1,实验十二 氨基酸的薄层层析,2019/4/14,氨基酸的薄层层析,2,一、实验目的掌握氨基酸的薄层层析的方法和原理，学会分析未知样品的氨基酸成分。 二、原理滤纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析，滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。有机相流经固定相支持物时，与固定相之间连续抽提，使物质在两相间不断分配而得到分离。溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示：Rf 物质结构、溶剂系统的物质组成等因素都会影响Rf值。,原点到层析斑点中心的距离,原点到溶剂前沿的距离,2019/4/14。

4、氨基酸的分离鉴定纸层析法,生物化学实验之一,安徽师范大学生科院生化教研室,一、实验目的,1. 掌握纸上层析的一般原理和方法 2. 了解氨基酸的特征性颜色反应,二、实验原理,纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。 溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示： Rf =原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离= X/Y在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。 Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量。

5、如何分离鉴定氨基酸混合液？ 陈 健,生物化学与分子生物学实验教学中心,氨基酸的薄层层析 (Thin layer chromatography of amino acids),实验目的,掌握薄层层析法的一般原理。 掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。 掌握如何根据移动速率（Rf值）来鉴定被分离的物质（即氨基酸混合液）。,层析基本概念,层析技术是利用化合物中各组分的物理性质（如溶解度、吸附能力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分不同程度地分布在两相中，随着流动相从固定相上流过，不同组分以不同速度而最终被分离。 特点：分离效。

6、实验四氨基酸纸层析 折光率的测定 一 实验目的 本实验采用纸色谱对几种氨基酸进行分离和鉴定 以了解纸色谱的原理 练习其操作方法 2 了解测定折光率的简单原理 掌握阿贝折射仪的使用方法 二 实验原理 1 色谱分析法 简称色谱法或层析法 色谱分析法简称色谱法或层析法 1906年 俄国植物学家Tsweet将CaCO3放在竖立的玻璃柱中 从顶端倒入植物色素的石油醚浸取液 并用石油醚冲洗 在柱的不同部位形成。

7、没有规矩 不成方圆 不缺课 不迟到早退不能把吃的东西带到实验室实验前穿上白大褂 扎好头发 书包放到指定地点做实验要严肃认真 严谨有序 不能打闹嬉戏 或者坐到桌上实验过程中要接触很多的试剂及仪器 一定要注意安全实验过程要学会统筹安排 做得既快。

8、纸层析法分离氨基酸一、前言纸层析法纸层析法又称纸色谱法，是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家 M.Tswett 发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。它是一种以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分，流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相，如缓冲液，甲酰胺等。将试样点在纸条的一端，然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。当组分移动一定距离后，各组分移动距离不同，最后。

9、实验二、纸层析法分离鉴定氨基酸,一、目的： 学习并掌握纸层析法分离鉴定氨基酸的原理和方法。,二、原理 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维上吸附的水是固定相，展层用的有机溶剂是流动相。在层析时，,将样品点在距滤纸一端约23cm的某一处，该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层，这样混合氨基酸在两相中不断分配。由于分配系数（Kd）不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。物质被分离后在纸层析图谱上的位置，可用比移值（Rf）来表示。 所谓Rf，是指在纸层析中，从原点至氨基酸停留。

10、18,1,实验一 纸层析法分离鉴定氨基酸,通过实验，掌握纸层析的基本操作技能。 加深对分配层析原理的理解。,【一、实验目的】,18,2,【二、实验原理】层析技术 是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别，使各组分以不同程度分布在两相中，其中一相为固定相，另一相流过此相称作流动相，并使各组分以不同速度移动，从而达到分离的目的。可分离物质 糖类、有机酸、氨基酸、核苷等,18,3,固定相 在层析中起分离作用而不随层析过程移动的物质。如纸层析中固定相是滤纸纤维中结合的水。固定相被看成是样品移动的阻力。 流动相 在层析过程因其本身。

11、氨基酸的纸层析法 一目的 了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。 二、原理 以滤纸为支持物的层析法， 称为纸层析法。 纸层析所用展层剂大 多由水和有机溶剂组成。展层时，水为静止相，他与滤纸纤维亲和力 强；有机溶剂为流动相，它与滤纸纤维亲和力弱。有机溶剂在滤纸上 又下向上移动的，称为上行法；有上向下移动的，称为下行法。 将样品在滤纸上确定的原点处展层， 由于样品中各种氨基酸在两 相中不断进行分配， 且。

12、氨基酸的纸层析法一目的了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。二、原理以滤纸为支持物的层析法，称为纸层析法。纸层析所用展层剂大多由水和有机溶剂组成。展层时，水为静止相，他与滤纸纤维亲和力强；有机溶剂为流动相，它与滤纸纤维亲和力弱。有机溶剂在滤纸上又下向上移动的，称为上行法；有上向下移动的，称为下行法。 将样品在滤纸上确定的原点处展层，由于样品中各种氨基酸在两相中不断进行分配，且他们的分离系数各不相同，所以不同的氨基酸随流动相移动的速率也不相同，于是各种氨基酸在滤纸上就相互分离出来，形成距原点不等的层。

13、实验六氨基酸的纸层析法 一 原理以滤纸为支持物的层析法 称为纸层析法 纸层析所用展层剂大多由水和有机溶剂组成 展层时 水为静止相 他与滤纸纤维亲和力强 有机溶剂为流动相 它与滤纸纤维亲和力弱 有机溶剂在滤纸上又下向上移动的 称为上行法 有上。

14、纸层析法分离氨基酸 指导教师 程靖 实验原理 实验目的 1 通过对氨基酸的分离 学习运用纸色谱法分离混合物的基本原理 掌握纸色谱的操作方法 2 学习如何根据不同组分的分离结果来鉴别未知试样的组分 实验原理 纸色谱分离法又称纸层析法 是根据不同物质在两相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析 滤纸纤维上的羟基具有亲水性 吸附一层水作为固定相 有机溶剂为流动相。

15、实验二 纸层析法分析氨基酸 一 实验目的1 掌握纸上层析的一般原理和操作方法 2 了解氨基酸的特征性颜色反应 3 学会分析未知样品的氨基酸成分 纸上层析法是分配层析法中的一种 常以滤纸为惰性支持物 纸上层析法是分离 鉴定和定量测定氨基酸 糖。

16、实验六氨基酸的纸层析法 一 原理以滤纸为支持物的层析法 称为纸层析法 纸层析所用展层剂大多由水和有机溶剂组成 展层时 水为静止相 他与滤纸纤维亲和力强 有机溶剂为流动相 它与滤纸纤维亲和力弱 有机溶剂在滤纸上又下向上移动的 称为上行法 有上。

17、实验十二氨基酸的纸层析 一 实验目的掌握氨基酸纸上层析的方法和原理 学会分析未知样品的氨基酸成分 二 原理滤纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析 滤纸纤维上的羟基具有亲水性 吸附一层水作为固定相 有机溶剂为流动相 有机相流经固定相支持物时 。

18、实验四 氨基酸纸层析、 折光率的测定,一、实验目的、本实验采用纸色谱对几种氨基酸进行分离和鉴定,以了解纸色谱的原理，练习其操作方法。2 、了解测定折光率的简单原理，掌握阿贝折射仪的使用方法。,二、实验原理,1、色谱分析法（简称色谱法或层析法）,色谱分析法简称色谱法或层析法。1906年，俄国植物学家Tsweet将CaCO3放在竖立的玻璃柱中，从顶端倒入植物色素的石油醚浸取液，并用石油醚冲洗。在柱的不同部位形成色带，因而命名为色谱。管内填充物称为固定相，冲洗剂称为流动相。色谱法就是利用混合物中各组分在固定相和移动相中进行反。