1、 猪瘟病毒 IgG抗体检测 ELISA试剂盒使用说明书【产品简介】猪瘟病毒（CSFV）是目前危害国内养猪业一种高发病率、高死亡率和高度接触传染的病毒。在猪的免疫预防工作中,最值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。在过高的抗体水平进行免疫,过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败；在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁猪的健康。该试剂盒检测反映抗体水平，利于指导免疫时机。【使用时间】猪瘟病毒疫苗免疫后免疫效果监测 平时的抗体监测【检测原理】包被经纯化的猪瘟病毒，抗猪 IgG抗体作为酶标记抗体，利用间接法来检测被检材料中是否含有猪瘟病毒抗体。【产品内容】1. 猪
2、瘟病毒抗原包被微孔板条 96Tx22. 酶标记物 22ml13. 样品稀释液 20ml14. 显色剂 A 12 ml15. 显色剂 B 12 ml16. 洗涤液（用前1：25稀释） 25 ml17. 猪瘟病毒抗体阳性对照血清 1.5 ml18. 猪瘟病毒抗体阴性对照血清 1.5 ml19. 终止液 12 ml110. 封口膜 6张11. 密封袋 1个12. 说明书 1份【操作步骤】1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。2. 取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，28保存。3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100l（阴阳性血清不用稀释，直
3、接使用） ；样品孔每孔先加样品稀释液90l，再加样品10ul（或样本1：10稀释后加100l） ；空白对照孔不加。4. 混匀，置37温浴30分钟。5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。6. 每孔加酶标记物100l（空白孔除外） 。7. 置37温浴30分钟。8. 洗涤，同步骤5。9. 每孔依次加显色剂 A、显色剂 B各50l，混匀，37避光反应10分钟。10. 每孔加终止液50l，混匀，置酶标仪450nm 处测各孔 A值（建议用双波长450nm、630nm） 。【结果判定】1. 阴性对照：正常情况下，阴性对照孔 A值0.1；2. 阳性对照：正常情况下，阳性对照
4、孔 A值0.4；3. 临界值（C.O.）的计算：临界值=0.15+阴性对照孔均值；所有阴性、阳性对照和样品的 A值均须减去空白平均值后作为计算值；阴性对照孔 A值大于0.10时应舍弃，如所有阴性对照孔 A值都大于0.10时须重复实验；阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。4. 结果判定：检测标本 A450值临界值判定为本试验阳性；检测标本 A450值临界值判定为本试验阴性。【注意事项】1. 操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。2. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。3. 样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。4. 洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。5. 所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。6. 微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可，未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。7. 剩余样品及废弃物应经121高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L 次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。【保存与有效期】于28避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。
