1、 共 8 页 第 1 页 黄精检验标准操作规程文件编码：S0P-QC-ZJ-3047-02制定部门：质量检验中心颁发部门：质量管理部题 目黄精检验标准操作规程制定人： 日期: 年 月 日 审核人： 日期: 年 月 日批准人： 日期： 年 月 日分发部门：质量管理部、质量检验中心生效日期: 年 月 日变更历史：1.2003年3月制定； 2.2005年7月执行中国药典2005年版第一次修订；3.2010年10月执行中国药典2010年版第二次修订。目 的：建立黄精检验标准操作规程。规范检验操作，确保黄精质量。适用范围：适用于黄精检验。责 任 者：质量管理部经理、质检中心主任、质量检验员。内 容：1品
2、名：黄精2取样：按药材和饮片取样标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6065）取样3检验依据：黄精内控质量标准（STP-QS-ZJ-3047）4性状：大黄精 取本品，在明亮处用肉眼观察，呈肥厚肉质的结节状，结节长可达10cm以上，尺量，宽 36cm，厚 23cm。表面淡黄色至黄棕色，具环节，有皱纹及须根痕，结节上侧茎痕呈现圆盘状，圆周凹入，中部突出。质硬而韧，不易折断，断面角质，淡黄色至黄棕色。鼻闻气微，口尝少许味甜，嚼之有黏性。鸡头黄精 呈结节状弯柱形，长 310cm，直径 0.51.5cm。结节长 24cm，略呈圆锥形，常有分枝；表面黄白色或灰黄色，半透明，有纵皱纹，茎痕圆形，直径58mm。
3、共 8 页 第 2 页 姜形黄精 呈长条结节块状，长短不等，常数个块状结节相连。表面灰黄色或黄褐色，粗糙，结节上侧有突出的圆盘状茎痕，直径 0.81.5cm。5鉴别5.1仪器：显微镜、电子恒温水浴锅、薄层喷雾气压泵、鼓风电热恒温干燥箱、电子天平5.2试剂与试液5.2.1试剂：正丁醇、甲醇、石油醚（6090 0C）、乙酸乙酯、甲酸5.2.2试液水合氯醛试液：取水合氯醛 5g，加水 15ml与甘油 10ml使溶解，即得。甘油乙醇试液：取甘油、稀乙醇各 1份，混合，即得。5%香草醛硫酸溶液：取香草醛 5g，加硫酸至 100ml，摇匀，即得5.3对照药材：黄精对照药材5.4操作方法5.4.1按显微鉴别
4、法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6034）检查。取本品 2根放入 250 ml烧杯中，加水 100ml，用水润 30分钟使之软化后，取中上部，用刀片徒手切片，切成 20m的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液 2滴，将载玻片置酒精灯火焰上方 2cm处往返摆动加热至边缘起小泡，即停止加热，补充试液后再加热，直至透化完全。透化后放冷，加甘油乙醇 2滴，盖上盖玻片。置显微镜下下观察，大黄精 表皮细胞外壁较厚。薄壁组织间散有多数大的黏液细胞，内含草酸钙针晶束。维管束散列，大多为周木型。鸡头黄精、姜形黄精，维管束多为外韧型。5.4.2取本品适量置高速粉碎机内粉碎成粉末，称取过四号筛（65
5、 目）粉末 1g，置小具塞锥形瓶中加 70%乙醇 20ml，加热回流 1小时，抽滤，滤液蒸干，残渣加水 10ml使溶共 8 页 第 3 页 解，置分液漏斗中加正丁醇振摇提取 2次，每次 20ml，合并上层正丁醇液，蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇 1ml使溶解，置具塞小试管中，作为供试品溶液。另取黄精对照药材 1g，置小具塞锥形瓶中加 70%乙醇 20ml，加热回流 1小时，抽滤，滤液蒸干，残渣加水 10ml使溶解，置分液漏斗中加正丁醇振摇提取 2次，每次 20ml，合并上层正丁醇液，蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇 1ml使溶解，置具塞小试管中，同法制成对照药材溶液。按薄层色谱法标准操作规程(SOP-QC-
6、ZJ-6039)试验，吸取上述两种溶液各 10l，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以石油醚（6090 0C）-乙酸乙酯-甲酸（5：2：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，置预热至 1050C的电热恒温箱中加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。6检查6.1水分：按水分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6020）甲苯法测定，不得过18.0%。6.1.1仪器：水分测定仪、500ml 短颈圆底烧瓶、水分测定管、外管长 40cm的直形冷凝管、电热套、玻璃珠或瓷片碎片、电子天平6.1.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电
7、子天平预热 30分钟。取供试品适量粉碎，称取最粗粉（全部通过一号筛，混有能通过 3号筛不超过 20%）约1040g（约相当于含水量 14ml），精密称定，置 500ml圆底烧瓶中，加甲苯约200ml，（必要时加入干燥的玻璃珠数粒）将仪器各部分连接，开启冷凝水，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满水分测定管的狭细部分。将圆底烧瓶置电热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出 2滴，待水分完全馏出，（即测定管刻度部分的水量不再增加时）将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷，将管壁上附着的共 8 页 第 4 页 甲苯推下，继续蒸馏 5分钟，放冷至室温。如有水粘附在水分测定管管壁上，可用蘸
8、甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加入亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）， 检读水量。%10%供 试 品 重 量检 读 的 水 体 积水 分6.2总灰分：按灰分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6016)总灰分测定法测定，不得过 4.0%。6.2.1仪器：节能电阻炉、电子天平、坩锅。6.2.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热 30分钟。取洁净的坩埚，置节能电阻炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，经加热至 600炽灼约 1小时，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约 300，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量，再以同样条件重复操作，
9、直至连续两次干燥后称重的差异在 0.3mg以下为止。取本品适量粉碎，称取能通过二号筛并混合均匀的粉末 23g，置炽灼至恒重的坩埚中，在电子天平上精密称定，放入节能电阻炉内，缓缓炽热，至完全炭化呈黑色，逐渐升高温度至 500600，炽灼 30分钟后，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出观察 ，直至完全灰化，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量，再以同样条件重复操作，直至连续两次炽灼后称重的差异在 0.3mg以下为止。并记录数据。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量。%10-%空 坩 埚坩 埚 ）（ 样 品 空 坩 埚坩 埚 ）（ 灰 分总 灰 分6.3浸出物：按
10、浸出物测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6015）项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于 45.0%。6.3.1仪器：鼓风电热恒温干燥箱、电子天平、电子恒温水浴锅共 8 页 第 5 页 6.3.2 试剂稀乙醇：取乙醇 53ml，加水制成 100ml即得。6.3.3操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热 30分钟。取洁净的蒸发皿，置烘箱内 100105干燥 1小时，取出，置干燥器中室温放置 30分钟，精密称定重量；再置烘箱内 100105干燥 1小时，取出置干燥器中室温放置 30分钟，精密称定重量，直至连续两次干燥后称重的差异在 0.3mg以下为止。取能通过二号筛并混
11、合均匀的供试品约 4g，置 250ml的锥形瓶中，精密加稀乙醇 100ml，密塞，称定重量，静置 1小时后连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸 1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于 100105干燥 3小时 ，置干燥器中冷却 30分钟，迅速精密称定重量。并记录数据。除另有规定外，以干燥品计算供试品浸出物的含量。%1025)-1)(%水 分（供 试 品 重 量 蒸 发 皿蒸 发 皿浸 出 物浸 出 物6.4二氧化硫残留量：按二氧化硫残留量测定法标准操作规程（SOP-QC-Z
12、J-6062）测定，不得过 150mg/kg。6.4.1仪器：SO 2测定装置（1000ml）、电热套、10ml 棕色滴定管、250ml 锥形 瓶、磁力搅拌器、100ml 量筒6.4.2试液6mol/L盐酸溶液：取盐酸 54ml，置 100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。淀粉指示液：本液应临用新制。取可溶性淀粉 0.5g，加水 5ml搅匀后，缓慢倾入 100ml沸水共 8 页 第 6 页 中，随加随搅拌继续煮沸 2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。0.01mol/L碘滴定液： 6.4.3 仪器装置：A为 1000ml两颈圆底烧瓶；B 为竖式回流冷凝管；C 为（带刻度)分液漏斗；D 为连接氮气流入口
13、；E 为二氧化硫气体导出口；6.4.4操作方法：取药材细粉约 10g，精密称定 W，置两颈圆底烧瓶中， 加水 300400ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取 6mol/L盐酸溶液 10ml加入带刻度分液漏斗中。锥形瓶里加入水 125ml和淀粉指示液 1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。打开冷凝管，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于锥形瓶内液面以下。连接导气管入口。开通氮气，调节适宜的气体流量（氮气流速约为 0.2L/min,至蒸馏瓶内有气泡均匀排出）。打开带刻度分液漏斗的活塞，使盐酸溶液 10ml流入烧瓶中。给两颈烧瓶内的溶液加热至沸，并保持微沸约 3分钟后开始用碘滴定液（0
14、.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色持续 30秒钟不完全消褪，记录样品消耗滴定液体积 A；并用空白试验校正，记录消耗滴定液体积 B。每 1ml的碘滴定液（0.01mol/L）相当于 0.6406mg的 SO2。C 为碘滴定液浓度的校正因子 1064.10)(mg/kWCA量供 试 品 中 二 氧 化 硫 残 留7含量测定 ：按紫外-可见分光光度法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6035）测定。7.1仪器：紫外可见分光光度计、电子天平、电子恒温水浴锅7.2试剂与试液7.2.1试剂：乙醇7.2.2试液0.2%蒽酮-硫酸溶液 取蒽酮 0.2g，缓缓加入硫酸
15、使溶解成 100ml。共 8 页 第 7 页 7.3对照品：无水葡萄糖对照品7.4操作方法：对照品溶液的制备 精密称取经 105干燥至恒重的无水葡萄糖对照品 33mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为 C 对 (每 1ml中含无水葡萄糖0.33mg）。标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分别置 10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加 0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴（98-100）中保温 10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却 10分钟，取出，以相应试剂为空
16、白。按紫外-可见分光光度法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6035）测定，在 582nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。葡萄糖溶液取量 0.1ml 0.2ml 0.3ml 0.4ml 0.5ml 0.6ml0.10.3310 0.20.3310 0.30.3310 0.40.3310 0.50.3310 0.60.3310对照液浓度mg/ml 0.0033 0.0066 0.0099 0.0132 0.0165 0.0198吸收度 A 对测定法 取本品适量，置高速粉碎机内粉碎成细粉（能全部通过五号筛，至少 95%能通过六号筛），取细粉 1-2g，置干燥电热恒温
17、干燥箱中， 60干燥 2小时，取出置干燥器中，室温放置 30分钟后精密称定；再置烘箱内 60干燥 1小时，取出置干燥器中室温放置 30分钟，精密称定重量，直至连续两次干燥后称重的差异在 5mg以下为止。取上述干燥至恒重的本品细粉约 0.25g，精密称定 W 样 ，置具塞圆底烧瓶中，加 80%乙醇 150ml，连接冷凝装置，置水浴中回流 1小时，趁热滤过，残渣用 80%热乙醇洗涤 3共 8 页 第 8 页 次，每次 10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水 150ml，置水浴中加热回流 1小时，趁热滤过，残渣及烧瓶用热水洗涤 4次，每次 10ml，合并滤液与洗液，放冷，转移至 250ml量瓶中，加水
18、至刻度，摇匀，精密量取 1ml，置 10ml干燥具塞刻度试管中，加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加 0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴（98-100）中保温 10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却 10分钟，取出，以相应试剂为空白。按紫外-可见分光光度法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6035）测定，在 582nm波长处测定吸光度 A 样 ，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水葡萄糖的浓度 C 样 。本品按干燥品计算，样品中含黄精总糖以葡萄糖(C 6H12O6)的量，按下式计算%1025%样样精 总 糖按 干 燥 品 计 ， 样 品 含 黄 WC本品按干燥品计算，含含黄精总糖以无水葡萄糖(C 6H12O6)计，不得少于 7.0。
