1、,大连理工大学环境与生命学院,五日生化需氧量(BOD5)测定,1.了解BOD5间接表示水体中有机物含量的意义和稀释法测定BOD5的基本原理。 2.掌握一般稀释水、接种稀释水的制备和稀释倍数的选择。 3.掌握BOD5测定方法与操作规程。,实验目的和要求,实验原理,基本概念 用水中有机物在一定条件下所消耗氧的量，来间接表示水体中有机物的含量。,BOD5是反映水体被有机物污染程度的一个综合指标,分别测定水样培养前的溶解氧含量 和在201C培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化所消耗的氧量。,实验内容,1测定工业废水的BOD5并选择被测水样之一做实验预处理设计。 2选择正确的方法确定稀释比。 3
2、BOD5测定。 4硫代硫酸钠溶液的标定。 5一般稀释水和接种稀释水的制备。,选择水样,确定稀释比,制备一般稀释水或接种稀释水,稀释水样,BOD5测定,预处理,实验仪器及试剂,仪器,试剂,试剂,试剂,试剂,试剂,实验步骤,1. 水样预处理 2. 不稀释水样的测定 3需经稀释水样的测定 4. 溶解氧(DO)的测定 5. BOD5测定结果计算 6. 硫代硫酸钠溶液标定 7一般稀释水制备 8 接种稀释液制备,稀释倍数的确定水样稀释方法,水样预处理,1.水样的pH值若超出6.5-7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或
3、酸液进行中和。 2.水样中含有铜，铅，锌，镉，铬，砷，氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以减少毒物的浓度。,3.含有少量游离氯的水样，一般放置1-2h,游离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。其加入量由下述方法决定。,不稀释水样的测定,溶解氧含量较高，有机物含量较少的地面水，不经稀释，而直接以虹吸法，将约20的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡。,一瓶随即测定溶解氧。另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在201培养5d。,对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定
4、，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物资(磷酸盐、钙、镁和铁盐等)，以保证微生物生长的需要。,需经稀释水样的测定,稀释倍数的确定 地面水：由测得的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求得稀释倍数。,工业废水： 由CODCr值分别乘以系数0.075, 0.15, 0.25即获得三个稀释倍数。,直接稀释法：（本实验采用 ） 直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。 在已知两个容积相同（其差1mL）的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀释水）； 再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量； 然后用稀释水（或接种稀释水）使之刚好充满后加塞。 注意不要将气泡留在瓶内
5、。,直接稀释法实验步骤,根据CODcr值确定稀释倍数,调整被测 水样的pH,直接稀释法采集稀释水2瓶,1瓶测溶解氧,1瓶放入培养箱,溶解氧(DO)的测定(碘量法),用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶空白水样；用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶被测水样，分别测定当天的溶解氧和培养5天后的溶解氧。,溶解氧的固定,虹吸法采集水样转移到溶解氧瓶,将移液管插入液面下加入1ml硫酸锰溶液,盖好瓶塞，勿使瓶内有气泡，颠倒混合15次，静置,将移液管插入液面下加入2ml碱性碘化钾溶液,待棕色絮状沉淀降到瓶的一半时，再颠倒几次,将移液管插入液面下加1.52.0ml浓硫酸,待全部溶解后，取100ml此溶液采用碘量法测定溶解氧,如果溶解
6、不完全，可继续加入少量浓硫酸，但此时不可溢流出溶液。 然后放置暗处5分钟，用移液管吸取100mL上述溶液，注入250mL锥形瓶中。,用0.02500mol/L 浓度的硫代硫酸钠标准溶液 滴定至溶液呈微黄色。加入1mL淀粉溶液，继续滴定至恰好蓝色退去为止。记录硫代硫酸钠的用量，计算溶解氧量。,溶解氧（O2,mg /L）= 式中：M硫代硫酸钠溶液浓度（mol/L ）V滴定时消耗硫代硫酸钠溶液体积（mL）,BOD5测定结果计算,对不经稀释直接培养的水样测定结果计算： 式中：C1-水样在培养前溶解氧的浓度（mg/L）C2-水样经5天培养后剩余溶解氧的浓度（mg/L）,对稀释后培养的水样：式中： B1-
7、稀释水（或接种稀释水）在培养前溶解氧的浓度（mg/L）； B2-稀释水（或接种稀释水）在培养后溶解氧的浓度（mg/L）； f1-稀释水（或接种稀释水）在培养液中所占的比例； f2-水样在培养液中所占的比例；,硫代硫酸钠溶液标定,于250mL锥形瓶中，加入100mL水和1g碘化钾；加入10.00mL 0.02500 mol/L重铬酸钾标准溶液；再加入5mL（15）硫酸溶液，密闭且摇匀。 静置5分钟后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定；待溶液变成淡黄色后，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好退去；记录用量。,式中： M硫代硫酸钠溶液的浓度(mol/L) V滴定时消耗的硫代硫酸钠溶液的体积(mL),一般稀
8、释水制备,在5-20L玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将吸入的空气先后经活性炭吸附罐及水洗涤后，导入稀释水内曝气2-8h，使稀释水中的溶解氧接近于饱和。,瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。 临用前每升水中加入氯化钙溶液，氯化铁溶液，硫酸镁溶液，磷酸缓冲溶液各1mL，并混合均匀。 稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。, 原因 对于不含和少含微生物的工业废水,其中包含酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氧化处理的废水,在测定BOD5时应进行接种,已引入能分解废水中有机物的微生物。
9、 当废水中存在着难于被一般生活污水的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。,接种稀释液制备, 方法 可选择以下任一方法获得适用的接种液。 城市污水,一般采用生活污水,在室温下放置一昼夜，取上清液用。 表层土壤浸出液，取100g花园或植物生长土壤,加入1L水,混合并静置10min，取上清液用。 用含城市污水的河水或湖水,污水处理厂的出水。 当分析含有难降解物质的废水时，在其排污口下游3-8km处取水样作为废水的驯化接种液。,一般驯化过程需要3-8d。,分取适量接种液，加入稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加入量为生活污水10mL；或表层土壤浸出液20-30mL；或河水，湖水10-100mL。接种稀释水的pH值应为7.2，BOD5值在0.3-1.0mg/L之间为宜。接种稀释水配置后应立即使用。, 配制,思考题,1.对稀释水的配制有哪些要求？ 2.如何配制接种稀释水？ 3.被测水样含有哪些物质时BOD5测定时需要用接种稀释水稀释？阐述其目的与原理。 4.怎样选择稀释倍数？有几种方法？ 5.溶解氧的测定方法有哪几种？对本实验采用的方法进行评价？,
