DNA合成的特点 以原来的 DNA母链为模板,四种脱氧核苷三磷酸为前体,还需要Mg2+。根据碱基互补配对原则复制产生新的子链。2.需要解链3半保留复制4.需要引物5.复制方向 5 36.复制起始于特定的区域,但终止位置不固定7.双向复制8.半不连续9.具有高度的忠实性DNA合成的过程DNA复制过程
分子生物学简答题复习Tag内容描述:
1、方向多为双向,也可以是单向,若以双向进行复制,两个方向的复制速度不一定相同。
由于 DNA聚合酶不能从无到有合成新链,所以 DNA复制需要有含 3-OH的引物,引物由含有引物酶的引发体合成一段含310 个核苷酸的 RNA片段;延长:DNA 复制时,分别以两条亲代 DNA链为模板,当复制叉沿 DNA移动时,以亲代 35链为模板时,子链的合成方向是 53 ,可连续进行;以亲代 53链为模板时,子链不能以 35方向合成,而是先合成出许多 53方向的冈崎片段,然后连接起来形成一条子链;终止:当一个冈崎片段的 3-OH与前一个冈崎片段的 5-P接近时,复制停止,由 DNA聚合酶切除引物,填补空隙,连接酶连接相邻的 DNA片段。
参与 DNA合成的酶有哪些参与 DNA复制的主要酶和蛋白质有 DNA聚合酶、解链酶、SSB、引发酶、拓扑异构酶、连接酶和端聚酶等。
参与 DNA逆转录的酶有逆转录酶。
原核细胞中有哪些 DNA聚合酶?分别有哪些功能和作用有 5种 DNA聚合酶。
DNA聚合酶 I具有 53聚合酶活性、5核酸外切酶活性、3核酸外切酶活性,可催化单链。
2、转变成蛋白质分子(或者 RNA 分子),执行各种生理生化功能,完成生命的全过程。
5. ribozyme【已考试题】即核酶,由活细胞所分泌的具有像酶那样催化功能的 RNA 分子。
6. SD 序列原核生物起始密码 AUG 上游 712 个核苷酸处的一段保守序列,能与 16S rRNA 3端反向互补,被认为在核糖体-mRNA 的结合过程中起作用。
7. RFLP即限制性片断长度多态性。
指限制性酶切位点上的遗传差异。
这些差别引起相关限制性酶切割产生不同长度片段。
RELPs 可用于遗传作图,将基因组与常见的遗传标记联系起来。
8. 限制性内切酶限制性内切酶是一类能够识别双链 DNA 分子中的某种特定核苷酸序列,并在相关位置切割 DNA 双链结构的核酸内切酶。
9. 内含子和外显子 真核细胞 DNA 分子中能转录到 mRNA 前体分子中但会在翻译前被切除的非编码区序列称内含子。
而编码区称为外显子。
10. C 值和 C 值反常现象 C 值指一种生物单倍体基因组 DNA 的总量,一般随生物进化而增加,但也存在某些低等生物的 C 值比高等生物大,即 C 值反常现象。
原因是真核生物基因组中含大量非编码序列。
3、 与 基 因 等 同 , 都 是 代 表 一 个 蛋 白 质 质 的 DNA 单 位 组 成 。
一 个 顺 反 子 所 包 括 的 一 段 DNA与 一 个 多 肽 链 的 合 成 相 对 应 。
4. 基 因 表 达 gene expressionDNA 分 子 在 时 序 和 环 境 的 调 节 下 有 序 地 将 其 所 承 载 的 遗 传 信 息 通 过 转 录 和 翻 译 系 统 转变 成 蛋 白 质 分 子 (或 者 RNA分 子 ), 执 行 各 种 生 理 生 化 功 能 , 完 成 生 命 的 全 过 程 。
5. ribozyme【 已 考 试 题 】即 核 酶 , 由 活 细 胞 所 分 泌 的 具 有 像 酶 那 样 催 化 功 能 的 RNA分 子 。
6. SD序 列 SD sequence原 核 生 物 起 始 密 码 AUG 上 游 7 12 个 核 苷 酸 处 的 一 段 保 守 序 列 , 能 与 16S rRNA 3 端反 向 互 补 , 被 认 为 在 核 糖 体 -mRNA的 结 合 过 程 中 起 作 用 。
7. 限 制 性 内 切 酶 re。
4、其主要来源或途径。
既是指有待克隆的 DNA,又是指有待研究或应用的克隆产物。
从组织细胞提取逆转录合成PCR 扩增化学合成 简述作为基因克隆的载体有哪些特点,试举例说明。
能自主复制;具有两个以上的遗传标记物,便于重组体的筛选和鉴定;有克隆位点(外源 DNA 插入点) ,常具有多个单一酶切位点,称为多克隆位点;分子量小,以容纳较大的外源 DNA。
简述乳糖操纵子正、负调节机制。
无乳糖有葡萄糖,不转录有乳糖有葡萄糖,低转录有乳糖无葡萄糖,高转录转录水平调控的基本要素有哪些。
RNA 聚合酶、调控序列和调节蛋白试举例说明基因表达的特异性。
基因表达的时间特异性 甲胎蛋白基因在胎儿肝细胞表达,合成大量甲胎蛋白,自出生至成年后该基因基本沉默基因表达的空间特异性 甲胎蛋白基因只在肝细胞内表达基因表达的条件特异性 在乳糖充足而葡萄糖缺乏时大肠杆菌乳糖操纵子高水平表达三、论述题在有葡萄糖存在时,细菌是不利用乳糖的;当葡萄糖耗尽后,细菌才利用乳糖。
试用乳糖操纵子解释其机制。
试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同。
原核生物转录水平调控的特点 因子决定 RNA 聚合酶识别的特异性多顺反子 mRNA操纵子。
5、mn;双螺旋每一转的高度(即螺距)是 3.4nm,请问:(l)该分子有多长?(2)该 DNA 有多少转?7.曾经有一段时间认为,DNA 无论来源如何,都是 4 个核甘酸的规则重复排列(如, ATCGATCGATCGATCG),所以 DNA 缺乏作为遗传物质的特异性。
第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么?8.为什么在 DNA 中通常只发现 AT 和 CG 碱基配对?9.列出最先证实是 DNA(或 RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。
10.为什么只有 DNA 适合作为遗传物质?ll.什么是连锁群?举一个属于连锁基因座的例子。
12.什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
13.对于所有具有催化能力的内含子,金属离子很重要。
请举例说明金属离子是如何作用的。
14.列出真核生物 mRNA 与原核生物 mRNA 的区别。
15.列出各种 tRNA 所有相同的反应及个别 tRNA 的特有反应。
16.在体内,rRNA 和 tRNA 都具有代谢的稳定性,而 mRNA 的寿命却很短,原因何在?17.为什么真核生物核糖体 RNA 基因具有很多拷贝?18.为什么说信使 。
6、不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。
所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
C、CAP 的正性调节:在启动子上游有 CAP 结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP 浓度升高,与 CAP 结合,使 CAP 发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的 CAP 结合位点,激活 RNA 聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。
D、协调调节:乳糖操纵子中的 I基因编码的阻遏蛋白的负调控与 CAP 的正调控两种机制,互相协调、互相制约。
3、基因调控的水平有哪些?基因调控的意义?答:a、DNA 水平的调控。
b、转录水平上的调控。
c、转录后的调控。
d、翻译水平的调控。
e 、细胞质与基因调控。
意义:适应物理,化学等环境因素变化,调节代谢,维持细胞生长与分裂。
4、简述乳糖操纵子的结构及其正负调控机制。
答:结构:A、Y 和 Z,以及启动子、控制子和阻遏子。
正调控机制:CAP 分。
7、进而成为有活性的 RISC,又称为 slicer.slicer 与靶 mRNA 结合,导致其断裂,进而导致其彻底降解。
反义 RNA 是与靶 mRNA 互补的 RNA,它通过与靶 mRNA 特异结合而抑制其翻译表达,反义 RNA 是与靶 mRNA 是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以,mRNA 不一定完全被抑制。
8简述真核基因表达的调控机制。
答:(1)DNA 和染色质结构对转录的调控:DNA 甲基化,组蛋白对基因表达的抑制, 染色质结构对基因表达的调控作用,基因重排,染色质的丢失,基因扩增;(2)转录起始调控:反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节) ,反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控;(3)转录后调控:5端加帽和 3端多核苷酸化调控,选择剪接调控,mRNA 运输调控,mRNA 稳定性调控;(4)翻译起始的调控:阻遏蛋白的调控,对翻译因子的调控,对 AUG 的调控, mRNA 5端非编码区的调控,小分子 RNA;(5)翻译后加工调控:新生肽链的水解,肽链中氨基酸的共价修饰,信号肽调控。
9。
8、过酶分子的作用下,少量乳糖分子进入细胞,又在单个 -半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖,诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之因不能与操纵基因结合而失活,O 区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA 的合成。
调控作用:葡糖糖对 lac 操纵子的表达的抑制是间接的,不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制 cAMP 的合成。
cAMP-CAP 复合物与启动子区的结合是 lacmRNA 转录起始所必须的,因为该复合物结合于启动子上游,能使 DNA 双螺旋发生弯曲。
有利于形成稳定开放型启动子-RNA 聚合酶结构。
如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中, lac 操纵子处于阻遏状态,不能被诱导试述 E.coli 的 RNA 聚合酶的结构和功能。
2 个 亚基、一个 亚基、一个 亚基和一个 亚基组成的核心酶,加上一个 亚基后则成为聚合酶全酶 亚基:核心酶组装、启动子识别 和 亚基: 和 共同形成 RNA 合成的催化中心因子:存在多种 因子 ,用于识别不同的启动子试述原核生物 DNA 复制的特点。
1.原核只有一个起始位点。
2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制,特别是快。