1、山东红十字眼科医院- 检验科1文件编号：JYK XM-SOP文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：封面页码： 1 of 61项目标准操作规程项目标准操作规程（ SOP）山东红十字眼科医院检验科山东红十字眼科医院- 检验科2文件编号：JYKXM-SOP文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：批准页页码： 2 of 61批准页文件名称：项目标准操作规程（SOP）文件编号：JYK XM-SOP文件数量：15起草人：王珂起草日期：2012-06-10审核人： 丁连花 韩墨臣审核日期：2012-07-10批准人：丁
2、连花生效日期：2012-07-12山东红十字眼科医院- 检验科3文件编号：JYK -XM-SOP文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：目录页码： 3 of 61目 录序 号 文 件 名 称 文 件 编 号 文件页数1 项目标准操作规程封面 JYK -XM-SOP 1-32 血细胞分析标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -01 4-153 凝血酶原时间（PT）测定 (SOP) JYK -XM-SOP -02 16-184 活化部分凝血活酶时间(APTT)测定(SOP) JYK -XM-SOP -03 19-225 凝血酶时间（TT）测定(
3、SOP) JYK -XM-SOP -04 23-246 血浆纤维蛋白原（Fbg）测定(SOP) JYK -XM-SOP -05 25-277 尿液分析标准操作规程(SOP) JYK -XM-SOP -06 28-368 乙肝表面抗原检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -07 37-399 乙肝表面抗体检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -08 40-4311 乙肝 e 抗原检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -09 44-4712 乙肝 e 抗体检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -10 48-5013 乙肝核心抗体检测标准操作规
4、程（SOP） JYK -XM-SOP -11 51-5414 丙型肝炎病毒抗体检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -12 55-5815 梅毒螺旋体抗体检测标准操作规程（SOP） JYK -XM-SOP -13 59-61山东红十字眼科医院- 检验科4文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 4 of 61一 血细胞分析标准操作规程（SOP）1 检验目的 规范血常规检测实验，确保检测结果准确性和重复性。2 原理2.1 WBC、NEUT 、LYMPH、MONO、EO、BAS
5、O：用半导体激光束的流式细胞测量术。一个血液样品经过吸液和定量稀释至指定的稀释比，并进行染色，然后将样品送入鞘流装置的流动池中，一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上前向散射光由光电二极管接受，侧面的散射光和侧向荧光有光电信增管（PMT ）接受，光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血细胞的信息。2.2 RBC、PLT：直流电检测方法通过直流电阻的变化测定血细胞的大小，并通过射频电阻测定血细胞内的密度，这种检测是以电脉冲的形式进行的，根据脉冲的大小，可得到血细胞大小和内部密度的二维分布（即散点图） ，通过这些分布的检测，可得到各种测量数据。2.3 HGB 检测方法：SLS-血红蛋白方法（波
6、长 555nm） ，是一种集合了氰化高血红蛋白测定法和氧化血红蛋白测定方法优点的自动检测法。除 SHb 外，血液中各种 Hb 均与低浓度十二烷基月桂酰硫酸钠（SLS）作用，生成 SLS-Hb 棕红色化合物，SLS-Hb 最大吸收波峰为538nm，波谷为 500nm。2.4 HCT：累计和高度测量方法2.5 MCV、MCH、MCHC 方法根据 RBC、HGB 和 HCT 计算。MCV=HCT1015/RBC （fl）MCH=HGB1012/RBC （pg）MCHC=HGB/HCT （g/L ）2.6 NEUT%、LYMPH%、 MONO%、EO% 、BASO%、RDWSD、RDWCV、PDW 、
7、MPV、P LCR 方法：计算方法。山东红十字眼科医院- 检验科53 标本采集与要求3.1 静脉采血方法用真空采血针取静脉血 2ml 放入含有抗凝剂（EDTA-2K）的抗凝管中，立即轻轻将试管颠倒混匀 58 次，以使其充分抗凝，并在试管上做好标识，在 2 小时内送检。3.2 下列标本为不合格标本3.2.1 标本量不足,有凝块、溶血。3.2.2 无法确认标本与申请单对应关系的。3.2.3 其它如标识涂改、标本试管破裂等3.3 对不合格标本的处理3.3.1对有凝块、溶血、采血量不符合要求的标本应重新抽血。3.3.2 对无条码或无标识等不合格的标本，按程序文件标本采集与管理的控制程序说明原因拒收.3
8、.4 标本保存：标本采集或收集后应尽快检测，分析前静脉血血常规标本室温可保存4小时。分析后静脉血血常规标本下午下班前收集，置28冰箱保存24小时。4.试剂：试剂由 Sysmex 公司提供。4.1 试剂保存：5-30下保存即可。4.2 试剂种类与开瓶效期稀释液（CELLPACK）开箱效期：60 天。白细胞分类溶血剂 I（FDO）开箱效期：30 天。白细胞分类溶血剂 II（FDT）开瓶效期：60 天。嗜碱细胞溶血剂 FBA） ；开箱效期：30 天。血红蛋白溶血剂 SLS） ； 开箱效期：90 天。清洁液（CL-50）开瓶效期：12 个月。4.3 试剂更换：在分析过程中，如果某一种试剂耗尽，仪器就自
9、动停止检测并报警，在屏幕上显示某种试剂错误信息，这时应更换相对应的试剂，换上相应试剂后按任意键，机器自动冲洗，冲洗完毕，绿灯亮，进入检测状态。5 校准品与校准模式5.1 校准品的名称：使用制造商提供的配套校准物或利用定值的新鲜全血作为校准物的校准。5.2 校准品：SCS 1000。6 质控品与室内质控规则6.1质控品为Sysmex公司提供的质控全血低、中、高值3个不同水平。6.2 质控物准备文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 5 of 61山东红十字眼科医院- 检验科6将质控物从冰
10、箱取出，室温放置15分钟后，轻轻颠倒混匀50次（2分钟左右），直至沉积的血细胞完全分散开。6.3 质控品测定：每天测定质控血 1 次。6.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施，并在确认重新回复到控制状态后开始检测标本。7 适用仪器XS-1000i血细胞分析仪.8 标本的检测程序8.1 标本的登记与编号收到标本后，对标本进行编号，在编号过程中，检查标本是否合格。 8.2 选择手工模式如果未显示手工模式，按下手工模式序号键，程选择手工模式8.3 分析样品 每日工作始前 进行仪器状态和试
11、剂检查，确认状态正常。8.3.1 颠倒混匀样品管，充分混合全血样品。8.3.2 小心打开盖子，以防血液溅出。8.3.3 将样品管置于吸样针中，按启动开关。 “READY”灯闪烁后，切勿移开样品管，此时正在吸样。8.3.4“READY”灯熄灭后，移开样品管。注释：“READY”灯灭后要移开样品管。8.3.5“READY”灯再次亮后，将显示“样品吸入准备好”信息。准备下一样品，重复步骤 8.3.18.3.4。样品吸入完成后，开始分析。8.4.输出分析结果 当仪器分析完成后，结果显示在主机屏幕上的同时，将自动传送到信息处理装置微机中，由中文信息处理微机将结果打印出来。9.主要分析参数 彩色 LCD
12、屏幕上显示 23 个分析数据参数：WBC RBC HGB HCT PLT NEUT% YMPH% MONO% EO% BASO% NEUT# LYMPH# BASO# BASO# HCT MCV MCH MCHC RDW-CV RDW-SD PDW MPV P-LCR 10.结果计算：见本程序原理部分11 检验结果的报告及范围11.1 血常规标本上机检测完毕后，检验结果直接传输到与仪器联网的中文电脑信息系文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 6 of 61山东红十字眼科医院- 检验科
13、7统。然后，在该系统编辑、录入和签发报告。11.2 血细胞的显微镜检查 镜检的目的:核实各类细胞的形态学特点，对白细胞进行分类计数，对仪器的检测结果进行确认。镜检的条件满足下列条件之一，或原因未明者必须镜检11.2.1 医生明确要求涂片镜检的。11.2.2 仪器的图形分析明确异常者。11.2.3 WBC30109/L或WBC1000109/L或PLT90和首次检查11.2.6 淋巴细胞60和首次检查。11.2.7 中间细胞15和首次检查。11.2.8 单核细胞15和首次检查。11.2.9 嗜酸性粒细胞10和首次检查。11.2.10 嗜碱性粒细胞5和首次检查。11.3 镜检的步骤11.3.1 血
14、涂片的制备及染色11.3.2 镜检的要求11.3.3 将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好，否则重新涂片染色。11.3.4 选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠的部分进行镜检11.3.5 观察白细胞、红细胞和血小板的形态特点，同时估计细胞的数量。当在高倍镜下辨认细胞不清楚时，必须待玻片干后用油镜检查。11.4 检验结果的可报告范围WBC 1.0099.99103/LRBC 0.309.99106/ LHGB 0.125.0 g/dLHCT 10.060.0 HCTPLT 10999103/L12 操作性能概要：Sysmex XS-1000i 是技术先进，计算机化的全自动血液分析装置， WBC
15、 5 分类，白细胞和嗜碱细胞散点图，红细胞和血小板细胞直方图，而且彩色 LCD屏幕上显示 23 个分析数据参数。文件编号：JYK- -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 7 of 61山东红十字眼科医院- 检验科812.1 线性 WBC 0.30103/L 或 3%范围内，范围（1.00 99.99）10 3/LRBC 0.03106/L 或 3%范围内，范围（0.309.99）10 6/LHGB 0.2g/dL 或 2%范围内， 范围（0.125.0 ） g/dLHCT 1.0HCT%或 3%范围内
16、， 范围（10.060.0）HCTPLT 10103/L 或 5%范围内， 范围（10 999）10 3/L12.2 精度：使用新鲜正常全血样品连续进行 10 次分析，得出如下对仪器衡量的精度特征：WBC CV3.0%（WBC4.0103/L 时）NEUT% CV8.0%（NEUT%30.0%，WBC4.0103/ L 时）LYMPH% CV8.0%（LYMPH%15.0%，WBC4.0103/ L 时）MONO% CV20.0%（MONO%5.0%，WBC4.0103/ L 时）EO% CV25.0%或1.5% EO%范围内（WBC 4.0103/ L 时）BASO% CV40.0%或1.0
17、% BASO%范围内（WBC4.0103/ L 时）NEUT# CV8.0%（NEUT#1.20103/L 时）LYMPH# CV8.0%（LYMPH#0.60103/L 时）MONO# CV20.0%（MONO#0.20103/L 时）EO# CV25.0%或在0.121103/L 范围内BASO# CV40.0%或在0.06103/L 范围内RBC CV1.5%（RBC4.0106/L 时）HGB CV1.5%HCT CV1.5%MCV CV1.5%MCH CV1.5%MCHC CV2.0%PLT CV5.0%（PLT100103/L 时）RDW-CV CV3.0%RDW-SD CV3.0
18、%PDW CV10.0%MPV CV4.0%文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 8 of 61山东红十字眼科医院- 检验科9P-LCR CV18.0%12.3.方法的局限性 12.3.1 计数白细胞时：溶血剂（SLS）不能破坏有核红细胞，当外周血中有有核红细胞时，计数结果偏高。12.3.2 血红蛋白测定：SHb 不能与低浓度十二烷基月桂酰硫酸钠（SLS）作用生成SLS-Hb 棕红色化合物。所以，当某些病人的红细胞中含有 SHb 时，使血红蛋白测定结果偏低。12.3.3 当测定某些非
19、血液标本时，如果测定值非常低，均满足以下数值：WBC1.00.10 3/uL，RBC0.3010 6/Ul，HGB1.0g/Dl，PLT2010 3/uL，机器会误认为样品为空白，分析结果不存储，也不传输。13.生物参考区间及医学决定水平见下表项目名称 英文字母 单位 参考值白细胞 WBC 109/L 4.0010.00红细胞 RBC 1012/L 3.505.50血红蛋白 HGB g/L 110160红细胞压积 HCT % 37.049.0平均红细胞体积 MCV fl 82.092.0平均红细胞血红蛋白含量MCH pg 21.031.0平均红细胞血红蛋白浓度MCHC g/L 320360红细
20、胞分布宽度 RDWSD fl 37.054.0红细胞变异系数 RDWCV % 0.014.1血小板 PLT 109/L 100300血小板分布宽度 PDW fl 9.013.0血小板平均体积 MPV fl 9.017.0大血小板体积 PLCR % 10.030.0中性粒细胞 NE# 109/L 2.007.50文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 9 of 61山东红十字眼科医院- 检验科10淋巴细胞 LY# 109/L 0.804.00单核细胞 MO# 109/L 0.120.80
21、嗜酸性粒细胞 EO# 109/L 0.050.50嗜碱性粒细胞 BA# 109/L 0.000.10中性粒细胞% NE% % 50.075.0淋巴细胞% LY% % 20.040.0单核细胞% MO% % 3.010.0嗜酸性粒细胞% EO% % 0.55.0嗜碱性粒细胞% BA% % 0.01.014. 临床意义14.1 白细胞参数的临床意义14.1.1 中性粒细胞的变化14.1.1.1中性粒细胞生理性增多14.1.1.1.1年龄：初生儿白细胞较高，一般在1510 9/L 左右，主要为中性粒细胞，到第69 天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均较高，可达
22、70%。到23 岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到45 岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春期时与成人基本相同。14.1.1.1.2 日间变化：在静息状态时白细胞数较低，活动和进食后较高；早晨较低，下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差一倍。剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增多。如剧烈运动，可于短时间内使白细胞高达3510 9/L，以中性粒细胞为主。14.1.1.1.3 妊娠与分娩：妊娠期白细胞常见增多，特别是最后一个月，常波动于（1217）10 9/L 之间，分娩时可高达3410 9/L。14.1.1.2 中性粒细胞病理性增多14.1.1.2.1 急性感染：急性化脓性感染时，中性粒细胞增高程度取决于感染微生物的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见分叶核百分率有所增高；中度感染时，白细胞总数常增高大于1010 9/L，并伴有轻度核象左移；严重感染时总数常明显增高，可达20109/L 以上，且伴有明显的核象左移。14.1.1.2.2严重的组织损伤或大量血细胞破坏：在较大手术后1236h，白细胞常达文件编号：JYK -XM-SOP -01文件类别：标准操作规程（SOP）版本：D/1生效日期：2012-07-12文件标题：血常规标准操作规程页码： 10 of 61
