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生物工程题库.doc

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资源描述

1、选择题1、对于气升环流式反应器:AA导流筒区的混合较还隙区好和溶氧较还隙区差B导流筒区的混合较还隙区差和溶氧较还隙区好C导流筒区的混合和溶氧均较还隙区好D导流筒区的混合和溶氧均较还隙区差2、在设计啤酒发酵罐时,当发酵罐的工作压力为 2kg/cm2时,则设计压力为 BA. 2 kg/cm2B2.2 kg/cm 2C. 2.5 kg/cm2D3 kg/cm 23、同样容积的啤酒发酵罐造价最便宜的是 BA.锥形罐B.联合罐C.朝日罐 D.塔式罐4、在塔式啤酒连续发酵中,酵母生长主要在 AA.底部稳定区域B不稳定区C.搅动区D静止区5、圆筒锥底啤酒发酵罐中发酵液的对流主要依靠:DA.搅拌 B.空气 C

2、.温度变化 D. CO26、与啤酒发酵醪进行热交换时,圆筒锥底啤酒发酵罐的夹套内不宜采用的冷媒是:CA.乙二醇 B.乙醇 C.冷冻水D.氨7、下列反应器形式中,不适用于植物细胞培养的是:CA 机械搅拌式反应器B 气升式反应器 C 微载体反应器 D中空纤维细胞培养反应器8、下列动物细胞反应器中,即可培养悬浮生长细胞,又可培养贴壁依赖性细胞 CD 通气搅拌式反应器E 气升式反应器 F 中空纤维细胞培养反应器D微载体反应器9、还不能实现在线检测的参数是:DA.发酵尾气中的氧气 B.发酵尾气中的二氧化碳 C.发酵液中的氧D.发酵液中的细胞浓度10、下列关于滤饼比阻叙述正确的是:CA.加入助滤剂易使细小

3、的胶体粒子“架桥”长大,形成大孔径的滤饼层,从而使滤饼比阻降低B. 加入絮凝剂,降低了滤饼层的可压缩性,使弯曲因子变小,从而使滤饼比阻降低C. 滤饼比阻与单位面积滤饼层上毛细孔数目成反比。D滤饼比阻与滤饼层毛细孔直径成反比11、下列关于过滤速率叙述不正确的是:DA. 过滤速率与过滤压差成正比B. 过滤速率与过滤面积成正比C. 过滤速率与滤液黏度成反比D. 过滤速率与滤饼比阻力成反比12、反映离心机分离的重要指标是:CA.转速 B.转鼓直径 C.离心分离因数 D.操作体积13、当一台离心机转速达到 10000rpm 时 DA .可用于大肠杆菌发酵液的澄清B. 不可用于大肠杆菌发酵液的澄清C. 可

4、用于大肠杆菌发酵液的浓缩D. 不确定14、BMY 型压滤机表示该设备是 CA. 明流、液压厢式压滤机B. 暗流、液压厢式压滤机C. 明流、液压板框压滤机D. 暗流、液压板框压滤机15、将发酵液加水后,降低了发酵液中固形物的浓度及其发酵液的黏度,从而使发酵液的过滤速度 DA. 提高B. 降低C. 相等D. 不确定16、对于黏度大、固含物高的料液,适合采用下列哪种形式的膜分离设备 BA.板式膜过滤器 B.管式膜过滤器C.中空纤维式膜分离器D.螺旋卷式膜分离器17、萃取浓度高的萃取方式是 CA. 单级萃取B. 多级错流萃取C. 多级逆流萃取D. 先错流萃取,后逆流萃取18、下图是一台多级离心萃取机,

5、正确的叙述是:CA. A 是重液出口,B 是重液入口,C 是轻液入口,D 是轻液出口B. A 是轻液出口,B 是轻液入口,C 是重液入口,D 是重液出口C. A 是重液出口,B 是轻液入口,C 是重液入口,D 是轻液出口D. A 是重液入口,B 是轻液出口,C 是重液出口,D 是轻液入口19、下图是一台 ABE-216 立式连续离心萃取机轻重液流向示意图,下列叙述正确的是:AA. A 是轻液出口,B 是重液出口,C 是重液入口,D 是轻液入口B. A 是重液出口,B 是轻液出口,C 是轻液入口,D 是重液入口C. A 是重液出口,B 是轻液入口,C 是重液入口,D 是轻液出口D. A 是重液入

6、口,B 是轻液出口,C 是重液出口,D 是轻液入口20、反吸附离子交换时,其树脂的饱和度要比正吸附 BA. 高B. 低C. 相等D. 不确定21、下列那个因素会导致升膜式真空蒸发浓缩设备在浓缩过程中产生“干壁”现象。BA. 料液黏度太小 B. 传热温度差过高 C. 气流速度过低 D. 蒸发浓缩倍数不高22、升膜式真空蒸发浓缩设备中, “爬膜”产生的必要条件是:BA. 足够高的传热温度B. 足够的传热温差和强度C. 足够的料液流速D. 足够的传热面积23、不适用于浓缩较高黏度物料的蒸发器是 AA. 升膜式真空蒸发器 B. 降膜式真空蒸发器C. 刮板式真空蒸发器D. 离心式薄膜蒸发器24、降膜式真

7、空蒸发器成膜的关键是:BA. 料液流速 B. 料液的分配C. 传热温度D. 二次蒸汽的流速25、提高内部扩散控制的干燥速率主要措施有:AA. 减小物料颗粒大小B. 改善空气与物料之间的流动和接触状况 C. 提高干燥室的真空度D.降低空气湿度26、降速干燥阶段的干燥速度主要取决于:DA. 空气温度 B. 空气湿度 C. 空气流速 D. 物料本身特性27、流化床干燥时引起“沟流”的主要原因 CA. 固体颗粒大小相差较大B. 孔板孔径太大C. 气体分布不良D. 物料黏度太小28、生产上,沸腾造粒最理想的情况是:BA. 自我成粒 B. 涂布成粒C. 粘结成粒D. 结晶成粒29、冷冻干燥设备的最大生产能

8、力由:CA .最低冷冻温度决定B. 最大真空度决定C. 冷凝器最大负霜量决定D. 干燥室最大传热面积决定30、实现真空冷冻干燥的必要条件是:BA .干燥过程的压力高于操作温度下冰的饱和蒸汽压B. 干燥过程的压力低于操作温度下冰的饱和蒸汽压C. 干燥过程的压力等于操作温度下冰的饱和蒸汽压D. 干燥过程的压力为操作温度下冰的饱和蒸汽压 1/231、下列塔板中,不设溢流管的塔板有:CA. 泡罩塔板 B. SD 形塔板 C. 浮阀波纹筛板 D. 斜孔板32、在常压酒精-水蒸馏系统中,当酒精蒸汽组成与液体组成相等时此点的沸点:BA. 最高B. 最低C. 等于水的沸点D. 等于酒精的沸点33、好气性发酵工

9、厂,为确保安全,在无菌空气进入发酵罐之前:CA.应该安装截止阀B.应该安装安全阀C.应该安装止回阀D.不应该安任何阀门34、在发酵设备管道或阀门上常常安装有一个旋塞阀作“小辫子”用,下列“小辫子”不具有的作用是:BA.在启动蒸汽管道时,小排汽阀可先排除蒸汽里的冷凝水,确保蒸汽干燥。B.调节管道中的蒸汽压力。C.在蒸汽管道中,关闭蒸汽阀后,打开两个蒸汽阀间的小排汽阀即可防止因蒸汽阀泄漏,又可防止冷凝水进入无菌系统造成染菌。D.使蒸汽在设备、管道中有进有出成“活蒸汽”而流动通畅,保证灭菌彻底。35、发酵管路系统中的“小辫子”作用是 CA分流蒸汽以缓解蒸汽压力 B分流空气以缓解空气压力C形成活蒸汽以

10、消除死角 D在管道上起到疏水的作用填空题1、下图是 具有外循环冷却的气升环流式 反应器。其中 8 是该设备的 热交换器 结构。2、下图是 文氏管自吸式 反应器。其中6是该设备的 文氏管 结构。3、液气比R是气升式反应器的重要工艺参数,所谓液气比就是 发酵液循环流量 与 通风量 之比。4、密闭式啤酒发酵罐操作时罐内会产生真空,对设备造成破坏,设备应设防止真空的装置,真空产生的原因是 放料速度快,造成一定的负压_和 罐内残存的CO2在清洗时被除去 _。5、目前,投入啤酒生产的连续发酵方法主要有_塔式连续发酵_和_多罐式连续发酵_。6、新型啤酒发酵罐主要有 圆筒锥底发酵罐、 联合罐和 朝日罐。7、大

11、型啤酒发酵罐的清洗一般采用 CIP系统 。8、某酒精工厂,每发酵罐、的进料量为 24t/h,每 4h 装满一罐,糖化醪密度为 1075 Kg/m3,装料系数为 0.9, 计算此发酵罐的全体积约为 99 m 39、啤酒发酵罐中发酵液的对流主要是依靠其中 CO2 的作用,另外冷却操作时啤酒 温度 的变化也会引起罐的内容物的对流循环。10、设计压力容器时,所指的设计压力是_设备最大的承受压力_,最高工作压力是_设备一般工作时所达到的最高压力_,设计压力通常取_1.1 倍_最高工作压力。11、CIP清洗系统是Clean In Place的简称,即 内部清洗系统 ,进行大罐清洗工作的关键设备是 喷嘴 。

12、13、固定化植物细胞生物反应器有 , 和 。14、下图是Gelligen动物细胞培养反应器,其中A是 管式搅拌器 。A15、悬浮培养适用于非贴壁依赖型细胞,贴壁培养适用于贴壁依赖型细胞。除此之外还有一种 包埋 培养对两类细胞都适用。(固定化)?16、动物细胞培养的操作方式有_分批式_、_流加式_、_半连续式_、_连续式_、_灌注式_。17、生物反应检测仪器的基本构成是 传感器 、 信号转换 、 信号放大 和 输出显示 。18、常用于溶氧测定的电极是_覆膜溶氧电极_。19、常用于检测发酵尾气中O 2和CO 2的仪器分别为_磁氧分析仪_和_红外线CO2分析仪_。20、下图是微生物发酵的 温度 控制

13、系统,图中标示 1、2、3 分别是该系统的 温度传感变送器 、 温度管制器 和 调节阀 。21、下图是微生物发酵的 PH 控制系统,图中标示 1、2、3 分别是该系统的 PH 测量电极和变送器 、控制器 和 空气开关 。22、酒精厂以玉米粮食为原料的生产中需要 粗选机 、 除铁器 等设备对原料进行预处理。?23、啤酒厂生产麦芽汁多采用四器组合,四器为糊化锅 、 糖化锅 、 过滤槽 、 沸煮锅 糊化锅的作用是 加热煮沸辅助原料和部分麦芽液 。24、锤式粉碎机的作用力主要为 冲击力 。25、为了提高对物料的剪切力,有许多辊式粉碎机,常将两个辊子的转速设计成有一定的 转速差 。26、过滤速率与_过滤

14、面积_和_过滤压差_成正比,而与_滤液黏度_成反比。27、按过滤推动力可将过滤设备分为 常压过滤机、 加压 和 真空 。28、过滤操作条件优化包括 改善悬液的物理性质 和 优化操作条件 。29、对发酵液进行加热处理可提高过滤速度的原因是 降低滤液黏度 和 使蛋白质变性 。30、板框过滤时,滤液的引出方式有明流和暗流之分,明流是指 从每一滤板下方直接引出的滤液 ,暗流是指 集中在末端出口流出的滤液 。31、BAY型压滤机中,符号B表示该压滤机是 板框式压滤机 ,A表示 暗流 ,Y表示 液压压紧 。32、下图是 转筒真空过滤机 设备结构操作过程图,其中A为 过滤区 区域,B为 洗涤吸干区 区域,C

15、为 卸渣区 区域,D为 再生区 区域。33、离心机分离因数是反映离心机分离能力的重要指标,它是指_离心力_与_重力_的比值,其大小与离心机的_转速_和_转鼓直径_有关。现在的离心机分离因数很高,通常是用_提高转速_的方法来提高分离因数。34、离心分离设备分两类,分别是 过滤式离心设备 和 沉降式离心分离设备 。35、碟式离心机分离乳浊液,重液向 周围 流出,轻液向 中间 流出。36、膜分离过程的实质是 小分子物质透过膜 。37、目前膜分离设备主要有_板式膜过滤器_、 _中空纤维式膜分离器_ _、_管式膜过滤器_、 _螺旋卷式膜分离器_ _这 4 种形式。38、萃取操作中,用于两液相混合的设备有

16、_混合罐_、_混合管_、_喷射萃取器_及泵等。39、液-液萃取设备应包括 3 个部分: 混合设备 、 分离设备 和溶剂回收设备。40、二氧化碳超临界萃取设备的基本组成有 压缩机 、 CO2 循环泵 、 萃取釜 和 冷水机 。41、升膜式真空蒸发浓缩设备溶液在加热管中产生爬膜的必要条件是要有足够的_传热温差_和_传热强度_。42、升膜式真空蒸发器正常操作的关键是 让物料在管壁上形成连续不断的液膜 。43、为了保证蒸发过程的顺利进行,必须做到_供应足够的热量维持蒸发温度,补充汽化带走的温度_、_提供足够的蒸发表面积,以保证热量传递_、_保证溶剂蒸汽迅速排除_。44、结晶设备应有 搅拌 装置,使结晶

17、颗粒保持悬浮于溶液中,并同溶液有一个相对运动,以成薄晶体外部境界膜的厚度,提高溶质质点的扩散速度,加速晶体长大。对于煮晶锅多采用锚式搅拌器 ,立式结晶箱多采用 ,卧式结晶箱多采用 。45、结晶设备根据方法不同可分为_浓缩结晶设备_、_冷却_和_等电点_。46、结晶操作时,起晶方法有_自然起晶_、_刺激起晶法_、_晶种起晶法_。47、生物工业中常用的瞬时快速干燥方法有_滚筒_、_喷雾_、_气流_和_沸腾_。低温干燥有_真空_和_冷冻_。48、干燥过程包括 恒速 和 降速 两个阶段。49、在干燥过程中,恒速干燥阶段又称为_表面汽化控制_阶段,降速干燥阶段又称为_内部扩散控制_阶段。50、喷雾干燥时

18、,液料的雾化方式有三种,分别是_压力式_、_气流式_和_离心式_。51、沸腾造粒干燥过程中,影响产品颗粒大小的因素有_停留时间_、_摩擦作用_和_干燥温度_。52、在长管气流干燥系统中,为了充分利用气流干燥中颗粒加速段较强的传热传质作用,可把该长管设计成 管径交替缩小与扩大的脉冲式气流干燥管 。53、冷冻干燥系统主要由 4 部分组成,即 冷冻装置 、 真空 、 水汽除去 和 加热部分 。54、冷冻干燥分为 升华干燥 和 解析干燥 两个阶段。55、三塔式酒精蒸馏流程是由_粗馏塔_、_分馏_、_精馏_三 个塔组成。56、维持精馏操作连续稳定的必要条件是 塔顶液相回流和塔釜上升蒸气流动动态平衡 。5

19、7、分子蒸馏实施应满足的两个条件是 轻重分子的平均自由程必须有差异,且差异越来越好 和 蒸发面和冷凝面的间距必须小于转分子的平均自由程 。58、在空气精过滤与发酵罐之间,为防止发酵液倒流一般要安装 。是非题1、外循环气升式发酵罐的优点之一是无需空气过滤净化系统。2、对于气升环流式反应器导流筒区的混合和溶氧较还隙区好。Y3、新型啤酒发酵罐有圆筒体锥低发酵罐、联合罐和朝日罐,同样容积的发酵罐按 m2/100L计算造价,最便宜的是联合罐。Y4、圆筒锥底啤酒发酵罐的夹套内可用冷冻水与啤酒发酵醪进行热交换。5、圆筒锥底啤酒发酵罐中发酵液的对流主要依靠温度变化。6、联合罐在发酵生产上的用途与锥形罐相同,既

20、可用于前、后发酵,也能用于多罐法及一罐法生产。Y7、APV 发酵塔采用的是上面酵母。8、下图是糖蜜质原料制酒精连续发酵流程。9、用微载体系统大规模培养动物细胞具有单层培养和悬浮培养的优势,且为均相培养。Y10、灌注式动物细胞培养是指将细胞种子和培养液一起加入反应器内进行培养,一方面新鲜培养液不断加入反应器内,另一方面又将反应液连续不断取出,使细胞处于一种不断的营养状态。11、与微生物细胞相比,植物细胞培养的所需溶氧系数 kLa 要低得多。Y12、工业发酵中常采用的是覆膜溶氧电极。Y13、发酵过程中,尾气中的二氧化碳浓度是不可在线测定。14、增大毛细孔的直径、减少弯曲因子有助于降低滤饼比阻力。

21、Y15、在过滤操作时,过滤速率与过滤面积和过滤压差成正比与滤饼比阻力成反比。?16、根据过滤微分方程,过滤速度与过滤压差成正比,因而提高过滤压差就可提高发酵液的过滤速度。?17、将发酵液加水后,降低了发酵液中固形物的浓度及其发酵液的黏度,从而使发酵液的过滤速度得到提高。18、添加助滤剂相应地改变了滤饼结构,滤饼可压缩性下降了,弯曲因子降低,从而降低了过滤阻力。Y19、对于滤液需保持无菌,不与空气接触的发酵液过滤处理,宜选择明流式板框压滤机。20、离心分离因数或是离心加速度与重力加速度之比。Y21、离心机的转速是反映离心机分离能力的重要指标。22、当一台离心机转速达到 10000rpm 时,可用

22、于大肠杆菌发酵液的澄清。23、当一台离心机分离因数达到 50000 时,可用于大肠杆菌发酵液的澄清。Y24、GF 型管式离心机可用于发酵液的澄清操作。25、GQ 型管式离心机可用于发酵液的澄清操作。Y26、管式离心机转筒中的三翼挡板的作用是避免料液产生漩涡。27、管式离心机转筒中的三翼挡板的作用是使料液获得与转筒一样的加速度。Y28、碟式离心机碟片的作用是缩短固体颗粒(或液滴)的沉降距离、扩大转鼓的沉降面积,转鼓中由于安装了碟片而大大提高了分离机的生产能力。Y29、反吸附离子交换时,其树脂的饱和度要比正吸附高。30、工业上萃取设备一般是按多级逆流萃取的流程来设计。Y31、工业上萃取设备一般是按

23、多级错流萃取的流程来设计。32、升膜式真空蒸发浓缩设备中, “爬膜”产生的必要条件是足够的传热面积。33、料液黏度太小会导致升膜式真空蒸发浓缩设备在浓缩过程中产生“干壁”现象。34、升膜式蒸发器正常操作的关键是让液体物料在管壁上形成连续不断的液膜。Y35、工业结晶时,要避免自然起晶的操作。Y36、降膜式真空蒸发器成膜的关键是料液的流速。37、降膜式真空蒸发器成膜的关键是料液的分配。Y38、提高表面汽化控制的干燥速率主要措施有提高干燥温度、改善空气与物料之间的流动和接触状况以及降低空气湿度。Y39、提高内部扩散控制的干燥速率主要措施有提高干燥温度、改善空气与物料之间的流动和接触状况以及降低空气湿

24、度。40、在长管气流干燥系统中,为了充分利用气流干燥中颗粒加速段较强的传热传质作用,可把该长管设计成脉冲式气流干燥管。Y41、进行沸腾造粒干燥生产时,以自我造粒形成的产品,质量最好。42、采用双级制冷压缩机系统,以氨为制冷剂,最低温度可达-70。43、冷冻干燥设备的最大生产能力由干燥室最大传热面积决定。44、冷冻干燥设备的最大生产能力由冷阱的最大负霜量决定的。Y45、具有恒沸点的酒精水溶液不可能用普通的常压(大气压)蒸馏方法得到无水酒精。Y46、粗馏是将分离挥发性相差不大,且要求将组分完全分开。47、混合溶液在沸点下汽化时,所产生的蒸汽中易挥发的酒精组分的含量比在原混合液中多。Y48、采用减压

25、蒸馏的方法,可以得到高于 96 度的酒精或无水酒精。Y49、下图是不正确的发酵罐取样口布管。50、下图是正确的下出料口布管。51、空气进罐的最后一个阀门往往采用安全阀,这是防止由于操作失误造成的发酵液倒流入空气过滤系统。问答题1、 画出机械搅拌式生物反应器的结构简图,标出各部件的名称,并分别阐述其作用。a) 主要部件:1.罐体,盛发酵液,发酵场所;2.搅拌器:混合液体和传质;3.挡板:防治液面中央形成漩涡流动,增强其湍动和溶氧传质;4.轴封:防止染菌和泄露;5.空气分布器:分布空气;6.消泡装置:防止发酵液随气泡外溢 7.夹套:冷却图见 p232、 根据气液传质理论,提出机械搅拌通风发酵罐增加

26、氧传递速率的措施。答:由 OTR=Kla(C-C)可知增大 Kla 或增大(C-C)来增加氧传递速率增大(C-C)的方法:1.提高罐压 2.富集氧气由 Kla=K(Pg/VL)0.4Vs n0.5 可知增大 Kla 的方法:1.提高转速或增大搅拌叶轮直径,从而提高搅拌功率 Pg;2.提高通气量;3.提高发酵罐的高径比,对提高溶氧速率和降低单位溶解氧功耗均有利,所以在设计时,应尽可能选择较大的高径比。3、 气升式发酵罐的工作原理。工作原理:把无菌空气通过喷嘴或喷孔射进发酵液中,通过气液混合物的湍流作用而使空气泡分割细碎,同时由于形成的气液混合物密度降低,故向上运动,而含气率小的发酵液则下沉,形成

27、循环流动,实现混合与溶氧传质4、 机械搅拌自吸式的工作原理。工作原理:自吸式机械搅拌发酵罐的主要构件是吸气搅拌叶轮及导轮,简称转子及定子,当转子转动时,其框内液体被甩出而形成真空而吸入空气。通过导向叶轮而使气液均匀分布甩出,并使空气在循环的发酵液中分裂成细微的气泡,在湍流状态下混合、湍动和扩散5、 判断下图为何种生物反应器并标明图中 6 的名称,以及请简述该生物反应器工作原理。文氏管自吸式发酵罐 见 p481-排管 2-罐体 3-换热夹套 4-循环泵 5-压力表 6-文氏管工作原理:用泵使发酵液通过文氏管吸气装置,由于液体在文氏管的收缩段中流速增加,形成真空而将空气吸入,并使气泡分散,与液体均

28、匀混合,实现溶氧传质6、下图为一啤酒发酵生产系统,请指出图中 1、3、5 各为何设备,并简述该生产工艺的特点。1-薄板换热器 3-酵母离心机 5-朝日罐特点:1.三种设备互相组合,解决了前、后发酵温度控制和酵母浓度的控制问题,加速了啤酒的成熟。2.使用酵母离心机分离发酵液的酵母,可以解决酵母沉淀慢的缺点3.利用凝聚性弱的酵母进行发酵,增加酵母与发酵液接触时间,促进发酵液中乙醛和双乙酰的还原,减少其含量。7、 试述啤酒塔式连续发酵流程。塔式连续发酵时,分批加入经处理过的无菌麦汁,麦汁在塔内边上升边发酵,直至满塔为止。培养并使其达到要求的酵母浓度梯度后,用泵连续加入麦汁。在发酵过程中,须经常丛塔底

29、通入 CO,以保持酵母柱的疏松度。流出的嫩啤酒,经过酵母分离器后,再经薄板换热器冷却至-1 ,然后送入贮酒罐内,经过充 CO2 后,贮存 4d,即可过滤包装出厂 8、 简述植物细胞培养的特点以及常用的培养器的类型及优缺点。1.植物细胞培养液的黏度随细胞浓度的增加而显著上升 2.在 kla 值高的操作条件通入一定量的 CO2 对细胞量的增大时有效的优点 缺点机械搅拌时反应器适用于许多细胞的培养中,而且也具有反应器内的温度、pH、 溶氧及营养物浓度较其他反应器更易控制由于剪切力大。易对植物细胞造成较大损伤,对次级代谢产物的合成也会产生影响非机械搅拌时反应器由于没有活动的搅拌装置,剪切力小,对细胞损

30、伤小,而且容易实现长期无菌培养操作弹性小,低气速时尤其在培养后期植物细胞密度较高时,混合效果较差。如果 提高通气量,又会产生大量泡沫,严重影响植物细胞的生长。此外,对这类反应器缺乏足够的经验,放大过程也不如机械搅拌式反应器成熟填充床反应器可以消除或极大地减弱流质流动引起的切变力混合效率低,使必要的氧传递、pH 值、温度的控制和产物的排泄很困难;填充床中颗粒或支持物的破碎会阻塞液体流动;用于固定的胶粒在高压下容易变形,会导致填充床阻塞。流化床反应器混合程度高,传质传热效果好 剪切力和颗粒碰撞会破坏固定化细胞;流体动力学复杂使其放大困难膜反应器可以维持较高的细胞浓度。同时又可以将细胞产物不断地从反

31、应体系中分离出去(对于胞外产物),降低了产物的反馈抑制,提高了这种反应器的传质效率低,同样具有容易堵塞的问题,而且投资较大生产效率。9、 请简述通气搅拌式、气升式、中空纤维、微囊、大载体和微载体动物细胞培养反应器的原理和特点。原理 特点通气搅拌式气液在由丝网制成的通气腔内实现;而在鼓泡通气过程中所产生的泡沫经管道进入液面上部的由丝网制成的消泡腔内,泡沫经钢丝网破碎分成气、液两部分,避免在向培养基通气时损伤细胞优点:流体混合好,剪切力小,能较好适合悬浮和微载体系统培养动物细胞的要求。缺点:溶氧系数小,不能满足高密度细胞的耗氧要求;气路系统不能就地灭菌气升式通过直接喷射空气供氧 1. 没有移动部件

32、,细胞损伤率比较低;2完全密封;3 便于无菌操作;4 不易污染;5 设计简单;6 氧的转换率高中空纤维中空纤维是用聚矾或聚丙烯制成。管壁薄,是半透膜,一个培养筒内由数千根中空纤维组成纤维管内为“内室” ,可灌流无血清培养液供细胞生长,管间隙为“外室” ,接种细胞就贴附于“外室”的管壁上,并吸取从“内室”渗透来的营养,迅速生长繁殖。优点:培养器体积小,细胞高密度生长;浓缩产品;产物纯度高;自动化程度高,生长周期长缺点:成本高微囊把生物活性物质、完整的活细胞或组织包在薄的半透膜中优点:细胞密度大;产物单位体积浓度高 ;分离纯化操作经济方便 ;抗体活性、纯度高缺点:成功率低,培养液用量大,囊内的部分

33、死亡细胞造成产物的污染大载体大载体是由海藻酸钠构成。海藻酸钠含有重复排列的葡糖醛酸和甘露糖醛酸,在钙溶液中形成适宜于附着的网络状凝胶珠。在收集细胞时,可用 EDTA 和柠檬酸钠使细胞从凝胶中分离出来优点:操作控制方便,可随机取样检测;附着细胞密度高;消耗用品价格低廉,产物收获量大,有明显的经济效益缺点:不具有细胞分泌产物的浓缩装置微 细胞吸附于一种特殊的支撑材料一微载体 优点:兼有单层培养和悬浮培养的优势,载体的表面,从而在搅拌条件下得以在培养液中进行悬浮培养并最终长成单层的细胞培养系统且为均相培养;细胞所处环境均一,放大容易;环境条件(温度、pH、CO2、DO等)容易测量;比表面积大,单位体

34、积培养液的细胞产率高;培养操作可系统化、自动化,减少了污染机会细胞和培养液易于分离。缺点:搅拌浆及微珠间的碰撞易损伤细胞;接种密度高;微载体吸附力弱,不适合培养悬浮型细胞。不能移种操作10、对于发酵生物反应系统中需控制的主要参变量有哪些?分别采取何种方法或仪器进行检测?这些需控制的参变量与生物反应效能有何相关对应?参变量检测方法或仪器 对应关系温度 温度计、热电偶、热敏电阻及金属电阻温度计影响各种酶反应的速率和蛋白质的性质;温度的变化会影响发酵液的物理性质压力 隔膜式压力计 保持正压以防上外界空气中的杂菌侵入而造成污染;发酵罐操作压力的变化,会影响溶解氧浓度和溶解的二氧化碳浓度的变化,从而进步

35、影响菌体生长与代谢。黏度 毛细管黏度计、回转式黏度汁、涡轮旋转式黏度计、振动式黏度传感仪,间歇取样罐外测量发酵液黏度黏度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项指标,同时也能反映发酵罐中菌丝降解过程的情况,了解黏度随培养时间而变化的规律,对发酵工艺调控是很有益的。另外,从发酵液黏度对发酵的影响看,随发酵液黏度的增加,不利于氧的传递,从而影响好氧发酵。浊度 采样后用常规比色计(固定波长)或分光光度计( 可变波长)测定能够及时反映单细胞的生长状况泡沫高度电导、电容传感器和压差传感器电容法、压差法泡沫过多时,发酵液上浮严重,造成大量逃液,发酵液从轴封或排气管路溢出而增加染菌机会等,严重时导致通气搅拌无法

36、进行,菌体呼吸受阻,最终造成代谢异常或菌体自溶pH pH 复合电极在线测定发酵液 pH不同微生物有各自的最适生长 pH 和最适生产 PH; pH 还影响细胞的结构和菌体对基质的利用速度,从而影响菌体的生长和产物的合成;pH 还影响细胞膜的电荷状况,引起膜透性发生改变,进而影响菌体对营养物质的吸收和代谢产物的形成等;pH 还对发酵液或代谢产物产生物理化学的影响溶解氧 覆膜溶氧电极 溶解氧低,好氧微生物的生长就要受到抑制;溶解氧的大小对菌体生长和产物的性质及产量都会产生不同的影响呼吸代谢参数排气 C02 浓度的测量:电导式、热导式和红外线式排气 O2 浓度的测量:电化学式(原电池)02 分析仪和顺

37、磁 02 分析仪两大类。有效的反映微生物代谢活性的指标生物质、底物和产物浓度实验室:在线激光浊度计、高压液相分析仪、流动注射分析仪工业:采用离线分析根据发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、糖浓度、氮浓度和产物浓度等的变化值,即可分别算出菌体的比生长速率、氧比消耗速率、糖比消耗速率、氮比消耗速率和产物比生产速率补料控制1.根据大量实验室的试验研究结果得出的补料轨迹来指导生产过程的补料(需靠经验) ;2.基于 CER 来控制补料速率,用化学平衡的方法调整补料量。使微生物得以沿着优化的生长轨迹生长,进而获得高效的产物。菌丝形态与菌体浓度菌丝形态观察常采用涂片镜检的方法。菌体浓度:全细胞浓度测定

38、:干重法(DCW) 、湿重法(WCW) 、浊度法(OD) 、体积法(PMV) 、血球板计数法、平板计数法(CFU)菌丝形态:其改变往往是生化代谢变化的反映。生产中,常以菌丝形态作为评判菌种质量、区分发酵阶段、控制发酵过程和决定发酵周期的依据之一11、请简述三种连续灭菌流程,并比较各流程优缺点。(1)连消塔加热的连续灭菌流程:待灭菌料液由连消泵送入连消塔底端,料液在此被加热蒸汽立即加热到灭菌温度 128132,由顶部流出,进入维持罐,维持 8-25min,后经喷淋冷却器冷却到生产温度进入发酵罐。(2)喷射加热的连续灭菌流程:培养液在指定的灭菌温度下逗留的时间由维持段管子的长度来保证。灭过菌的培养

39、基通过一膨胀阀进入真空冷却器而急速冷却。(3)薄板换热器的连续灭菌流程:培养液在设备中同时完成预热、加热灭菌、维持及冷却的RlrpFdV01过程。 优点 缺点连消塔加热的连续灭菌 能一次冷到发酵温度 用水量大喷射加热的连续灭菌 在更短时间内完成加热、冷却,且冷却水用量少 冷却只能冷到一定温度,需要在发酵罐中继续冷却,同时还会造成料液体积散失减少薄板换热器的连续灭菌 换热效率高,而且利用冷培养液作冷却剂,即冷却了热培养液,又预热了冷培养液,节约了用水和蒸汽 流程时间稍长12、根据基本过滤方程,试述强化过滤速度的措施。由 上式可知强化过滤速度的方法一、 降低滤饼比阻力 r0,可以从增大毛细孔的直径

40、或减少弯曲因子去降低1添加电解质、絮凝剂、凝固剂。这些物质能使悬浮的固形物质的粒度变大,硬度变高2添加助滤剂,改变了滤饼结构,滤饼可压缩性下降了3调节 pH。将 pH 调至滤液的等电点附近,使蛋白质积聚析出。或大幅度调节 pH,使蛋白质变性凝固4.加热。使蛋白质变性凝固二、降低滤液的黏度1)热处理能使蛋白质变性凝固,从而使过滤速度大提高。2、降低悬浮液中固形物的浓度三、提高过滤压力差 P13、请简述板框压滤机的结构和工作原理。结构:板框压滤机主要是由许多滤板和滤框间隔排列而成。板和框多做成正方形,角段均开有小孔,装合压紧后即构成供滤浆或洗涤水流通的孔道。框的两侧覆以滤布,滤板的两面制成沟槽,分

41、别与洗水孔道和滤出口相通。 工作原理:过滤时,悬浮液由离心泵或齿轮泵经滤浆通道打入框内,滤液穿过滤框两侧滤布,沿相邻滤板沟槽流至滤液出口,固体则被截留于框内形成滤饼。滤饼充满滤框后停止工作。14、请简述转筒真空过滤机的结构和工作原理。结构:由筛板组成的能转动的水平圆筒,表面为一层金属丝网,覆有滤布;圆筒内沿径向被筋板分隔成若干空间,每个空间都以单孔道通至筒轴颈端面的分配头,分配头内沿径向隔离成 3 室,分别与真空、压缩空气管路相通工作原理:圆筒内下部的空间与料液相接触,由于在这个区中的空间与真空管连通,于是滤液被吸入筒内并经导管和分配头排至滤液贮罐中,而固体粒子则被吸附在滤布的表面形成滤饼层。

42、当圆筒从从料浆槽中转出后,由喷嘴将洗涤水喷向圆筒面上的滤饼层进行洗涤,因此区也与真空道相通,于是洗涤水穿过滤饼层而被吸入筒内,并经分配头引至洗水贮罐中。经洗涤和脱水的滤饼层继续转进卸渣及再生区,这区与压缩空气管路连通,压缩空气从圆筒内向外穿过滤布而将滤饼层吹松,随后由刮刀将其刮除。刮掉滤饼后的滤布继续吹压缩空气,以吹净残余滤渣,使滤布再生15、什么是离心机的离心分离因数,根据离心分离因数的大小不同,离心机可分为几类?离心分离因数:离心力与重力的比值。或是离心加速度与重力加速度之比。普通离心机: f 5000016、试简述管式离心机和碟式离心机的工作原理。蝶式离心机的工作原理:当悬浮液在动压头的

43、作用下,经中心管流入高速旋转的碟片之间的间隙时,便产生了惯性离心力,其中密度较大的固体颗粒在离心力作用下向上层碟片的下表面运动,而后沿碟片下表面向转子周围下滑,液体则沿转子中心上升,从套管中排出,达到分离的目的。同理对于乳浊液的分离,轻液沿中心向上流动,重液沿周围向下流动而得到分离。管式离心机的工作原理:当待处理的物料在一定压力下由进料管经底部空心轴进入鼓底,靠圆形折转挡板分布开鼓的四周。为使液体不脱离鼓壁,在鼓内设有十字形挡板,液体在鼓内由挡板被加速到转鼓速度,在离心力场下,浮浊液(或悬浮液)沿轴向上流动的过程中被分层成轻液相和重液相(或液相和固相) ,并通过上方环流溢流口排出。处理悬浮液时

44、,可将管式离心机的重液口关闭,只留有中央轻液溢流口,固体在离心力场下沉积于鼓壁上。17、膜分离设备有哪几种形式?试比较它们的优缺点。优点 缺点板式膜过滤器保留体积小,操作费用低的压力降,液流稳定,比较成熟 。死体积较大,易漏,高固含量会堵塞进料液通道,拆卸比清洁管道更费时间管式膜过滤器易清洗,单根管子容易调换,无机组件可在高温下可用有机溶剂进行操作并可用化学试剂来消毒。适合黏度大、固含物高的料液。保留体积大,压力降大,单位体积中所含过滤面积较小。中空纤维式 保留体积小,单位体积中所含过滤 料液需要预处理,单根纤膜分离器 面积大,可以逆流操作,压力较低,设备投资低 。维损坏时,需调换整个组件。螺旋卷式膜分器设备投资很低,操作费用也低,单位体积中所含过滤面积大,换新膜容易。 料液需经预处理,流体阻力大、易污染、难清洗、液流不易控制 。18、叙述升膜式真空蒸发浓缩设备的原理和特点,并说明升膜式真空蒸发浓缩设备正常操作的关键是什么?原理:物料从加热器下部的进料管进入,在加热管内被加热蒸发拉成液膜,浓缩液在二次蒸汽带动下一起上升,从加热器上端沿气液分离器筒体的切线方向进入分离器,浓缩

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