电镜实验操作技术

1、要求： 四人一组 动物：小鼠 30g左右 （每人1只）每组、各半大鼠 150g左右（两人1只）每组、各半 材料:一次性1ml、5 ml注射器、大小灌胃针头（两人一套）大小鼠固定器（两人一套） 棉签 棉球 剪刀 血色素吸管 纱手套 一次性胶手套 染液 头皮针（4号半或5号）小鼠笼（每组2个）、搪瓷托盘（每组一个） 试剂：75%酒精 生理盐水,实验所需的试剂、材料和动物量,1,实验动物一般操作技术（一）,大鼠、小鼠,2,3R原则 体外替代实验（目前在国际上被承认的体外替代实验的方法） 皮肤刺激实验 眼刺激实验等,体外替代实验,3,1.了解动物实验的目的和意。

2、生物技术实验室常用仪器设备简介及操作,实验一,实验室主要仪器，设备的简介及使用方法,微量移液器高速台式离心机PCR仪凝胶成像系统电泳仪恒温气浴摇床超净工作台灭菌锅,微量移液器,微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。0.510l 10100l20200l 1001000l,常见规格,量液的操作步骤：,第一停点,第二停点,A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点； B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮； C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁。

3、实验室常用分离技术原理及操作,一、 结晶与重结晶,结晶是物质以晶态的形式从溶液中析出的过程。 结晶是纯化固体有机化合物的重要方法，它是利用混合物中各成分在某种溶剂中或某种混合溶剂中的溶解度不同使其相互分离成结晶的过程。重结晶由于初次结晶或多或少总会有少量杂质（光谱分析、熔点测定），因此需反复结晶，这一过程叫做重结晶。,（一）结晶法的基本原理依据要纯化的固体物质与所含杂质在同一溶剂中溶解度不同，结晶析出而得到纯化。若所选择溶剂只溶解被纯化物质，不溶解杂质，那末通过过滤后，进行结晶，可以很容易将样品纯化。

4、生物安全实验室操作技术规范,发展概况和我国现状,国际概况 20世纪5060年代 1983年WHO第一版实验室生物安全手册（Laboratory Biosafety Manual） 1993年WHO发表了第二版实验室生物安全手册(Laboratory Biosafety Manual ，2nd edition) 2002年WHO又发表了实验室生物安全手册第二版的网络修订版 2004年正式发布了第三版。,关于实验室生物安全规范化管理，美国、欧洲、加拿大等国家做得都比较好。 在1993年由美国疾病预防控制中心/国立卫生研究院（CDC/NIH）发布了Biosafety in the Microbiological and Biomedical Laboratories Manual,3th 。

5、考试说明对实验与探究能力的 相关要求,能独立完成生物学教材所规定的生物实验：理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用。,光学显微镜操作技术,一、教材有关光学显微镜操作技术的实验,二、观察根尖分生组织细胞的有丝分裂,1、实验目的:,制备洋葱根尖的临时装片，熟练使用高倍显微镜。,2、实验原理:,3、材料用具:,洋葱，质量分数10%的盐酸，质量分数0.01g/ml的龙胆 紫溶液（或醋酸洋红溶液），光学显微镜，盖玻片，载 玻片，培养皿2个，剪刀，镊子，滴管。,观察植物细胞有。

6、PCR理论基础及基本操作,李 静 2012.2.21,第一节 PCR技术,聚合酶链式反应 Polymerase Chain ReactionPCR的基本原理 PCR的成分 PCR的操作步骤,一、PCR的基本原理和步骤,基本原理DNA复制 碱基互补配对原则 A=T，G=C,一级结构的文字式缩写,基因 TGCAGGTTAAAGG 它的互补链: ACGTCCAATTTCC(误) CCTTTAACCTGCA(正) 3-ACGTCCAATTTCC-5(正),二、PCR的成分,模板 （Template DNA）引物 （Primer）Taq DNA聚合酶 dNTPTaq聚合酶缓冲液 （Taq Buffer）所有成分在同一离心管中,模板,是一段单链或者双链DNA，提供用于进行PCR扩增的原始信息 对模板的纯度要。

7、药理学实验常用仪器 操 作 技 术,一、BL-410生物机能实验系统,（一）概述BL-410生物机能实验系统是配置在微机上的4通道生物信号采集、放大、显示、记录与处理系统，它将现代电子技术与计算机数据处理技术有机地融合在一起，替代了原来利用分离的放大器、示波器、记录仪、刺激器等众多仪器组成的烦琐的生物信号观测与记录装置，在微机上以中文Windows操作系统平台为基础，直观而操作简便。,实验系统主要由以下三部分组成： 1、IBM兼容微机 2、Biolap410生物信号采集、放大硬卡 3、Biolap98生物信号显示与处理软件,（二）生物信号显示与处理。

8、PCR理论基础及基本操作,李 静 2012.2.21,第一节 PCR技术,聚合酶链式反应 Polymerase Chain ReactionPCR的基本原理 PCR的成分 PCR的操作步骤,一、PCR的基本原理和步骤,基本原理DNA复制 碱基互补配对原则 A=T，G=C,一级结构的文字式缩写,基因 TGCAGGTTAAAGG 它的互补链: ACGTCCAATTTCC(误) CCTTTAACCTGCA(正) 3-ACGTCCAATTTCC-5(正),二、PCR的成分,模板 （Template DNA）引物 （Primer）Taq DNA聚合酶 dNTPTaq聚合酶缓冲液 （Taq Buffer）所有成分在同一离心管中,模板,是一段单链或者双链DNA，提供用于进行PCR扩增的原始信息 对模板的纯度要。

9、第四章 动物实验的基本 技术和操作方法,南开大学医学院 张京玲,主要内容,动物实验基本技术和操作方法 一、动物实验的常用方法 二、实验动物的抓取固定方法 三、实验动物编号标记方法 四、实验动物的随机分组方法 五、实验动物被毛的去除方法,主要内容,六、实验动物给药途径和方法七、实验动物用药量的确定及计算方法八、实验动物的麻醉九、实验动物采血方法 十、急性动物实验中常用的手术方法十一、实验动物的急救措施十二、实验动物的处死方法,一、动物实验的常用方法,动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其不同的应用，其。

10、1,多位点可变数目串联重复序列（MLVA）分型技术和操作步骤,李 伟中国CDC 传染病所 传染病预防控制国家重点实验室 PulseNet China第一期培训 2010-06-19,2,病原菌分子分型的目的,长期研究病原菌的遗传进化 病原菌适应来自宿主的高选择性压力 因点突变、重组（包括基因转移）等遗传变异 短期研究 了解病原菌的适应性 感染溯源,3,分子分型方法,序列或分类资料为基础的等位基因： 多位点序列分析（multilocus sequence typing，MLST） 多位点可变数目串联重复序列分析（Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis,MLVA）图像分析。

11、实验一 实验动物一般操作技术,一、实验目的及要求： 掌握实验动物一般操作技术。二、实验主要内容与方法： 常见动物的捉拿和固定方法； 实验动物性别的辩别； 动物标记、分组。,（一）动物选择 1、实验动物选择的基本原则： 在受试物代谢、生物化学和毒理学特征方面与人最接近； 自然寿命不太长； 易于饲养和实验操作； 经济并易获得。 2、种类的选择 小鼠、大鼠、兔子、狗 3、个体的选择 性别、年龄、体重、健康状态,（二）动物的捉拿和固定方法,1、小鼠捉拿固定：实验者以右手拇指及食指抓住其尾巴，令其在鼠笼上爬行，然后以左手拇指及。

12、实验七 无菌操作及接种技术,一、微生物接种技术 一）、实验目的学习微生物接种工具的使用，掌握无菌操作方法，建立有菌概念。 二）、实验原理 无菌技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。,三）实验用品,四）实验步骤： 1、接种工具的介绍接种环、接种钩、接种针、接种圈、接种锄、玻璃涂棒、其他接种工具,2、超净工作台,超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施，以保护实验免受外部环境的影响，同。

13、无水无氧实验操作技术,在我们的实验研究工作中经常会遇到一些特殊的化合物，有许多是对空气敏感的物质怕空气中的水和氧；为了研究这类化合物合成、分离、纯化和分析鉴定，必须使用特殊的仪器和无水无氧操作技术。否则，即使合成路线和反应条件都是合适的，最终也得不到预期的产物。所以，无水无氧操作技术已在有机化学和无机化学中较广泛的运用。目前采用的无水无氧操作分三种：(1)高真空线操作(Vacuum-line);(2)Schlenk操作;(3)手套箱操作(Glove-box)。 由于Schlenk操作的特点是在惰性气体气氛下(将体系反复抽真空充惰性气体)，使用特殊。

14、三、微生物实验技术操作规范示例,（一）斜面接种无菌操作技术 （二）倒平板及平板划线接种 （三）棉塞的制作 （四）玻璃仪器的包扎 （五）获得菌种的途径,（一）斜面接种无菌操作技术,(二）倒平板及平板划线接种,1.倒平板：按无菌要求，在火焰旁操作，取融化并冷却至不烫手的固化培养基（约50），倒入无菌培养皿中，倒量以铺满皿底为限，不超过培养皿高度的1/3。,2.平板划线接种：,（三）棉塞的制作,制作棉塞原则上采用普通棉花（非脱脂棉）,(四）玻璃仪器的包扎,1.移液管的包扎,2.试管的包扎,（五）获得菌种的途径：,1.从专业机构、科研。

15、实验四 豚鼠的基本操作技术及解剖学特征,细胞与遗传学教研室,一、实验目的,（一）通过学习熟练掌握实验动物豚鼠的抓取固定、给药、采血、处死等实验基本技术及方法， （二）熟悉豚鼠的解剖学特点。,二、实验器械,2ml注射器、5-6号针头、单面刀片、烧杯、粗棉带、手术剪、镊子、解剖板、脱脂棉、碘酒、75%酒精等。,三、实验动物,豚鼠1只/人,四、实验（内容）步骤,（一）实验豚鼠的抓取固定 （二）实验豚鼠的性别鉴定 （三）实验豚鼠采血（心脏） （四）实验豚鼠的给药（灌胃、腹腔、皮下等） （五）实验豚鼠的处死 （六）实验豚鼠的解剖学。

16、急性动物实验的基本操作技术和气胸,大理学院基础医学院机能学综合实验室,实验目的,1、初步掌握急性动物实验的基本操作步骤。 2、掌握切开皮肤与识别，分离颈部神经、血管、气管及股动脉。 3、初步了解家兔颈总动脉、气管、股动脉插管方法。 4、学习测定胸内压的方法，观察气胸时胸内压和呼吸的变化。 5、掌握处死动物的方法。,实验对象,实验药品及器材,健康家兔，体重2kg左右，雌雄不拘。,25%氨基甲酸乙脂（乌拉坦） 0.9%NaCl溶液 哺乳类动物手术器械1套,哺乳类手术器械,用于切开皮肤和脏器。常用手术刀由刀片和刀柄组成。 根据手术的部位。

17、无水无氧实验操作技术,在我们的实验研究工作中经常会遇到一些特殊的化合物，有许多是对空气敏感的物质怕空气中的水和氧；为了研究这类化合物合成、分离、纯化和分析鉴定，必须使用特殊的仪器和无水无氧操作技术。否则，即使合成路线和反应条件都是合适的，最终也得不到预期的产物。所以，无水无氧操作技术已在有机化学和无机化学中较广泛的运用。目前采用的无水无氧操作分三种：(1)高真空线操作(Vacuum-line);(2)Schlenk操作;(3)手套箱操作(Glove-box)。 由于Schlenk操作的特点是在惰性气体气氛下(将体系反复抽真空充惰性气体)，使用特殊。

18、动物实验基本操作技术,实验动物的捉拿和固定方法 实验动物的给药方法 实验动物的麻醉方法 实验动物的编号方法 实验动物的去毛方法 实验动物的取血方法 实验动物的处死方法,一、实验动物的捉拿和固定方法 1. 小鼠,捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上， 在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。,2. 家兔,一手抓住兔颈部的。

19、实验一 实验基本技术操作,了解实验室规则及注意事项； 学习常用仪器的使用方法和玻璃器皿的清洗、干燥方法； 掌握常用生物化学分析方法分光光度法； 学习运动生物化学实验样品的采集与处理方法； 学习记录试验结果和书写实验报告。,一 实验目的,课前预习 保持安静 注意观察 爱护仪器 注意安全 随时记录 撰写报告 讲究卫生,二、 实验室规则及注意事项,一般非计量玻璃仪器或粗容量一起的洗涤可先用刷子蘸取肥皂水。

20、制样 1 1 薄膜样品的制备一 基本要求电子束对薄膜样品的穿透能力和加速电压有关 当电子束的加速电压为200kV时 就可以穿透厚度500nm的铁膜 如果加速电压增至l000kV 则可以穿透厚度大致为1500nm的铁膜 1 和大块样品有相同的。