1、细菌学各论,了解各种细菌的形态、培养特性、致病因子及微生物学诊断。,李丹毒，白结核，芽孢球菌除淋膜， 若问芽孢菌有何，炭肿气疽破三梭， 这些细菌均阳性，其他细菌阴性多。,第一章 革兰氏阳性球菌,第一节 葡萄球菌属 Staphylococcus,广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。,分 类,（1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病（2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病（3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病,金黄色葡萄球菌S. aureus,一、形态球状，排列成葡萄串状，无芽孢和鞭
2、毛，个别形成荚膜。,二、培养及生化特性,1. 普通培养基上生长良好 2. 血平板上生长更佳，致病菌株溶血 3. 产生金黄色色素,4. 高度耐盐 5. 分解葡、乳、麦、蔗糖， 产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇。,高盐培养基 糖发酵试验,三、抗原性,1. 多糖抗原：磷壁酸中的核糖醇残基 2. 蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白人源菌株含SPA（Staphylococcus protein A),能与多种哺乳动物IgG Fc片段非特异性结合。 Ag-Ab(IgG)-SPA 有利于多种微生物抗原的检出。,四、抵抗力,抵抗力较强，能在干燥脓汁或血液中存活数月，80 30min可杀死，煮沸迅速死亡，对多种抗
3、生素产生耐药性。,五、致病性和毒力因子,侵袭性疾病：主要引起化脓性炎症。通过各种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。 毒素性疾病：由葡萄球菌产生的外毒素引起。,毒力因子主要包括酶和毒素，可引起两类疾病：,1.毒素(Alphatoxin)损伤细胞膜的毒素，对多种哺乳动物红细胞有溶 血作用，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用。,2.肠毒素(enterotoxin) 按抗原性不同，分为A、B、C1、C2、C3、D和E 7个血清型，均可引起急性胃肠炎即呕吐为主要症状的食物中毒。,3. 凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。（1）游离凝固酶
4、:使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。（2）结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。,凝固酶试验,+-,4.耐热核酸酶 、纤维蛋白溶酶、透明质酸酶等利于细菌扩散。,耐热核酸酶试验,-+,六、微生物学诊断,标本的采集 化脓性病灶采取脓汁、渗出液；败血症采取血液；脑膜炎采取脑脊液；食物中毒则分别采集剩余的食物、呕吐物和粪便。 直接涂片检查 分离培养 普通平板培养、血液琼脂平板、高盐培养基。,1 致病性葡萄球菌的鉴定： （1）产生凝固酶和耐热核酸酶 （2）产生金黄色色素，有溶血性 （3）发酵甘露醇 2 葡萄球菌肠毒素的检查： 作细菌分离鉴定的同时，接
5、种至肉汤培养基，培养后取滤液注射至6-8周龄的幼猫。,鉴定 ：纯培养物,第二节 链球菌属Streptococcus,链球菌属细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，广泛分布于自然界，多数不致病，有些可导致人或动物各种化脓性炎症、肺炎、乳腺炎、败血症。,一、分类,（一）根据抗原结构分,1.属特异性抗原（P抗原）：核蛋白抗原 2.群特异性抗原（C抗原）：多糖抗原 3.型特异性抗原：蛋白质抗原，又称表面抗原。多与菌体毒力与免疫力有关。,兰氏（Lancefield)用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分不同
6、型。,兰氏分群法,乳胶凝集试验, 型溶血性链球菌 菌落周围有不透明溶血环。多为条件性致病菌。 型溶血性链球菌 菌落周围形成完全透明的无色的溶血环。致病力强。,（二）根据溶血现象分类, 型链球菌 不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为不溶血性链球菌。无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔引起感染。,二、形态,球形或卵圆形，直径0.6-1.0um。呈链状排列，链长短不一。致病性菌链长，液体培养基中菌链长。,三、培养特性,大多数兼性厌氧，少数专性厌氧 营养要求复杂，需补充血液、血清、葡萄糖等。 血平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整齐的细小菌落。不同菌株溶血不一。,在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀
7、。,致病物质 ： 脂磷壁酸（LTA）：重要的粘附素M蛋白：抗吞噬作用 一旦病菌大量繁殖则产生链球菌溶血素、致热外毒素等毒性物质，透明质酸酶、链激酶、DNA酶等侵袭性物质。,四、致病性,所致疾病：可引起多种动物发病,猪链球菌病,猪链球菌（Streptococcus suis）2型,S. equi subsp. zooepidemicus ATCC35246,S. suis type 2 HA9801,五、微生物学诊断,标本的采集：采集适当的标本渗出液、脓汁、乳腺炎乳液、脑脊髓液、尿液和感染组织。 检验方法 （一）直接检查： 可直接涂片，革兰氏染色镜检。 （二）分离培养: 接种血平板，观察菌落形态和溶血情况。 （三）细菌鉴定：菌落形态、溶血特性、细菌形态、生化特性。如定群、定型，则要作血清学试验。,1.金黄色葡萄球菌可产生的毒素、酶及其致病作用。 2.链球菌产生的毒素、酶及其致病作用。 3.链球菌在血液琼脂培养基上的溶血表现。 4.链球菌的兰氏分群。 5.如何从污染的病料组织中分离致病性葡萄球菌？,复习思考题,
