5.1 DNA的粗提取与鉴定,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1.提取生物大分子的基本思路,选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2.提取DNA的基本思路,提取DNA,去除其他成分 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等 在物理和化学性质方面的差异, DNA的溶解性,D
5-1DNA的粗提取与鉴定 课件Tag内容描述:
1、5.1 DNA的粗提取与鉴定,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1.提取生物大分子的基本思路,选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2.提取DNA的基本思路,提取DNA,去除其他成分 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等 在物理和化学性质方面的差异, DNA的溶解性,DNA和蛋白质等成分 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点, 选择适当的盐浓度 就能使DNA充分溶解, 而使杂质沉淀;,或者让其他成分溶解, DNA析出,3.DNA等大分子的理化性质, DNA不溶于酒精溶液, DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,DNA不溶于酒精溶液, 。
2、复习巩固: (1)如何观察DNA和RNA在真核细胞中的分布情况? (2)真核细胞DNA的主要存在场所? (3)证明DNA是遗传物质的三个经典实验? (4)DNA分子双螺旋结构模型的提出者是谁? (5)DNA分子双螺旋结构模型的主要特点?,1、DNA分子由两条链组成,这两条链按反向平行的方式盘旋成双螺旋结构.,2、DNA分子中的磷酸和脱氧核糖交替连接.排列在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧.,3、DNA分子两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对.,专题5,DNA和蛋白质技术,课题1,DNA的粗提取和鉴定,1、你所知道的生物大分子有哪些?,2、如何来提取生物大分子?,3、提取DNA的基本。
3、DNA的粗提取与鉴定,基础知识回顾,(一),实验材料的选取,实 验 设 计,(二),破碎细胞,(三),过滤,获取含DNA的滤液,(四),去除滤液中的杂质,(五),析出DNA,(六),鉴定,完善实验设计,(一)实验材料的选取 取材原则:凡含有DNA的生物材料都可考虑,但选用DNA含量相对较高的生物组织,成功率更大。,从操作性、成功率等方面综合考虑,以下的实验材料中,你打算选用什么?并说出原因。,小组讨论,(二)破碎细胞(研磨),实验材料是植物细胞,需先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分搅拌和研。
4、5.1 DNA的粗提取与鉴定,一、基础知识,(一)提取DNA的方法,1.提取生物大分子的基本思路,选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2.提取DNA的基本思路,根据DNA、蛋白质、RNA等生物大分子理化性质的差异,提取DNA,去除其他成分, DNA的溶解性,DNA和蛋白质等成分 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点, 选择适当的盐浓度 就能使DNA充分溶解, 而使杂质沉淀;,或者让其他成分溶解, DNA析出,3.DNA等大分子的理化性质, DNA不溶于酒精溶液, DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,DNA不溶于酒精溶液, 但细胞中。
5、固定化酵母细胞和传统发酵法生产啤酒的比较研究,第四组:植保1002 周鑫动医1104 赵帝 食工1103 魏海涛 应化1101 万宣宣,前言,随着生物工程技术的发展,固定化酵母细胞发酵生产啤酒是当前啤酒生产的重大改革和发展方向。固定化细胞具有生长快,可连续使用的特点。越来越广泛的应用于发酵工业中,同时可实现可连续化生产,提高产品的转化率。所以,固定化酵母细胞与传统发酵法生产啤酒的比较有很重要的意义。,麦芽汁的选择,由于人工制作麦芽汁比较辛苦,本实验采用直接购买麦芽汁的方式。,实验原理,使用包埋法固定酵母菌细胞。 酵母菌在不同。
6、讨论2:如何证明他们是遗传物质?,讨论3:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来?,讨论1:构成生物体的遗传物质是什么?,1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2、生物大分子 主要指蛋白质、酶和核酸,3、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分,(一)提取DNA的方法,(1)DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相。
7、专题5 DNA和蛋白质技术,DNA的粗提取与鉴定 多聚酶链式反应扩增DNA片段 血红蛋白的提取与分离,课题1 DNA的粗提取与鉴定,课题目标: 尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取; 了解DNA的理化性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。 课题重点 DNA的粗提取和鉴定方法。,本节问题:,1、DNA的粗提取和鉴定根据的原理是什么?,1)DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同。具体见P54图5-1。 2)利用DNA不溶于酒精但细胞中某些蛋白质溶于酒精的性质可使DNA与蛋白质分离得到初步纯化的DNA。 3)在沸水中DNA遇二苯胺呈现蓝色反应。,2、DNA。
8、专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定,栏目链接,栏目链接,DNA的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有效提取要求材料中的DNA尽可能少地降解。但用于生药真实性鉴别的药材在干燥、加工、贮藏等过程中均造成了DNA不同程度的降解,一般DNA的含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高,会干扰提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。,栏目链接,请思考: 1DNA是怎样提取的? 2DNA是怎样进行鉴定的?,栏目链接,栏目链接,1DN。
9、 【创新设计】 2014 届高中生物 5-1DNA 的粗提取与鉴定试题新人教 版选修 1 ( 时间: 30 分钟满分: 50 分 ) 考查知识点及角度 难度及题号 基础 中档 稍难 DNA粗提取原理 1、 4 DNA粗提取操作步骤 2、 3、6 8 DNA鉴定 5 7 一、选择题 ( 每小题 4 分,共 20 分 ) 1在“ DNA的粗提取与鉴定”实验中,不是其。
10、复习巩固: (1)如何观察DNA和RNA在真核细胞中的分布情况? (2)真核细胞DNA的主要存在场所? (3)证明DNA是遗传物质的三个经典实验? (4)DNA分子双螺旋结构模型的提出者是谁? (5)DNA分子双螺旋结构模型的主要特点?,1、DNA分子由两条链组成,这两条链按反向平行的方式盘旋成双螺旋结构.,2、DNA分子中的磷酸和脱氧核糖交替连接.排列在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧.,3、DNA分子两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对.,专题5,DNA和蛋白质技术,课题1,DNA的粗提取和鉴定,1、你所知道的生物大分子有哪些?,2、如何来提取生物大分子?,3、提取DNA的基本。
11、DNA粗提取与鉴定,学习目标 知识目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。,1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同, 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解蛋白质,使提取出。
12、,讨论: 1.构成生物体的遗传物质是什么? 2.细胞滤液中又哪些成分? 3.怎样才能将细胞内的这些物质分离出来?,提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分,1.DNA在NaCl溶液中的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?,如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液。
13、DNA的粗提取与鉴定,实验思路,DNA的提取和鉴定,DNA从哪儿提取?,怎样将DNA与 细胞中的其他 物质分离?,怎样鉴定 我们提取 的DNA?,内容解析,基础知识,DNA的物理化学性质,如何利用DNA的物理化学性质提取和鉴定DNA?,思考:,1.洗涤剂能溶解细胞膜,但不会破坏DNA,将DNA从细胞中提取出来,2、当氯化钠的物质的量浓度为 2 molL时,DNA的溶解度最大,浓度为 014 molL时,DNA的溶解度最低。,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出,3、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。,可以将DNA与蛋白质进一步分离,4、DNA与二苯胺在沸水浴条件下。
14、本课时栏目开关,第13课时,本课时栏目开关,知识储备区,第13课时,细胞核,线粒体,丢失,皱缩,吸收,膨胀直至涨破,本课时栏目开关,知识储备区,第13课时,本课时栏目开关,知识储备区,第13课时,本课时栏目开关,学习探究区,第13课时,降低,最小,增大,本课时栏目开关,学习探究区,第13课时,不溶于,溶于,本课时栏目开关,学习探究区,第13课时,二苯胺,蓝,本课时栏目开关,学习探究区,第13课时,。
15、粗提取与鉴定,DNA,材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。,实验材料的选取,原则上,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是,选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大,鸡是真核生物,真核生物的DNA主要在染色体上。 鸟类的血细胞核大,DNA多 不需要破除细胞壁问题:鸡血细胞液在取材之后,到实验前,是否需要特殊处理吗? 柠檬酸钠抗凝,问题:鸡血细胞虽然没有细胞壁,但是依然有细胞膜,以你所学的知识,有什么比较简便但是可行的方法可以破碎细胞膜?,一、提取血细胞。
16、DNA的粗提取与鉴定,讨论2:如何证明他们是遗传物质?,讨论3:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来?,讨论1:构成生物体的遗传物质是什么?,1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2、生物大分子 主要指蛋白质、酶和核酸,3、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分,(一)提取DNA的方法,实验原理,1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 molL时,DNA的溶解度最低。利。
17、课题1 DNA的粗提取与鉴定,课程标准 本课题在课标中没有明确要求,但本部分内容与PCR技术和蛋白质的提取有一定联系。 课标解读 1.了解DNA分子的理化性质。 2.理解DNA粗提取与鉴定的原理。 3.掌握DNA粗提取技术。,1提取生物大分子的基本思路选用一定的 或 方法分离具有不同 的生物大分子。 2提取DNA的思路:利用DNA与 、 和 等在 和 性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。,提取DNA的方法,物理,化学,物理或化学性质,RNA,蛋白质,脂质,物理,化学,3原理(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 溶液中溶解度不同。利用这一特点,选择适当的 就。