1、空坐捡坠匡芏苤查!至!旦箜j!鲞箜!塑!也垦尘坠型!堕型!竺!：尘：!：堕!：!Kras、EGFR、BRAF基因突变检测及其应用研究进展孙艳丽 李金明【摘要】 大量与药物治疗效果相关基因的发现推动了个体化医学的发展，同时也使得个体化治疗基因检测的重要性彰显出来。本文对人VKiras2 Kirsten大鼠肉瘤基因(Kras)、表皮生长因子受体基因(EGFR)、鼠类肉瘤病毒菌癌同源物B1(BRAF)3个基因突变的检测及其与肿瘤治疗效果间的关系进行综述。r手华裣验医学杂志，2012，35：971977)【关键词】 原癌基因蛋白质类；Ras蛋白质类； 受体，表皮生长网子； 个体化医学； 突变Progr
2、ess in the detection of Kras，EGFR，BRAF mutations and its clinical application SUN Yanli+，LI Jinming+Graduate School，Peking Union Medical College，Chinese Academy of Medical Sciences，Belling 100730，ChinaCorresponding author：L1 Jinming，National Center for Clinical LaboratoriesMinstry Health of BeltingH
3、ospitalBeqing 100730，Chinn Email：打，n63hnyah00,，儿cn【Abstract】 Since a nulllll。r of genes have been discovered，which al-e associated with the effect ofdrug therapy，the developmetit of personalized medicine is enilancedMeanwhile，personalized test played animportant role in choosing ptope!medici neHerei
4、n，the status of detection ot Vkiras2 Kirsten rat sarcomaviral oncogene homolog(Kras)，epidermal growth factor receptor(EGFR)，BRaf an(t vRaf murine sarcomaviral oncogene homolog Bl(BRAF)mutation is concluded，nloreover，the assoeiatiun between the mutaliontest and the effect of cancer therapy is summari
5、zed(矾讯I，Lab Med，2012，35：971977)【Key words】ProtoOllCogene proteins； Ras proteins； Receptor，epidermal growth fattor；Personalized medicine； Mutation个体化医学(personalized medicine)最早由Gibson1提出，其意义是家庭医生独立行医的意思。现代意义的个体化医学的概念于1999年由Langreth和Waldholz。在Oncologist杂志上首次提出，其意义是根据患者遗传学背景，结合生物信息学和高端成像技术进行诊断，从而合理选择药物
6、进行治疗。由此，人们开始认识到找出个体之间的遗传学差异与药物治疗效果之问的关系是个体化医学首要解决的问题。Meyer31于1991年提出的药物基因多态性为上述问题的解决奠定了基础。后来，Maitland等报道了巯基嘌呤甲基转移酶基因(thiopurine methyltransferase，TPMT)与6巯基嘌呤治疗之间、尿嘧啶二磷酸葡糖醛转移酶lAl基因(uridine diphosphate glucuronyhransferase 1AI，UGTlAl)DOI：10 3760cmajissn1009-9158201211004作者单位：100730中国医学科学院北京协和医学院研究生院(孙
7、艳丽)；卫生部北京医院临床检验中一12(李金明)通信作者：李金明，电子信箱：ljm63hnyahoocorncn综述与伊立替康治疗之间以及二氢嘧啶脱氢酶基因(dihydropyrimidine dehydrogenase，DPY D)与5一氟尿嘧啶治疗之间的关系。4 o。伴随大量与药物治疗效果相关基因的发现，个体化治疗基因检测也被提上日程，制定标准化的检测方法也迫在眉睫。一、Kras、表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor，EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1(Vraf murine sarcoma viral oncogene homolog B
8、 1，BRAF)基因检测应用概况从1991年Meyer。首先提出药物基因多态性，药物遗传学的发展已经历20年历程。截止2012年3月4日，美国食品药品监督管理局(Food and DrugAdministration，FDA)要求109种药物的标签中必须注明药物遗传学信息，共涉及到与20种疾病有关的34个基因，其中包括18种与癌症相关的基因f http：wwwfd乱gayDrugsScienceReseareKResearchAreasPharmacogeneticsucm083378htm)。目前，国内外许多商业实验窒、学术研究实验窒和医院实验室开展了个体化治疗基因检测的研究，国外能承担万方
9、数据972 尘堡堕堕堕芏苤查!生!旦箜!鲞箜!塑垡!i!：坐塑型：型!里垫!：塑!：!：盟!Kras、EGFR、BRAF 3种基因检测任务的实验室见表1，更详细的信息可查询美国国立卫生研究院资助的网站GeneTests(http：wwwgenetestsorg)。伴随药物遗传学的发展，个体化治疗基因检测已取得很大进展。目前常见基因突变检测方法主要有直接测序法、限制性片段长度多态性(restrictionfragment length polymorphism，RFLP)、单链构象多态性分析法(Singlestrand conformation polymorphismanalysis，SSCP
10、)、焦磷酸测序法(Pyrosequencing)、高分辨率熔解曲线法(high resolution mehing curveanalysis，HRM)、扩增阻碍突变系统法(amplificationrefractory mutation system，ARMS)等6种方法，其优缺点比较见表2。另外，大量试剂盒也如雨后春笋般涌现出来，然而它们检测的一致性、灵敏度及准确度尚有待验证。迄今为止，美国FDA已通过了8个药物遗传学相关的体外诊断产品的质量认证(表3)，这仅占美国FDA推荐检测基因的176，尚有大量与药物遗传学相关基因缺少标准的检测方法和质量控制。同时，现有的试剂盒还存在检测范围窄、对标
11、本质量要求高、检测准确度不高和费用昂贵的缺点，这些均制约了个体化治疗基因检测的发展及推广。表2常用基因突变检测方法优缺点比较二、Kras基因特点及应用Kras基凶是一种原痛基因，长约35 kb，位于12号染色体，是ras基因家族成员之一，编码KRAS蛋白。KRAS蛋白主要定位于细胞膜上，具有GTPase活性。PKC可使KRAS蛋白磷酸化，这种磷酸化过程导致KRAS蛋白与细胞膜的结合减弱而改变位置，使得KRAS蛋白移至内质网、高尔基体和粒线体等位置。KRAS蛋白具有分子开关作用，在信号通路中发挥重要作用。Kras基因分为突变型和野生型，常见的突变位点位于Kras基因2号外显子的12号密码子和13
12、9表1 国际认可的检测Kras、EGFR、BRAF基因突变的实验室一览表基因 疾病类型 实验室名称Kras 努南综合征CFC综合征EGFR 肺癌BRAF 努南综合征CFC综合征豹综合征美国(Molecular Diagnostics Lab”，Ambry Genetics“，Medical Genetics Lab“，Center for Human Genetics”，Genetics Diagnostic Lab8Emory Molecular Genetics LabaGeneDx“，Molecular Diagnostie Lab8“Lab forMIdecula,Medicine。“
13、Moecular Gelmtics Lab“Molecular Diagnosti(S and BioBanking“，Michigan MedicalGenetics Lab“，Human Genetics Lab of MunroeMeyer Institute“，Genetics Lab3)，德国(Biologis Center for HumanGeneticstile Rare Disease CompanyInstitute of Medical Genetics and 14uman Genetics“Medical Genetics Lab“diagenos“1，LaborMV
14、Z westmecklenbur93，Institute of Human Genetics3)，土耳其(Duzen Lab Grubu3)葡萄牙(CGC Genetics“)，以色列(GGA“，ProntoLab-MLPA Lab“。)，波兰(Laboratory of Human Genetics8)，两班牙(Health in Code SL8，Innovagenomics8，Lab de Gen6tica Clinica Y Gen6mica Funcional3)，荷兰(DNA DiagnosticsNijmegen“)美国(Medical Genetics Lab“，Center
15、for Hunlan Getletics“，Em01y Molecular Genetics Lah“，GeneDx“，MolecularDiagnostic Lab3“Lab for Molecular Medicine” Molecnlar Genetics Lah8， Molecular Diagnostics andBioBanking“)，德国(Lab for Molecular Diagnostics“。，The Rare Disease Company“)，以色列(GGA“，ProntoLabMLPA Lab“”)，两班牙(Health in Code SL8)，荷兰(DNA D
16、iagnostics Nijmegen“)，英国(Regional MolecularGenetics Service8“1土耳其(Duzen Laboratuvarlar Grubu。)，德国(Lab for Molecular Diagnostics“，the Rare Disease Company“)，葡萄牙(CGC Genetics8)，以色列(GGA”，ProntoLabMLPA Lab“。)，奥地利(Novogenia8)美国(Medieal Genetics Lab“，Molecular Diagnostic Lab8，Lab for Molecular Medicine“，M
17、olecular Diagnostics andBioBanking“。)，德国(The Rare Disease Company“)，以色列(GGA“)，两班牙(1nnovagenomies“)，荷兰(DNADiagnostics Nijmegen“、美国(Medical Genetics Lab“，Molecular Diagnostic Lab“，Molecular Diagnostic La”，Center for Human Genetics“，Emory Molecular Genetics Lab80”GeneDx”，Lab or Molecular Medicine”，Medi
18、cal Neurogenetics8MolecularGenetics Lab3，Molecular Diagnostics and BioBanking”。)，德国(The Rare Disease Company“)，葡萄牙(CGCGenetics“)，西班牙(Molecular Biology Center“，Innovagenomics)，荷兰(DNA Diagnostics Nijmegen“)，英国(Regional Molecular Genetics Service。)美国(Molecular Diagnostic Iab。，Center for Human Genetics”
19、，Molecular Diagnostic Lab“，Lab for MolecularMedicine”，Medical Neurogenetics8)，德国(The Rare Disease Company“)，以色列(GGAab，ProntoLabMLPALab“。)，荷兰(DNA Diagnostics Nijmegen8)，英国(Regional Molecular Genetics Service“。)注：4为测序；6为产前诊断；。为缺失或复制分析；。为突变检测；。为被选中的外显子的序列分析；为整个编码区的突变扫描万方数据主垡堕墅堕堂盘圭垫!至!爿箜!鲞箜!塑垦!i!些丛型：盟!坐
20、壁!：!t，!：!i!堕!：!表3美国FDA批准的个体化治疗基凶检测试剂盒或器械注：CFTR为囊性纤维化跨膜电导调节奉肇【大【(tystkfibrosis iransmbrane collduc(anc(!regulatol)；FISH为荧j匕原位杂交技冬(Iluorest“Pn situ hybridization)；ALK为问变型淋巴瘤激酶基例(Anaplasli(、lymphoma kinase)；RT为逆转录(FPVOIsPFaIISIrillion)密码子上、3号外显子的6l号密码子，其中有7个突变热点：G12C、G12R、G12S、G12V、G12D、G12A、G13VD，占Kra
21、s基因总突变的90以上。研究表明体细胞Kras基因突变与多种人类恶性肿瘤，如肺癌”J、白血病【、黏蛋白腺癌、胰腺癌【7 J、结直肠癌o有关，而生殖细胞Kras基因突变与努南综合征p o和心脏一面部一皮肤(cardiofaciocutaneous，CFC)综合征啦相关。对结直肠癌而言，Kras基因突变发生的时间顺序至关重要。早期Kras基因突变一般导致自限性肿瘤增生或临界病变，但是如果该基因突变发生在腺瘤样结肠息肉易感基因(Adenomatous PolyposisColi，APC)突变之后，这种突变常会导致癌症1“。Kras基因突变与EGFR单克隆抗体对结直肠癌的治疗效果之问关系密切，早在20
22、06年已有报道2。Kras基因发生突变的结直肠癌患者对帕尼单抗或西妥昔单抗的反应一般较差0|。研究表明西妥昔单抗对具有野生型Kras基因的晚期结直肠癌患者的治疗效果不错。114 J。因此，Kras基因突变的检测可用于预测结直肠癌靶向药物EGFR单抗的治疗效果。为此，美国国立癌症综合网络(NCCN)结直肠癌临床实践指南(2011版)明确指出：所有转移性结直肠癌患者都应检测Kras基因状态；只有Kras野生型患者才建议接受EGFR靶向治疗。我国结直肠癌诊疗规范(2010年版)要求病理科确诊结直肠癌后，还要进行Kras基因检测，以便为患者肿瘤化疗和个体化靶向治疗提供用药参考。另有证据表明Kras基因
23、突变与EGFR酪氨酸激酶抑制剂对非小细胞肺癌的治疗效果有关。具有Kras基冈突变的肺癌患者对特罗凯(Tarceva)的应答效果较差，低于5。1“。此外，Kras基因突变可作为非小细胞肺癌无进展生存期重要的不良预后因子”。NCCN非小细胞肺癌临床实践指南(201 1版)明确指出：不建议Kras基冈突变患者使用特罗凯进行分子靶向治疗。这预示着个体化基因检测已从崭新理念阶段走向临床实践阶段，并进入了临床推广阶段。目前，国际上尚无针对Kras基因检测的标准化规范1，各国正在加紧开展针对Kras基因突变检测的质量评价，以期建立一种灵敏度高、准确性好、可操作性强的标准化方法。当前一般选用直接测序法作为检测
24、Kras基因突变的金标准。美国选定英国Qiagen公司生产的TheraScreen：Kras突变试剂盒(CEIVD)作为该基因检测的金标准，该试剂盒应用等位基因特异性PCR技术，即可对Kras基因第12位和第13位密码子的7个突变进行检测u 8。然而，该方法仅能用于检测最普通的突变，不能对发生频率较低的突变进行检测。其他国家也在努力寻找1种标准的Kras基因突变检测方法。Kras基因突变检测的一致性及质量控制也一万方数据主堡堕监匿堂苤查；!芏!旦箜!鲞筮!塑垦!i!：坐坠四：!坐!竺!：!：!i：堕!：!直是各国关注的问题。为确保欧洲地区Kras基因检测的一致性及检测质量，比利时人类遗传学研究
25、中心的Dequeker等坩。对来自欧洲13个不同国家的13家实验室的Kras基因突变检测能力进行了评估。在该评估过程中，对DNA提取及Kras基冈突变检测方法未作统一规定，结果发现只有10家实验室检测结果完全正确。另外，来自欧洲8个不同曰家59家实验室的Kras基冈检测结果显示，只有70的实验室正确鉴别了所有标本的Kras基凶突变状态。法困国家癌症研究所对15家法围实验室的Kras基因突变检测结果的准确性进行了评估，Kappa分析显示仅6家实验室的一致性较好(Kappa=039)。其主要原因为：各实验室分析的肿瘤标本的大小和提取出DNA质量不同；由于此种检测并无金标准方法，因而不同实验室检测的
26、突变位点及检测方法不同。其中，标本质量也是影响检测结果准确度的重要因素之一。用福尔马林溶液同定对组织标本中的DNA有一定的破坏作用，因此，分析前的标本质量控制也尤为重要2。研究还表明，在标本可获得的情况下，Kras基因状态检测同样适用于晚期结直肠癌患者【2。西班牙米格尔埃尔南德斯大学公共卫生系的Parker等2 2I用Meta分析对30篇文献中有关患者Kras基冈突变状态与外分泌型胰腺癌诊断之间的关系进行了研究，结果发现当使用组织标本时，诊断准确度、敏感度及特异度最高。i、EGFR基因特点及应用EGFR基因由28个外显子组成，编码1186个氨基酸，位于人类染色体7p13一q22区，它编码的蛋白
27、是ErbB受体家族的成员之一，位于细胞表面，能被特异性的配体，如表皮生长冈子、转化生长因子仪激活。在激活过程中，EGFR经历了1个从无活性的单体形式向有活性的同源二聚体转变的过程。EGFR二聚体化刺激了固有的细胞内蛋白酪氨酸激酶活性，最终导致EGFR C端若干酪氨酸残基的自身磷酸化及周围聚集的其他受体的交叉磷酸化。EGFR主要激活2条下游通路：KRAS和P13K蛋白(phosphatidylinositol 3-kinase)。目前已知的EGFR基因突变常见于第19位外显子的缺失、L858R、T790M、C-719X、L861Q、$768I、第20位外显子的插入等，以前两者居多，占所有突变的9
28、0，这些突变引起EGFR蛋白过表达或活性过强，可能与多种癌症的发生有关，包括非小细胞肺癌_2 3I、直肠癌【2 4I、多形性胶质细胞瘤。”o。因此，EGFR基因突变可以作为癌症治疗的靶标【2 3；，常用的以此为靶标的抗癌药分为针对EGFR的单克隆抗体抑制剂和抑制EGFR酪氨酸激酶活性的小分子2种，前者包括西妥昔单抗(Cetuximab)、帕尼单抗(Panitumumab)、Zalutumuinab等，后者包括吉非替尼(Gefitinib)，厄洛替尼(Erlotinib)和拽帕替尼(Lapatinib)。研究表明，对吉非替尼治疗敏感有关的EGFR突变型为第19位外显子缺失和第21位外显子点突变。
29、吉非替尼亚太地区研究(Iressa”1 panAsian study，IPASS)的期临床试验结果显示，对不吸烟或轻度吸娴的EGFR突变的亚裔非小细胞肺癌患者而言，吉非替尼单用的无进展生存期要优于紫杉醇与卡铂合用2 6|。EGFR基因突变与肿瘤患者对EGFR酪氨酸激酶小分子抑制剂的治疗效果正相关，有效应答率高达60。但是，Kras基因突变与EGFR基因突变一般是互相排斥的517。82引。美国哈佛医学院的Jackman等刊应用直接测序法对EGFR基因突变状态进行分析，结果发现，与接受其他毒性更强的化疗药物治疗的非小细胞肺癌患者相比，用吉非替尼治疗的EGFR基因突变患者的无进展生存期明显延长，而对
30、野生型EGFR患者应优先考虑化疗，而不是单用EGFR酪氨酸激酶抑制剂；而且，与EGFRL858R点突变患者相比，外显子19位缺失患者的疾病进展时间明显延长。在接受厄洛替尼维持治疗的非小细胞肺癌患者中，EGFR基因突变患者的无进展生存期大于EGFR基冈野生型患者。”：用于EGFR基因突变检测的标本一般是组织，包括冰冻组织标本和同定包埋标本，这些标本根据来源又分为外科手术标本和穿刺活检标本。这些标本中一般含有正常细胞，因此对检测方法的灵敏度要求较高。此外，Goto等【列。对组织标本和血清标本来源的DNA分别进行了EGFR基因突变检测，结果发现血清标本中EGFR基=j突变的检出率较组织标本明显减低。
31、因此，当前组织标本仍是EGFR基因突变检测的首选。在目前常用的EGFR基因突变检测方法中，以直接测序法应用最为广泛，但与ARMS相比较，它对福尔马林同定石蜡包埋组织标本的检测成功率较低、流程复杂、速度慢、数据分析要求高、需要专门的仪器，且无商品化的试剂盒。鉴于ARMS法的优势，已有2种商品化的试剂盒问世，一种是英国DxS公司生产的DxS ARMS EGFR检测试剂盒，另一种是我国厦门艾德生物医药科技有限公万方数据士堡捡鉴匡堂苤壹!至!旦筮!鲞笙!塑g!i!：坐丛塑!盟!坐!里!：Y!：盟!：!司生产的Adx ARMS EGFR检测试剂盒，二者均可检测29种突变，突变判读采用FAM信号，均能使用
32、Qiagen Rotorgene系列、Stratagene Mx系列或ABI系列的荧光定量PCR仪进行检测。不同的是ABI系列的DNA用量较低(75的一致性，而各家实验室间EGFR基冈拷贝数和EGFR、Kras基因突变的ISH检测结果的一致性高于97，同时保持96的敏感度和95的特异度1 29 J。由此可见，在检测基因拷贝数时，IHC分析性能和重复性明显低于ISH，显示出IHC诊断性能的不足，而在严格遵循实验程序的基础上采用直接测序法检测EGFR和Kras基冈突变有很好一致性和准确度。2引，已经能够满足临床的相应需求，更好地为肿瘤患者的个体化治疗服务。四、BRAF基因特点及应用BRAF基因是1
33、种原癌基因，由18个外显子和17个内含予组成，基因K度为199622 kb，定位于7q34，可在所有细胞类型及组织中进行转录，其编码BRaf蛋白，该蛋白在MEKERKs细胞信号通路及细胞生长过程中发挥重要作用”1。2002年，Davies等。3。发现，约66恶性黑色素瘤和15的结直肠癌中BRAF基因存在体细胞错义突变，所有突变发生在激酶结构域内，其中V600E占了80。BRAF基因可能发生突变，进而导致BRaf蛋白的正常功能发生改变。31I。一方面，某些遗传的BRAF基因突变可能引起出生缺陷，如心内膜综合征旧2I。而另外一些发生在成人中的获得性突变可能导致癌症，如非霍奇金淋巴瘤一3I、结肠癌。
34、34。“、恶性黑色素瘤。3、甲状腺乳头状癌。3 7、非小细胞肺癌引、肺腺癌。研究发现，至少30种BRAF基因突变与人类癌症的发生相关口引。而且BRAF突变频率变化较大，在黑色素瘤中80，而在其他癌症中则为(018)39j。90的突变发生在核苷酸1799位，腺苷酸取代了胸腺嘧啶，最终600位的缬氨酸(V)被谷氨酸替代(E)【40j。BRAF基因突变在黑色素瘤、结直肠癌、神经胶质瘤、肉瘤、卵巢癌、乳腺癌以及肺癌等肿瘤细胞系中的发生率依次为59、18、1 1、9、14、2、3L 31 J，此外，BRAF V600E在甲状腺乳头状癌中的发生率高达358L4i J。201 1年6月，意大利科学家Tiac
35、ci等应用大规模平行测序技术研究发现，该突变在毛细胞白血病中的发生率高达100L3 3。其他的BRAF基因突变还有R461 I?1462S?G463E?G463V?G465A?G465E?G465V?G468A?G468E?N580S?E585K?D593V?F594L?G595Ri 1596V?T598I?V599D?V599E?V599K、V599R、K600E、A727、，等_，这些突变大多集中于2个区域：N端富含甘氨酸的P环和侧翼区的激活片段。M，这些突变使活性片段从无活性状态进入活性状态。BRAF基因突变状态与癌症治疗效果之间也具有相关性。Yokota等。4列发现BARF基因突变是晚
36、期及复发性结直肠癌最重要的预后指标之一，与患者较差的总体生存期密切相关。此外，BRAF基因野生型与西妥昔单抗和帕尼单抗对结直肠癌的治疗效果呈正相关。4引，而且BRAF基因突变型可作为转移性结直肠癌预后较差的重要指标j。BRAF基因突变检测多采用组织标本，肿瘤细胞数应不少于70为宜_4 3I，检测方法都以PCR技术为基础。常用检测方法有直接测序法、转移终止引物延伸法(shifted termination primerextensionassay)、SSCP、焦磷酸测序法、低变性共扩增(coamplification at low denaturation temperature)PCR。美国应
37、用生物系统公司(AB)研发的BRAF突变检测试剂盒(BRAF Mutation Analysis)的检测原理就是第一种方法，即当600位的缬氨酸未发生突变时，发生引物延伸反应，但是如果600位的突变万方数据史堡捡验匡堂鍪蠢!；至!旦箜!鲞箜!塑g!i!L坐丛型：盟!鲨坐生!：!：!：堕!：!(V600E、V600A、V600G)存在，引物延伸反应将提前终止，产生短的延伸产物，由此形成2组大小不同的延伸产物。该法的优点是对标本中肿瘤细胞量要求较低，其缺点是检测的突变种类有限。与之相比较，低变性共扩增PCR技术的特异性较高，尤其当该法与HRM法共用时，可以准确找出BRAF稀有基因突变。2011年8
38、月17日，美国FDA批准了罗氏公司生产的BRAF基因突变检测试剂盒Cobas4800BRAF V600突变检测试剂盒，其检测原理是应用实时，PCR在Cobas4800系统中对黑色素瘤患者的V600E突变状态进行定性检测，内参为野生型的V600序列，检测目的旨在为具有BRAF V600E突变的黑色素瘤患者应用Zelboraf(Vemurafenib)治疗提供依据。在黑色素瘤患者的组织标本中，如果检测到BRAF V600E突变，表明该患者可用Zelboraf治疗，反之，治疗可能无效。后来，该公司将该试剂盒的检测结果与Sanger法进行比较【4”，结果发现在433例可评估标本中，2种方法检测BRAF
39、突变阳性的黑色素瘤患者一致性达964，检测BRAF基冈突变阴性患者一致性达到80。与Sanger法相比，Cobas测定法失误率更低，检测V600E突变更敏感，且在相同人群中能检测到更多的V600E突变者。通过比较，该公司认为它们的试剂盒在辅助黑色素瘤患者选择黑色素瘤药物Zelboraf方面比Sanger测序法更灵敏。综上所述，个体化治疗的基网检测意义是在疾病治疗前，先检测基因突变状态，从而为合理用药提供参考依据。这不仅可以避免不必要的不良反应，减少不必要的费用，而且可以确认从治疗中获益的患者，延长患者的生存期，最终达到让合适的患者在合适的时间得到合适的治疗的目的。为提高各种癌症相关基冈突变状态
40、检测的灵敏度和准确度，迫切需要标准化的检测方法，Gholson于2012年2月16日发表于在自然杂志的评论也强调了个性化检测标准化的重要性，尤其当研究结果与生命息息相关的时候，它显得尤为重要H。世界各国正在加紧制定标准化的检测规范，加强个体化治疗基因检测的质量控制。在我国，个体化治疗基因检测现已在众多的医疗机构实验室开展，由于涉及的科室较多，如病理科、药剂科、肿瘤科、检验科等，且有些科室缺少质量控制和标准化意识，冈此，个体化治疗基冈检测尚处于混乱状况。尽管卫生部早在2002年就下发了临床基因扩增检验实验室管理暂行办法(卫医发200210号)，并在2010年又下发了医疗机构临床基因扩增检验实验室
41、管理办法(卫医政发2010194号)，但是有些开展个体化治疗基冈检测的实验室，并未认真学习执行上述管理办法，因此，迫切需要对相关实验室技术人员进行培训，对实验室个体化治疗基因检测进行规范。参 考 文 献l 1 J Gibson WMCan personalized medicine survive?Can FamPhysician197l，17：29-882Langrelh R，Waldholz M New era of personalized medicine：targeting dings for each unique genetie profileOncologist，1999，4：
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