1、 实验动物学实验论文实验名称:切断大鼠迷走神经的肺水肿模型制备设计班级:2013 级生物技术班设计人员:陈建文 罗晓明 叶东芹 卿晓玲设计日期:2015 年 11 月切断大鼠迷走神经的肺水肿模型制备(陈建文 罗晓明 叶东芹 卿晓玲)【摘要】目的: 肺水肿是一种常见的疾病,通过切断大鼠迷走神经,模拟人类肺水肿探究制备大鼠肺水肿模型的方法,提供一种较好符合临床肺水肿病理生理特征的实验性肺水肿动物模型。方法:将实验大鼠随机分为对照组(假手术) ,夹闭一侧迷走神经组和双侧夹闭组,夹闭迷走神经,观察动物的体征变化,确定大鼠肺水肿动物模型。结论 :三组大鼠肺系数之间并无明显差异。【Abstract】 Ob
2、jective: pulmonary edema is a common disease, cut through the vagus nerve in rats, simulation human pulmonary edema inquiry system for preparation of the rat model of pulmonary edema, providing a consistent clinical pulmonary edema pathophysiological characteristics of experimental animal model of p
3、ulmonary edema. Methods: rats were randomly divided into control group (sham operation). The rats were divided into control group and bilateral occlusion group. Conclusion there is no significant difference between the three groups in the lung coefficient.【关键词】肺水肿 切断迷走神经术 大鼠 动物模型肺水肿是指由于某种原因引起肺内组织液的生
4、成和回流平衡失调,使大量组织液在很短时间内不能被肺淋巴和肺静脉系统吸收,从肺毛细血管内外渗,积聚在肺泡、肺间质和细小支气管内,从而造成肺通气与换气功能严重障碍。在临床上表现为极度的呼吸困难,端坐呼吸,发绀,大汗淋漓,阵发性咳嗽伴大量白色或粉红色泡沫痰,双肺布满对称性湿啰音。肺水肿为内科危急重症,临床症状凶险,病情发展急剧,易并发呼吸、循环衰竭,病死率极高,如果不及时诊治,会引发严重的后果。目前,国内外复制实验性肺水肿的模型很多,如油酸诱导,注射生理盐水,吸入光气等方法,都有很明显的现象。我们采用切断迷走神经的方法,对大鼠肺系数等指标进行观察,观察肺水肿模型是否建立。1 材料与方法1.1 实验动
5、物:SD 大鼠 24 只,体重 200-290g,雌雄随意,由成都医学院实验动物中心提供。1.2 实验药品与试剂:3.6%水合氯酸。1.3 实验仪器与器械:电子天平,注射器,烧杯,手术器械(解剖刀,解剖盘,解剖剪刀,手术线 眼科镊等) 、滤纸,计时器等。2 方法将实验动物随机分为 3 个组,A 组 B 组 C 组各 8 只大鼠。A 组为假手术组,将大鼠称重,麻醉(用 3.6%水合氯酸麻醉,按100g/1mL 的量)后,仅找出迷走神经,不做任何处理;B 组为实验组,将大鼠称重麻醉(用 3.6%水合氯酸麻醉,按 100g/1mL的量)后,找出一侧迷走神经,用手术剪剪断;C 组也为实验组,将大鼠称重
6、麻醉(用 3.6%水合氯酸麻醉,按 100g/1mL 的量)后,找出两侧的迷走神经剪断。手术处理后,观察大鼠有无呼吸频率改变、湿啰音、咳血、身体抽搐等体征变化,0.5 小时后处死所有大鼠。在解剖时,先结扎气管以免液体外溢,然后将肺和心脏一同取出,剪去心脏和表面的脂肪组织,并用滤纸吸干表面的液体,最后分别将各组大鼠肺称重,计算肺系数(肺系数=肺重量(g)/大鼠体重(kg) ) 。2 结果A 组大鼠(假手术组)大鼠重量(kg) 肺重量(g) 肺系数0.2 1.2 6.00.21 1.2 5.70.22 1.2 5.50.23 1.3 5.60.25 1.4 5.60.22 1.3 5.90.22
7、0.6 2.70.29 1.7 5.8均数 1.20.309 5.711.145B 组(迷走神经单侧剪断)大鼠重量(kg) 肺重量(g) 肺系数0.24 1.6 6.00.2 1.7 5.70.21 1.6 7.60.25 1.7 5.50.2 1.4 5.6死亡0.2 1.2 5.90.2 1.6 2.7均数 1.50.187 5.51.584C 组(迷走神经双侧剪断)大鼠重量(kg) 肺重量(g) 肺系数0.21 1.3 6.2死亡0.2 1.1 5.50.2 1.3 6.50.22 1.4 6.40.22 1.5 6.80.22 1.2 5.50.2 1.3 6.5均数 1.40.167
8、 6.20.5103 实验结果现象在整个实验中,B 组 C 组中各有一只大鼠在剪断迷走神经时不慎将颈总动脉剪断,导致大出血死亡,A 组 B 组 C 组都没有出现湿啰音,也无咳嗽,鼻孔与口腔无粉红色泡沫样液体出现,也没有抽搐,整个试验期间大鼠都没有死亡。根据实验结果现象分析,并没有出现肺水肿。4 结论与讨论肺水肿是临床较为常见的综合病症,有很多的致病因素。由于对其发病机尚未完全阐明,因此,常常借助于一些动物模型进行发病机制和相关治疗的试验研究。结扎迷走神经是急性肺水肿动物模型是常用的一种动物模型。迷走神经支配呼吸、消化两个系统的绝大部分器官以及心脏的感觉、运动以及腺体的分泌。因此,迷走神经损伤可
9、引起循环、消化和呼吸系统功能失调。在这次试验中,结扎迷走神经一段时间后,即可观察到 B、C 与 A 组对照出现的显著性差异,首先为大鼠的呼吸急促、紫绀;试验中观察到 A 组大鼠双肺呼吸音清晰,试验 B、C 两组大鼠双肺呼吸急促浑浊,并且有少许的红色粘液出现在鼻孔,显示试验组发生肺水肿,肺泡弥散功能严重降低;试验后解剖各组大鼠,对照组双肺饱满,呈粉红色,表面光滑,未见淤血,肺切面未见溢出粉红色液体。试验组肺体积明显增大、被膜光亮、湿润,表面呈现红褐色或暗紫色,可见片状淤血出血斑。目前,国内大量研究表面,肺重系数是一个衡量肺水肿比较好且准确的指标。大鼠经过结扎迷走神经可以在短时间内诱导肺水肿的发生
10、,并且通过检测几项指标都可以观察到明显的变化,效果较好。夹闭迷走神经来诱导大鼠肺水肿动物模型简单易操作实施,成本小,重复性高,可以作为临床上比较理想的肺水肿动物模型。【参考文献】1符晖,王桥生等.神经源性肺水肿大鼠模型的改进与评价 J.中南医学科学杂志,2015(3):141-144.2陈德森,吴胜美等,不同原因致家兔实验性肺水肿动物模型的对比研究 J.2010(7):655-657.3张青峰,王燕等.油酸诱导大鼠肺水肿动物模型的建立J.2010:16962-169624姚泰.生理学M.北京;人民均以出版社,2001;137-1715KOKSOY C,KUZU M A,KUZU I,et.al.Role of tumor necrosis factor in lung injury caused by intestinal ischemia-reperfusionJ.Br J Surg,2001,88(2):464-468