1、学 生 毕 业 设 计（论 文）课题名称 黄酮含量在茯砖茶不同陈化处理的变化研究姓 名 陈训学 号 0808402-13学 院 化学与环境工程学院专 业 生物工程指导教师 库文珍讲师2012 年 5 月 28 日2012 届学生毕业设计(论文)材料（四）1湖 南 城 市 学 院 本 科 毕 业 设 计 （ 论 文 ） 诚 信 声 明本人郑重声明：所呈交的本科毕业设计（论文） ，是本人在指导老师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议，除文中已经注明引用的内容外，本设计（论文）不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以
2、明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。本科毕业设计（论文）作者签名：二 一 二 年 五 月 二 十 八 日0目 录摘要 1关键词 1Abstract. .1Key words 11 绪论 21.1 研究意义 21.1.1 茯砖茶的价值 21.1.2 黄酮的价值 21.2 国内外研究现状 .31.3 研究目的 .32 实验部分 32.1 实验材料 .32.2 实验仪器与试剂 .42.3 实验方法 .42.3.1 制造茯砖茶 42.3.2 茯砖茶的陈化处理 42.3.3 芦丁标准溶液的配制 52.3.4 标准曲线的绘制 52.3.5 样品的制备及测定 53 实验结果与分析 53.
3、1 芦丁标准曲线的线性 .53.2 黄酮得率的计算 .63.3 温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化 .73.3.1 前处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化 73.3.2 后处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化 713.4 通风与否对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化 .84 结论 8参考文献 9致谢 110黄酮含量在茯砖茶不同陈化处理的变化研究陈训(湖南城市学院生物工程专业 2012届学生）摘 要：通过分光光度法测定不同温度、通气状况等陈化条件下茯砖茶中黄酮含量的变化,并探讨茯砖茶储藏的适宜条件。结果表明,茯砖茶中黄酮含量在陈化条件下先随温度的升高而升高后随温度的升高而降低，茯砖茶处于自然通风条件的黄酮
4、含量低于处于不通风条件的黄酮含量。因此茯砖茶要保持黄酮含量最高应选择在不通风、40条件下储藏。关键词：分光光度法；茯砖茶；黄酮；陈化The Change of the Processing by the Flavonoid Content in Different Aging Fu Brick TeaChen Xun(2012 Year Student of Biological Engineering Major, Hunan City University)Abstract: To study of the most appropriate fu brick tea storage con
5、ditions. The change of the processing by the flavonoid content in different aging fu brick tea temperature and ventilation were determined by spectrophotometry. The results indicate that the content of flavonoid in fu brick tea aging conditions with first the temperature increasing of increased with
6、 temperature rise after reduced, fu brick tea in natural ventilation of the conditions of the flavonoids content was lower than in a ventilated condition of flavonoids content. So to keep the flavonoids content in brick tea in the highest should choose not ventilation, 40 storage conditions.Key word
7、s: Spectrophotometry；Fu Brick Tea；Flavone；Aging11 绪论1.1 研究意义1.1.1 茯砖茶的价值茯砖茶，是黑茶的一种。 本草纲目拾遗中记述，安化茶又称湖茶、茯砖茶，粗梗大叶，须以水煎，或滚汤冲入壶内，再次火温之，始出味，其色浓黑，苦味带甘，食之清神和胃，强身延年。 本草求真则记载陈年茯砖茶有“消宿食” 、 “消饮食”、 “消积食”、 “消腥肉之食，解青稞之热 ”、 “解酒食之毒”、 “养脾、食饱最宜” 等功能。上世纪五十年代以前，茯砖茶是用湖南所产的黑毛茶踩压成 90 公斤一块的篾篓大包，运往陕西泾阳筑制成砖。茯砖早期称“湖茶” ，因在伏天加工，
8、故又称 “伏茶”，因原料送到泾阳筑制，又称“ 泾阳砖”。1951 年湖南安化经过反复试验，就地加工茯砖茶获得成功。80 年代初期，湖北蒲圻羊楼洞茶场，引用湖南茯砖制法，也获得成功茯砖茶分特制和普通两种，主要区别在于原料的不同。特制茯砖全部用三级黑毛茶作原料，而普通茯砖，三级黑毛茶只占到 4045%。发花是茯砖茶加工工艺上与其他黑砖茶的主要区别，金花（冠突散囊菌）以及“菌花香” 也是茯砖茶在品质上与其他黑茶的主要区别。近年来，随着对黑茶研究的不断深入和人们对健康的追求，黑茶这一特殊的茶类开始广泛被消费者接受和喜爱。高档黑茶纷纷上市，历来边销的产品逐步转向内销，黑茶产业逐步进入一个全新的里程，黑茶
9、生产企业和茶叶品牌如雨后春笋般涌现。黑茶以陈为贵， “喝老茶、藏新茶 ”的风气已经在市场和消费者中流传。1.1.2 黄酮的价值 黄酮类是一种广泛存在于自然界的天然有机化合物，研究表明其具有特殊的生物效能，是一种自由基清除剂，可以还原 一生育酚的自由基，使其再生，起到自由氧清除剂的作用。黄酮类化合物还对过敏、感染、高血压、肿瘤和 AIDS 等疾病具有辅助治疗的作用，具有多种药用价值，其含量与原料的产地、处理的方法、分析方法有2很大的关系。1.2 国内外研究现状 黄亚辉等研究表明：在一定时间内，茯砖茶的陈化有助于内含物质的转化，茶汤香气宜人、滋味甘醇，但存放时间过久，其茶香消尽、陈气扑鼻、滋味淡薄
10、。随着贮藏年份的增加，茯砖茶香气中化合物数量减少，陈年茶的香气物质比新茶总含量显著提高。傅冬和等研究表明：茯砖茶加工过程中各种化学成分均有不同程度的减少，其中儿茶素、黄酮类及茶多酚总量减少最多，分别减少了 63.64%、51.52%、54.62%，氨基酸下降 36.84%，咖啡碱下降 10.85%，可溶性糖及水浸出物变化不大。尹军峰等认为：茶叶品质陈化，从广义上讲，就是茶叶在贮运销售过程中，因受各种环境条件的影响而发生一系列复杂的品质生化反应，导致茶叶品质劣变，茶叶品质陈化表现为干茶叶色泽由鲜变枯，汤色加深，茶汤收敛性减弱，滋味变淡，香气减弱并产生陈味。日本学者早在 70 年代就指出，茶叶子贮
11、藏中质变的原因是茶叶中某些化学成分在某种程度上由于空气中氧气的作用而发生自动氧化，吴小崇等通过比较试验认为绿茶在贮存过程中品质成分的氧化是导致品质下降的根本原因。综合国内外茶叶品质陈化研究的进展，多数将温度、氧气、水分、光线视为在贮藏过程中影响茶叶品质的因素。1.3 研究目的本实验采用索氏提取法提取茯砖茶中的黄酮，以芦丁作为对照，以亚硝酸钠硝酸铝氢氧化钠作为显色体系对茯砖茶中总黄酮含量进行分光光度法用分光光度法测定黄酮含量。研究茯砖茶在不同陈化条件下黄酮的变化，找出其中的最适合的陈化条件，对于茯砖茶的储藏具有重要的指导作用。32 实验部分2.1 实验材料 实验材料为以黑毛散茶发花的茯砖茶，于实
12、验室所发花。2.2 实验仪器与试剂主要仪器：721 型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)、FC104 电子天平( 上海精密科学仪器有限公司)、恒温培养箱、索氏提取器等。主要试剂：芦丁(化学标准品，含量 98，南京泽朗医药科技集团 )5%NaNO2 溶液 10%Al(NO3)3 溶液 4%NaOH 溶液2.3 实验方法2.3.1 制造茯砖茶选择一种品质优良的黑毛茶,并将黑毛茶进行发花，得到茯砖茶。2.3.2 茯砖茶的陈化处理将茯砖茶在-20 ，4 和 30 条件下保藏 7 天后，再将上述三组茶叶按通风和不通风条件以及在 30 、 40 、50 、60 、70 温度下进行陈化处理一个月。按表
13、1 进行分组：4表1 茯砖茶陈化处理分组情况表2.3.3 芦丁标准溶液的配制精密称取 120减压干燥至恒重的芦丁对照品 40mg 于 50 mL 容量瓶中，加 70%乙醇 30 mL，置水浴上微热使其溶解，冷却，加 70%乙醇稀释至刻度，摇匀。即得0.800 mg /mL 的芦丁对照溶液。2.3.4 标准曲线的绘制用吸量管分别吸取芦丁对照溶液 0 mL，0.5 mL，1.0 mL，1.5 mL，2.0 mL，3.0 mL，4.0 mL，5.0 mL（相当于 0 mg，0.4 mg，0.8mg ，1.2 mg，1.6 mg，2.4 mg，3.2 mg，4.0 mg 芦丁) 于 25 mL 容量瓶
14、中，加入 5%NaNO2 溶液 1 mL，混匀，静置 6 min; 再加入 10%Al(NO3)3 溶液溶液 1 mL，摇匀，静置 6 min; 继续加入 4%NaOH 溶液 10 mL，以 70 %乙醇定容至刻度，摇匀，静置 15 min，以 0 号作参比，用 1cm 比色皿，在 510 nm 的波长处测定各溶液的吸光度。以芦丁含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。2.3.5 样品的制备及测定将陈化处理过的茯砖茶粉碎，分别精确称取茯砖茶粉末 1.0g，用滤纸包裹置于索氏装置中，平底烧瓶加入 30 mL 70 % 乙醇，于 85 恒温水浴锅中索氏提取 1 h。冷却至室温，将提取液放于 10
15、0 mL 容量瓶中，以 70 %乙醇定容。移取 5 mL 提取液至550 mL 容量瓶，加入 5%NaNO2 溶液 1 mL，摇匀，放置 6 min; 再加入 10%Al(NO3)3溶液溶液 1 mL，摇匀，放置 6 min; 再加入 4%NaOH 溶液 10 mL，用 70 % 乙醇定容至刻度，摇匀，放置 15 min 后，于波长 510 nm 处比色测定吸光度值，用 70% 乙醇溶液做参比溶液。计算出黄酮类化合物的含量。3 实验结果与分析3.1 芦丁标准曲线的线性以芦丁含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，其回归方程为Y=0.2135X+0.0002，相关系数 R2=0.9999，表明
16、芦丁在 0-4.0mg 范围内有良好的线性。其芦丁标准曲线见图 1图1 芦丁标准曲线3.2 黄酮得率的计算将各组所测量的吸光度 A 代入芦丁的线性回归方程 Y=0.2135X+0.0002，可计算出稀释后黄酮的质量，然后乘以稀释的倍数，可得到黄酮的得率。各组黄酮得率见表2：6组次 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15吸光度 A 0.34 0.32 0.422 0.4 0.595 0.562 0.351 0.332 0.435 0.418 0.605 0.572 0.345 0.33 0.428黄酮得率 mg/g 31.831 29.958 39.513 37.
17、452 55.719 52.628 32.862 31.082 40.731 39.138 56.656 53.564 32.3 30.895 40.075组次 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30吸光度 A 0.415 0.596 0.567 0.3 0.286 0.395 0.378 0.454 0.435 0.255 0.23 0.315 0.298 0.367 0.346黄酮得率mg/g 38.857 55.813 53.096 28.084 26.773 36.984 35.391 42.51 40.731 23.869 21.52
18、7 29.489 27.897 34.36 32.393表2 黄酮得率表3.3 温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化3.3.1 前处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化选取在后处理温度30的条件下陈化处理的茯砖茶为样本，探究前处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化。以前处理温度为横坐标，以黄酮得率为纵坐标绘制曲线。图2 前处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化由图2可知当后处理条件不变的情况下，黄酮的得率随前处理温度的上升而增加。73.3.2 后处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化以后处理温度为横坐标，以黄酮得率为纵坐标绘制曲线。由图 3 可知黄酮的得率在 30-40之间随温度的上升而增加，在 40-7
19、0之间随温度的上升而减少。茯砖茶在陈化中后处理温度为 40时黄酮的得率最高。图3 后处理温度对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化3.4 通风与否对茯砖茶陈化中黄酮含量的变化图4 通风与否对茯砖茶陈化中黄酮得率的变化由图4可知茯砖茶在陈化中处于不通风条件比处于通风条件时黄酮的得率低。84 结论以上主要研究了不同温度和通风与否等陈化条件对茯砖茶中黄酮含量的变化，研究结果如下：1.陈化前处理温度对茯砖茶中黄酮的含量变化有影响，黄酮的得率随前处理温度的上升而增加，当前处理温度为 30时黄酮含量最高。2.陈化后处理温度对茯砖茶中黄酮的含量变化有影响，黄酮的得率在 30-40之间随温度的上升而增加，在 40-70
20、之间随温度的上升而减少。茯砖茶在陈化中后处理温度为 40时黄酮的得率最高。3.陈化通风与否条件对茯砖茶中黄酮的含量变化有影响，茯砖茶在陈化中处于不通风条件比处于通风条件时黄酮的得率低。以上结果表明：陈化温度和通风与否条件对茯砖茶中黄酮的含量变化有影响。本试验中黄酮含量最高的条件为前处理为 30，不通风，后处理温度为 40。参考文献：1 黄亚辉 , 周筠, 陈晓阳. 陈年茯砖茶品质特征的研究J. 茶叶科技创新与产业发展学术研讨会论文集, 2009, 3: 442-451.2 吴菁箐. 充氧辐照快速陈化新工艺对六堡茶品质影响的研究D. 广西: 广西师范院, 2010. 3 段慧. 福建乌龙茶陈化机
21、理初探D. 福建: 福建农林大, 2007.4 周健 , 成浩, 王丽鸳 , 等. 基于定义变量的 PLS 法鉴定新茶和陈茶的研究J. 江西农业学报, 2008, 20(7): 58-61.5 尹军峰, 罗龙新. 茶叶陈化原理及 FTS 茶叶保鲜剂的应用J. 中国茶叶, 1994, 2: 2-3.6 赵铭钦, 陈红华, 陈秋会, 等. 不同陈化条件下烤烟多酚类物质的动态变化及其与化学成分的相关分析J. 中国烟草学报, 2007, 13(4): 16-30.7 傅冬和，刘仲华，黄建安, 等. 茯砖茶加工过程中主要化学成分的变化J. 食品科学, 2008, 29(2): 64-67.9 林夏丹，李
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24、身后默默的支持着我。没有你们就不会有我的今天。谢谢你们，我的父亲母亲！育我成才者老师。在这里我要深深地感谢刘石泉副教授，为我提供良好的实验条件，在我感到困惑的时候为我细致的指导，在我有些松懈的时候给我亲切的督促，在我遇到困难的时候教我如何分析问题、解决问题。刘老师渊博的学识、严谨的治学态度、精益求精的工作作风和诲人不倦的高尚师德，都将深深地感染和激励着我。另外在实验过程中，库文珍老师、胡致远学长以及一起做实验的戴松柏、陆仁斌同学也给了我莫大的帮助，在此感谢他们！正是因为有了老师和同学们的帮助，我的实验才得以顺利地完成。在实验过程中我学到了许多，培养了自己独立思考问题的能力，学会了良好的思维方法，为我今后的学习和工作打下了坚实的基础，也会成为我人生经历中一笔宝贵的财富。感谢 0808402 班的同学们。四年来，是同学让我的大学生活变得更加丰富多彩，我们一起亲历了大学的别样生活，愿同窗友谊之树长青。本论文中引用了大量前人的研究成果，在此表示衷心的感谢。最后，再次向给予我论文指导和实验提供便利条件的老师们，以及给予我帮助的同学们表示由衷的感谢！并借此 向参加本论文评阅、答辩以及对本论文提出宝贵意见的所有专家表示衷心的感谢！谢谢！
