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类型实验六氨基酸的纸层析法.ppt

  • 上传人:scg750829
  • 文档编号:12278047
  • 上传时间:2021-12-09
  • 格式:PPT
  • 页数:4
  • 大小:60.50KB
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    实验六氨基酸的纸层析法.ppt
    资源描述:

    1、实验六氨基酸的纸层析法 一 原理以滤纸为支持物的层析法 称为纸层析法 纸层析所用展层剂大多由水和有机溶剂组成 展层时 水为静止相 他与滤纸纤维亲和力强 有机溶剂为流动相 它与滤纸纤维亲和力弱 有机溶剂在滤纸上又下向上移动的 称为上行法 有上向下移动的 称为下行法 将样品在滤纸上确定的原点处展层 由于样品中各种氨基酸在两相中不断进行分配 且他们的分离系数各不相同 所以不同的氨基酸随流动相移动的速率也不相同 于是各种氨基酸在滤纸上就相互分离出来 形成距原点不等的层析点 在一定条件下 室温 展层剂的组成 滤纸的质量 PH值等不变 不同的氨基酸有固定的移动速率 Rf值 Rf 原点到层析点中心的距离 原

    2、点到溶剂前沿的距离用混合氨基酸做样品时 如果只用一种溶剂展层 由于某些氨基酸的移动速率相同或相近 就不能将它们分开 为此 当用一种溶剂展层后 可将滤纸旋转90度 以第一次所的层析点为原点 在用另一溶剂展层 从而达到分离的目的 这种方法称为双向层析法 本试验主要介绍的是单向层析法 其中混合氨基酸有精氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸组成 二 实验仪器1 新华滤纸2 层析缸3 细线4 点样管5 橡皮筋6 电吹风7 喷雾器 三 实验试剂1 混合氨基酸 精氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸 2 展层剂 正丁醇 12 氨水 95 乙醇 蒸馏水 13 3 3 1 v v 3 0 5 茚三酮 无水丙酮溶液 0 5g茚三酮溶于100

    3、ml无水丙酮 贮于棕色瓶中 四 试验步骤1 取滤纸剪成20 10厘米的滤纸条一张 在一端打孔 系一根细线 在另一端2 3cm处用铅笔画一横线 中间画一圆点 原点 2 取毛细管一支 回收 吸取氨基酸混合液 在原点处点样 样点直径不宜超过5mm 每点一次用吹风机吹干 点2 3次为佳 3 点样后将滤纸放入层析缸中展层 注意点样线要高于层析液面 滤纸不要贴在层析缸璧上 当展层至另一端1 2cm处时 停止展层 大约2 3小时 4 取出滤纸 用铅笔记下溶剂前沿 然后用热风吹干 或烘箱60 烘干 5 均匀喷上茚三酮 无水丙酮液 注意使溶液不倒流 不间断 6 用吹风机吹干 观察层析点 确定其几何中心 7 量取数值 计算各自的Rf值 与表中标准氨基酸Rf值比较 确定样品氨基酸种类 书上图谱横着看

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