蛋白质的等电点测定与沉淀实验

1、实验七 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点,一、目的要求,1.学习和掌握圆盘电泳技术 2.学习和掌握等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点原理和方法,二、原理 蛋白质属于两性电解质，所带电荷的性质与数量与所处环境的pH值有关：环境pHpI，带负电，电场下向阳极移动；环境pH=pI，不带电，电场下不移动。 有一类两性电解质：它具有依次递变而又相差不大的等电点，在电场下形成递变而又连续的pH梯度，故在电泳介质中加入这种物质则能造成介质pH由酸到碱逐步变化。,等电聚焦原理：利用：1)各种蛋白质pI不同2）两性电解质载体在电场作用下。

2、蛋白质的等电点测定及性质实验一、实验目的初步学会测定蛋白质等电点的基本方法，并了解蛋白质的性质。二、实验原理蛋白质分子是两性电解质，当调节溶液的酸碱度，使蛋白质分子上所带的正负电荷相等时，在电场中，该蛋白质分子既不向正极移动，也不向负极移动，这时溶液的 pH 值，就是该蛋白质的等电点（pI）。不同蛋白质，等电点不同。在等电点时，蛋白质溶解度最小，容易沉淀析出。因此，可以借助在不同 pH 溶液中的某蛋白质的溶解度来测定该蛋白质的等电点。在蛋白质溶液中加入一定浓度的中性盐，蛋白质即从溶液中沉淀析出，这种作用称。

3、实验一、蛋白质的等电点测定,蛋白质等电点测定实验,蛋白质等电点测定实验现象,蛋白质等电点测定实验结果分析,蛋白质等电点测定实验注意事项,蛋白质等电点测定实验分析,蛋白质等电点测定实验讨论,蛋白质等电点的测定实验原理,蛋白质等电点的测定的实验结果,蛋白质等电点的测定。

4、实验一、蛋白质等电点测定及沉淀反应,一、实验目的,1、了解蛋白质的两性解离性质 2、学习测定蛋白质等电点的一种方法 3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识 4、了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义 5、了解蛋白质变性与沉淀的关系,二、实验原理,蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中存在下列平衡：蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。,当溶液的pH为一定值时，蛋白质极性基团解离的正负离子数相等，净电荷为0，此溶液的pH值为该蛋白质的等电点。不同蛋白质具有各自特定的等电点，与该蛋白质的组成结构有关。在等电点时。

5、实验一、蛋白质的等电点测定和沉淀反应,一、目的 1.了解蛋白质的两性解离性质 2.学习测定蛋白质等电点的一种方法 3.加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识 4.了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义,二、原理,蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中存在下列平衡：等电点:当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目 相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋白质的等电点。,四、操作步骤,（一）酪蛋白等电点的测定 （1）取同样规格的试管4支，加入各试剂，然后混匀。此时 4个管的pH依次为5.。

6、实验三 蛋白质的等电点测定和沉淀反应,实验目的1、了解蛋白质的两性解离性质。2、学习测定蛋白质等电点的一种方法。3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。4、了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。5、了解蛋白质变性与沉淀的关系。,实验原理 （一）蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中 存在下列平衡：,电场中移向阴极 不移动 移向阳极,蛋白质的等电点: 蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH。

7、蛋白质的性质实验（二）蛋白质的等电点测定和沉淀反应,一、实验目的 了解蛋白质的两性解离性质 学习测定蛋白质等电点的一种方法 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义 了解蛋白质变性与沉淀的关系,二、实验原理 蛋白质等电点测定 蛋白质是两性电解质，在蛋白质溶液中存在下列平衡：,蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋白质的等电点（PI）,不。

8、实验四 蛋白质的等电点测定和沉淀反应一、实验目的1、了解蛋白质的两性解离性质。2、学习测定蛋白质等电点的一种方法。3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。4、了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。二、实验原理蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中存在下列平衡：蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。当溶液的 PH 达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的 pH 值称为此种蛋白质的等电点。不同蛋白质各有特异的等电点。在等电点时，蛋白质的理。

9、实验7 蛋白质的等电点测定和沉淀反应,I. 蛋白质等电点测定,一、目的：了解蛋白质的两性解离性质学习测定蛋白质等电点的一种方法,二、原理：,蛋白质是两性电解质，在溶液中存在如下平衡：,蛋白质等电点：当蛋白质颗粒上正负电荷数目相等时溶液的pH值。处于等电点时的蛋白质在电场中不发生移动；处于等电点时的蛋白质溶解度最低。用醋酸与醋酸钠（醋酸钠混合在酪蛋白溶液中）配制成各种不同pH值的缓冲液。向缓冲液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液的pH值即为酪蛋白的等电点。,三、器材,1.水浴锅 2.温度计 3.200毫升锥型瓶 4.100毫。

10、实验项目一、蛋白质的等电点测定及沉淀反应姓 名： 指导教师： 实验室： 组员： 成绩： 第三部分：实验记录与分析实验现象记录及分析：（一）蛋白质等电点测定管号 pH 值 混浊度 解释现象1 5.9 - 未达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正负电荷过少。2 5.5 + 接近蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正电荷不多，沉淀减少。3 4.7 + 达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。4 3.5 + 大于蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正电荷大于负电荷，产生较少沉淀。（二）蛋白质的盐析 1蛋白质的盐析现 象 解 释。

11、实验项目一、蛋白质的等电点测定及沉淀反应 姓 名： 指导教师： 实验室： 组员：成绩： 第三部分：实验记录与分析 实验现象记录及分析： （一）蛋白质等电点测定 管号 pH值 混浊度 解释现象 1 5.9 - 未达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上 正负电荷过少。 2 5.5 + 接近蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正 电荷不多，沉淀减少。 3 4.7 + 达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正 负电荷。