1、北京大学 1991 年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学一 名词解释1.拼接体 2.复制子 3.反馈调节 4.别构效应 5.抗体酶二 英译汉1.THF 2.ddTPP 3.ACTH 4.Hbs 5.tRNAm 6.micRNA 7.ACP 8.NADPH 9.Go 10.Cot1/2三 填空1.NAD+和 NADP+还原时在_增加一个吸收峰.2.常用的 DNA 超螺旋结构的嵌合剂是_3.在癌变过程中同工酶谱发生_4.哺乳动物的必须脂肪酸为_和_5.某些蛋白质前体都具有它的_肽,它们大都相当于_左右氨基酸的长度.残基侧链一般是_,位于肽链的_末端.6.糖蛋白中糖基与蛋白质肽链 之间可通过酰糖苷键
2、相结合,即_和_7.DNA 序列的末端终止法所用的工具酶是_8.E.Coli RNA 聚合酶的亚基组成为_,没有_亚基的酶称为核心酶,该亚基的功能为_9线粒体 DNA 的复制为_方式,大肠杆菌染色体的复制为_方式,X174 环状染色体和噬菌体 DNA 后期复制为_方式,真核生物染色体 DNA 复制为_方式10呼吸链电子传递速度受_浓度控制的现象称为_11胆固醇合成的限速酶是_,_浓度升高其活性下降12嘧啶环由_和_合成的13丙酮脱氢酶系统受_和_._三种调节控制14神经递质 5-羟色胺是由_衍生而成15乙酰辅酶 A 进入三羧酸循环,还是形成酮体,由细胞中_浓度决定16生物固氮是微生物利用_转变
3、成氨的作用四是非题1,编码区的翻译效率彼此不同( )2,酶的 Kcat 型抑制剂比 Ks 型抑制剂专一性更强( )3,紫外线照射可使 DNA 互补双链间形成 TT( )4,一个氨基酸残基就是一个肽单元( )5,DNA 复制需要 RNA 引物,RNA 复制则不需要引物( )6,蛋白质进化过程中构象是易变的( )7,由于遗传的密码兼并性,一个氨基酸可以有几种 tRNA,但常只有一种氨酰-tRNA 合成酶( )8,蛋白质在热力学上最稳定的构象是自由能最低的结构( )9,当一种大肠杆菌突变型为 DNA 聚合酶 III 的 3-5外切酶缺陷时,该突变型表现的特征为对紫外线敏感( )10,在酸性条件下,D
4、NA 分子上的嘌呤不稳定,易被水解下来( )11,严重糖尿病患者因其糖异生作用加强血酮症( )12,杀鼠药氟乙酸的毒性是由于其抑制了顺乌头酸酶从而阻断了三羧酸循环( )13,无糖膳食中用含有奇数碳脂肪酸比含有偶数脂肪酸作为食物更好( )14,高胆固醇血患者因服用 -谷固醇而引起血浆胆固醇水平升高,增加动脉硬化危险( )15,若 amytal 和抗霉素 A 阻断呼吸链的抑制百分数相同,amytal 的毒性更大( )五,分析与计算1,当谷氨酸 C3 上标记 C14,氨基标记 15N,在肝脏中氧化降解,同位素将出现在下列代谢物的哪个原子上, (1),琥珀酸,(2),天冬氨酸,(3),精氨酸,(4),
5、尿素2,今有以下四种蛋白质的混合物:(1)分子量为 15,000,pI=10；(2),分子量为 62,000,pI=4；(3),分子量为 28,000,pI=8； (4),分子量为 9,000,pI=6；若不考虑其它因素,当(A)用 CM-纤维素层析柱分离时,(B)用 Sephadex G50 凝胶层析柱分离时,试写出这些蛋白的洗脱顺序3,在以下修饰碱基中,何者在形成双链时氢键结合的性质不同于和它相关的普通碱基(1)2-甲基腺嘌呤(2)5-甲基胞嘧啶(3)5-羟甲基胞嘧啶(4)1-甲基鸟嘌呤4,假定下面的 DNA 双链分子是从右向左进行转录,写出 RNA 转录产物的序列5-ATTCGCTTAA
6、GCAA-33-TAAGCGAATTCGTT-55,某酶制剂的比活力为 42 单位/mg 蛋白质,每 ml 含 12mg 蛋白质,(1) 计算 1ml 反应液中含 5l 酶制剂时的反应初速度(2) 若 1ml 反应液内含 5l 酶制剂,在 10 分钟内消耗底物多少?为保证测定酶的初速度,所需要的最低底物浓度是多少?6,有一酶分子使其变性后,用溴化氰降解,在降解产物种得到一个未知氨基酸顺序的九肽,试根据以下实验结果,推断出此九肽的氨基酸顺序(1) 氨基酸分析表明,它含有 Ala,Arg,Cys,Glu,Lys,Met,Pro,Phe2,(2) 用 Edman 法降解得到一个 Pro 的衍生物(3
7、) 用胰蛋白酶水解得到一个游离 Arg,一个二肽和一个六肽,此六肽在 PH6.4 时呈电中性状态(4) 用胰凝乳蛋白酶降解得到一个二肽,一个三肽和一个四肽A,二肽在 PH6.4 时呈负电荷B,分析三肽发现里面含有硫C,在 PH6.4 时分析四肽，静电荷为+2，在 280nm 分析表明不含有芳香氨基酸六第一题非生化专业，第二题生化专业。（一）1如何判明 DNA 制剂的纯度和是否为天然双链分子2 如果细菌环状染色体的复制是双向的，并且从固定的复制起点开始，每个复制叉以 16um/min 的速度移动，细菌染色体长 1280um，完成整个染色体复制所需的时间是多少？当细菌在营养丰富的培养基中每 20
8、分钟分裂一次，也就是说第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制，此时染色体有几个复制叉？（二）1利用标记的 16SrRNA 和未标记的细菌 DNA 进行分子表明，在饱和时 100ugDNA 能结合0.071ug 的 16SrRNA（分子量为 5.3x105）,该细菌 Cell 含有 2.6x105道儿顿 DNA.试计算每个细菌基因组所含 16SrRNA 基因的拷贝数.2.用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒, 分出三条带。请设计实验，判断何者是开环 DNA，何者为线形DNA，何者为闭环环 DNA。 参考答案：一、1.拼接体：也叫剪接体，由 mRNA 前体及多种其他组分如细胞核小分子 RNA（SnRNA）和多
9、种蛋白因子组成。真核 mRNA 前体的剪接是在剪接体形成之后进行的。2.复制子：也叫复制单位。从一个复制起点到一个复制终点所包括的 DNA 序列。3.反馈调节：一种作用的结果或起因对这种作用的影响叫反馈，常见的反馈是作用结果对这一作用的抑制-负反馈。4.别构效应：也叫变构效应。酶和蛋白质分子发挥生物活性时具有的一种构象变化，常见于寡聚酶或蛋白质。由于一个或多个亚基受调节物作用构象改变，进而使其余亚基构象改变，别构效应是可逆的。5.抗体酶：具有酶活性的抗体。二、1.THF 四氢叶酸；2.ddTPP 2,3-双脱氧核苷三磷酸；3.ACTH 促肾上腺激素4.Hbs 镰刀形血红蛋白；5.tRNAm 蛋
10、氨酸 tRNA；6.micRNA 干扰 mRNA 的互补 RNA7.ACP 脂酰载体蛋白；8.NADPH 还原态尼克酰胺二核苷酸磷酸 9.Go 标准自由能变化；10.Cot1/2 表示复性一半时， DNA 单链初始浓度与时间的乘积三、1.340nm；2.溴化乙啶；3.改变；4.亚油酸、亚麻酸；5.信号肽、20 个、疏水性、N；6.O-糖苷键，N-糖苷键；7.Klenow；8.,辨认起始点9.D-环复制，滚环复制，双向复制；10.ADP，呼吸控制；11.HMG-CoA 还原酶，胆固醇12.氨甲酰磷酸，天冬氨酸；13.产物抑制，核苷酸的反馈调节，可逆磷酸化的共价调节14.色氨酸；15.草酰乙酸；1
11、6.其体内固氮酶系的作用将分子氮四、1.；2.；3.X；4.X；5.；6.X；7.；8. ；9.X；10. 11.X；12. ；13. ；14.X；15. 五、1.15N 出现在尿素中，14C 出现在琥珀酸中。2.CM-纤维素是阳离子交换层析树脂，所以 A 的顺序为 2-4-3-1当用 Sephadex G50 凝胶时，为分子筛层析，分子量大的先下来，B 的顺序是 2-3-1-43.（4）1-甲基鸟嘌呤，鸟嘌呤的第一位引入甲基后，不能和胞嘧啶形成 3 个氢键了。4.根据题意，转录模板是上面的那条链，所以 RNA 转录产物的序列是：3-UAAGCGAAUUCGUU-55.（1）5l 含活力单位：
12、5*10 -3*42*12=2.52 单位，初速度为 2.52mol/(ml.min)(2)10min 消耗的底物是 10*2.52=25.2mol/ml，为保证测定酶的初速度，底物消耗要低于5%，25.2*10 -3/0.05=0.504，所以最低底物浓度为 0.504mol/L.6 （1）由 CNBr 降解，可知 C 末端是 Met；（2）由 Edman 法可知 N 端是 Pro；（3）由胰蛋白酶水解得知 C 端三肽是 Lys-Arg-Met；（4）由胰凝乳蛋白酶可知 cC 端含有 Glu，含有 S 的氨基酸是Cys，该四肽的顺序是 Tyr-Arg-Glu-Met。所以此肽的顺序是：Pro
13、-Phe-Ala-Cys-Phe-Lys-Arg-Glu-Met六、第一组：1.（1）可以测定该溶液在 260nm 和 280nm 处的光吸收，纯 DNA 的 OD260/OD280=1.8，（2）可进行碱基含量分析，当为双链时 A=T，C=G2.（1）完成复制所需的时间：1280/32=40min， （2）20/40=0.5,说明前一轮复制一半时，有开始新一轮的复制，第二轮的起始会有 4 个复制叉，所以染色体上有 6 个复制叉。第二组：1.0.071/100=X/(2.6*109) X=0.1846*10716S rRNA 拷贝数=0.1846*107/(503*105)=30482.一般情
14、况下超螺旋 DNA 迁移率快，线性 DNA 其次，开环 DNA 最慢。北京大学 1992 年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学一. 名词解释1.ribozyme 2.衰减子 3.第二信使 4.酮体 5.钠钾离子泵 二. 英译汉1.DHU 2.GHS 3.cccDNA 4.NADP 5.GH 6.MSH 7.cGMP 8.LTR 9.ATCase 10.PRPP三 填空1. DNA 的合成方向_,RNA 的转录方向_,蛋白质合成方向_2. hnRNA 经过 RNA 拼接 过程去掉_留下_3. 原核生物蛋白质合成的起始 tRNA 是_,它携带的氨基酸是_而真核生物蛋白质合成的起始 tRNA 是_,
15、它携带的氨基酸是_4. 将重组 DNA 引入受体细胞这一过程称为_5. tRNA 的二级结构呈_形状,它的 3末端为_,5末端为_6. 胰岛素受体蛋白存在于_7. 胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂为_,它作用于酶活性中心的_8. 维持蛋白质三级结构最主要的作用是_9. 高等动植物含有一个不饱和键的脂肪酸,其双键位置一般在第_碳原子之间10 性激素与靶细胞受体结合后,进入细胞核与_作用从而调节基因表达11.维生素 D3 的活性形式是_12.纤维素和淀粉分子结构的区别在于,纤维素的葡萄糖分子是以_连接而成,而淀粉是以_连接而成.13.在脂肪酸生物合成中,酰基的载体为_,在脂肪酸氧化中酰基的载体为_14.
16、氨基酸代谢的一碳单位由_供给,核苷酸生物合成中的一碳单位由_供给.15.糖酵解过程在细胞的_部位进行,TCA 循环在细胞的_部位进行,氧化磷酸化在细胞的_部位进行.四 是非题1.激素鸟二醇的原初作用在细胞核( )2.在细胞培养物由供氧条件转为厌氧条件时葡萄糖利用速度增加( )3.氰化物引起缺氧是由于抑制底物磷酸化( )4.细胞液中脂肪酸的合成是需要线粒体产生乙酸，而乙酸是由乙酰辅酶 A 将它带出线粒体膜( )5.所有蛋白质的克分子消光系数都是一样的( )6.促甲状腺激素是由垂体前叶分泌的,含糖基的单链蛋白质( )7.抑制剂对酶的抑制作用是酶变性失活的结果. ( )8.糖苷键对碱稳定,而易被酸水
17、解. ( )9.限制性内切酶的生物学作用是分解外源 DNA( )10 别构酶的动力学曲线特点是都为 S 型( )11.DNA 是遗传物质,而 RNA 不是遗传物质( )12.双螺旋 DNA 复制后,子代 DNA 不含亲代成分( )13.在蛋白质合成中,起始合成时起始 tRNA 结合核糖体的 A 位( )14.每个原核细胞染色体上只有一个复制起点,而每个真核细胞染色体是有多个复制起点. 15 原核生物转录启动子有 3 个重要部位:-10 区,-35 区,SD 序列( )五 分析计算1含有一个九肽，分别用（1）胰蛋白酶（2）胰凝乳蛋白酶（3）羧肽酶（4）溴化氰处理，试标出对肽链的作用部位 Leu
18、Met Arg Pro Alu Lys Try Sen Try2.一个大肠杆菌中含有 106 个蛋白分子,假设每个蛋白分子,平均分子量为 40000,并且所有分子都处于 螺旋,试计算大肠杆菌中蛋白质肽链的长度.3.1ug 纯酶(分子量为 92000).在最适条件下催化反应速度为 0.5umol/min,计算(1)酶的比活力 (单位/蛋白质) (2)转换数4.请分别指出(1)DNA 复制(2)RNA 复制(3)蛋白质合成三个过程的忠实性如何保持的 5.用纯化的脂肪酸合成酶进行脂肪酸的合成(1)假设底物乙酰辅酶 A 的甲基为 3H 所标记,那么形成的软脂酸(16:0)中哪些 H 原子将被 3H 标
19、记.(2)假设用底物为丙二酰辅酶 A,其两个 H 都被标记呢?六. 附加题1.E.Coli 的一种体外蛋白合成系统中,由多聚核苷酸 AUG UUU UUU UUU UUU 指导 fMET Phe Phe Phe Phe 合成 ,在某种抗生素存在下,这个多聚物只能指导合成 fMET Phe,试问 1,这种抗生素抑制了多肽合成的那一步.2,设有受抑制的寡肽或二肽，在合成终止时与什么 tRNA 相连？2.假定有一只体重为 250 克的大白鼠,其呼吸强度为 500vlO2/g 体重/小时，请计算 24 小时能产生多少克 ATP（ATP 分子量为 507）参考答案一、1.核酶：具有酶活性的 RNA。2.
20、衰减子：大肠杆菌色氨酸操纵子中一段 DNA 序列，既是终止信号，也是调节信号，只有当缺少色氨酸时，该操纵子中的结构基因才能通过衰减子而进行转录。3.第二信使：激素和细胞膜受体结合，受体将激素信号通过细胞内的物质如 cAMP、cGMP 等传递到细胞内部，信号逐渐放大，引起细胞内反应。这些传递激素信号的物质如 cAMP、cGMP 称为第二信使。4.酮体：乙酰乙酸、-羟基丁酸和丙酮 3 种物质的总称，酮体过多会导致中毒。5.钠钾离子泵：是跨膜转运钠钾离子的膜蛋白，需要 ATP，是四聚体蛋白质。二、1.DHU 二氢尿嘧啶； 2.GHS 还原型谷胱甘肽； 3.cccDNA 共价闭合环状 DNA 4.NA
21、DP 尼克酰胺二核苷酸磷酸； 5.GH 生长激素； 6.MSH 促黑素细胞激素7.cGMP 环鸟苷酸； 8.LTR 长末端重复序列9.ATCase 天冬氨酸转氨甲酰酶 10.PRPP 1焦磷酸 -5磷酸核糖三、1.5-3 5-3 N-C；2.内含子，外显子；3.fMet，fMet，tRNAMet，Met4.转化/转染；5.三叶草，CCA，多数为 G；6.细胞质膜；7.DFP（二异丙基氟磷酸） ，Ser 残基；8.疏水作用力；9.910；10.染色体11.1，25-二羟 D3；12.-1，4-糖苷键，-1，4-糖苷键；13.ACP，CoA-SH；14.S-腺苷蛋氨酸，四氢叶酸；15.细胞浆，线粒
22、体，线粒体内膜，叶绿体内膜四、1.X；2.X；3.X；4.；5.X；6.X；7.X；8.；9.；10.X；11.X；12.X；13.X；14.；15.X五、1. LeuMet Arg ProAla LysTyrSer-Arg溴化氰 胰蛋白酶 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 羧肽酶 B2.此蛋白质残基数为：4000/110=363.6，以螺旋存在时的长度为：363.6*0.15=54.54nm，106 个蛋白质的总长度为：54.54nm*106=5.5cm3.已知此酶 1g 催化反应速度 0.5mol/分，活力单位是 0.5U，比活力是 0.5U/1g,0.5*103U/mg，转换数是 0.5/60=0
23、.0083mol/秒。4.（1）DNA 复制的忠实性保持机制是：以母链为模板，通过碱基互补配对合成新的 DNA，修复机制有光修复、切除修复、重组修复等。（2）RNA 合成的忠实性保持机制是：以 DNA 的一条链为模板，按照碱基互补配对进行转录，顺式作用元件的作用，转录后加工中酶的作用。（3）蛋白质合成的忠实性保持机制是：mRNA 自身序列的稳定性（mG 帽子、poly-A 结构等） ，密码子和反密码子通过氢键配对，氨酰-tRNA 合成酶的选择性，副密码子的作用，翻译后运输、分泌、加工中信号肽、导肽及各种酶的作用。5.(1)脂肪酸从左侧开始，奇数位上的碳原子带有 3H.(2)标记物为 OOC-C
24、3H2-COSCoA，合成的软脂酸有 14 个 3H，3H 在奇数位上。第一组1.（1）抑制多肽合成移位这一步骤。（2）和 Phe-tRNA 相连，在肽链合成终止前，肽链和最后一个加入的 tRNA 相连，当 tRNA 和肽链分离后才能离开核糖体。2.500*250*24*3/(22.4*106)=0.402mol, 507*0.402=203.71北京大学 1998 年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学一， 填空题（应该是选择题，但是原题没有收录选择项，只有正确答案） 。1，用茚三酮试剂确定氨基酸是靠它与下面（ ）功能集团起作用。2，影响酶催化效率的因素是（ ） 。3，在适当条件下，盐酸胍变性
25、球蛋白的可逆性，可证明（ ） 。4，蛋白质中形成肽键平面的原因是（ ） 。5，三个氨基酸（Asp,Leu,Lys）的混合物，经过一个 sulphonoted polysturene 阳离子交换树脂粒，用 PH5 的缓冲液洗脱，洗脱液中氨基酸出现的顺序是（ ） 。6，溶液 A 的 PH 为 7.0，溶液 B 的 PH 为 6.0 的两个溶液的体积相等，则其 H+的含量（ ） 。7，0.01N 醋酸的 PH 为 3.4，0.01N HCl 的 PH 是 2，用 0.01N NaOH 分别去中和 15mL 的以上醋酸和盐酸，试问需用（ ）NaOH。8,酶活性的国际单位（I.U.）定义为在 30。C
26、下，将底物转化为产物，在（ ）速度时的酶量。9，在 pH5.0 的经 DEAE-纤维素柱纯化酶，此酶的比活从 2.2U/mg 提高到 303U/mg，表明（ ）10，10-5 毫克分子的乳酸脱氢酶，每秒催化 10 微克分子丙酮酸的生成，此酶的 turnover number 是（ ） 。11，胰凝乳蛋白酶中电荷延迟系统是指（ ） 。12，在整体代谢的调节环节调节中，别构效应可调节（ ） 。13，A 因子存在时，一个酶的初速度对底物浓度曲线为 S 形，而当 A 因子浓度增高时，此线左移，说明 A 因子是（ ） 。14，一个酶的 Km 为 3X10-5M，Vmax 为转化 8000 克分子底物/分
27、/克分子酶，底物浓度为 3X10-5M时，初速度是（ ）15，在一个 2 底物-2 产物酶反应系统中，对其中一个底物的 Km 值是（ ） 。16，一氧化碳有毒是因为（ ） 。17，胶原蛋白的特性是（ ） 。18， 螺旋与 折叠的区别（ ） 。19，促进酶分子催化反应的机制是（ ） 。20，酶可以改变（ ） 。21，转化丁二酸根为反丁二烯酸根所需要的酶是（ ） 。22，激素 17-雌二醇发挥效应的位置在（ ） 。23，3-5cAMP 的性质是（ ） 。24，谷氨酸+丙酮酸= 酮戊二酸+丙氨酸，需要的辅酶为（ ） 。25，细胞液中脂肪酸的合成需要线粒体产生乙酸，乙酸是由（ ）带出线粒体膜。26，氨
28、对哺乳类细胞有害是因为（ ） 。27，U 第一位上 N 原子来源是（ ） 。28，嘌呤生物合成关键步骤是（ ） 。29，当一个蛋白质样品不纯时，要测定它的性质，可用的方法有（ ） 。30，在同一细胞中，RNA 和 DNA 杂交性质是（ ） 。31，DNA 的 Maxam-Gilbert 化学法序列分析对底物的要求是（ ） 。32，单链 DNA 分子溶液形成双链的复性过程是（ ）级反应。33，真核细胞中的 RNA 聚合酶 III 负责（ ）的合成。34，DNA 和 RNA 的差别在于（ ） 。35，一个操纵子的启动区产生一个降低的突变后会（ ） 。36，一个 珠蛋白 mRNA 的 cDNA 克隆
29、可以在大肠杆菌中正确的进行肽的生物合成，而染色体基因的克隆不能，这是因为（ ） 。37，分析了一个细胞中的蛋白质发现其 Ile 少于正常的情况，这是因为有好多 Ile 为 Val 所代替，这可能发生了（ ）突变。38，大肠杆菌核糖体的性质（ ） 。39，许多细胞含有一种酶，可以使 DNA 上少数 C 甲基化，产生 5-甲基-C，这种甲基化部位成为CG 转变成 AG 的突变热点，这是因为（ ） 。40，限制性内切酶的性质（ ） 。41，DNA 生物合成的过程（ ） 。42，如由 5-脱氧尿嘧啶所引起的突变使一种嘧啶为另一种嘧啶所替换，这种转变叫做（ ） 。43，假如一个 mRNA 样品，其 G
30、占 29%，则 C 为（ ） 。44，在大肠杆菌中合成蛋白启始过程（ ）反应是必需的。45，遗传密码的兼并性是指（ ） 。二，填空1，蛋白质的最低自由能构型经常为_残基之间的共价交连而加强。2，非极性环境中，例如膜的内部，蛋白质可以折叠成_侧链向外_侧链彼此相互作用。3，糖原异生受_抑制，被_激活。4，由于_调控_酶而加速脂肪合成。5，维生素 B12 是_，它是_酶的辅基，其作用是_。6，尿素循环中的调控酶是_，存在于_中，_是此酶的正调节物。7，由于_酶的遗传缺陷使_在尿中积累，加 FeCl3 使尿变成橄榄色。8，由于_酶的遗传缺陷使_在尿中积累，见氧气变成黑色。9，膳食中_抑制_酶从而影响
31、胆固醇酯的合成。三，问题1，一个激素多肽链有 29 个氨基酸，顺序为 Glu,Val,Lys,Asn,Cys, Phe,Arg,Trp,Asp,Leu,Gly,Ser,Leu,Glu, Ala,Thr,Cys,Arg,His,Met,Asp,Gln,Cys,Tyr,Pro,Gly,Glu, Glu,Lys,a,若没有二硫键存在，胰蛋白酶水解可有几个肽。b,在 pH7.5 时激素净电荷是多少，若 pKa 值已知。c,提出一个设计方案证明上述激素有二硫键。2，为什么 SDS 电泳中小分子迁移得最快？3，如何解释酶活性与 PH 的变化关系，假如其最大活性在 pH=4 或 pH=11 时，酶活性可能涉
32、及那些侧链？4，写出下列生化反应式，并注明催化的酶及辅酶。a, hydrolysis f, reduction of a double bondb, Oxidative decarboxylation , g, isomerigationc, phosphorolysis h, dehydrationd, non oxidative decarboxylation i, condensatione, thiolysis j, phosphorylation5,胃液大约 pH2 而分泌 H+到胃中，分泌细胞内为 pH7，假定 H+梯度没有膜电势影响，计算形成梯度的 G（RT=620 卡/mol）
33、 。若 ATP 水解使 H+分泌，计算每个 ATP 水解分泌的 H+数目，若 ATP 水解为-7.3 千卡/克分子，细胞内 ATP 浓度为 10-3M，ADP 为 10-5M 和磷酸为 10-3M.6,T1 核糖核酸酶水解一个纯的 tRNA，得到一个寡聚核苷酸，再用蛇毒二脂酶水解此寡聚核苷酸，产生 pA,pC,pU 和 U，其比例是 1：2：2：1，仅靠此以及 tRNA 分子 3端核苷酸序列的知识，请写出此寡聚核苷酸序列。7，在设计测定酶活性实验时，希望测得的最初速度对底物浓度的小量波动并不敏感，S/Km 应该大于多少才能使底物浓度有 10%差别时，所测得的初速度的误差小于 1%？（假定符合米
34、氏公式）8，你克隆了一个有机体的 cDNA 基因，并标记此 cDNA 作为探针。此基因在基因组中只含有一个，并且基因上无插入序列，也无 EcoR I 位点。如用此探针去与 EcoR I 切割的基因组 DNA southern 转移膜杂交。那么你最可能找到几条放射性条带？如果你把此机体基因组 DNA 的一个 BamHI 片段克隆，并能与你原有的 cDNA 探针杂交。现在你用这个标记的 BamH I 片段去与刚才的 southern 转移膜杂交，你得到了几条放射性条带。请用图示说明 EcoR I 和 BamH I 位点与此基因末端的可能相互关系。 参考答案一、1.氨基 2.温度、pH、底物浓度、酶
35、浓度；3.蛋白质的空间结构是靠次级键维持的；4.肽键的偏双键性质；5.AspLeuLys；6.氢离子浓度为 10-7 和 10-6；7.1 分钟转化 1 微摩尔底物所需的酶量。8.初速度；9.酶的纯度提高了 137.7 倍；10.10/0.01=1000 微摩尔/秒；11.Asp102-His57-Ser195 12.反应的方向和速度；13.激活剂；14.4000 克分子底物/分/克分子酶；15.远远小于其底物浓度时，这一双底物反应可以看做单底物反应；16.一氧化碳可以使细胞色素 c 和血红蛋白中的二价铁氧化为三价铁17.耐水解；18.主链的弯曲不同；19.降低活化能；20.反应速度，但不改变
36、平衡点；21.差向异构酶；22.细胞核中的 DNA 分子；23.第二信使；24.磷酸吡哆醛；25.柠檬酸；26.中枢神经系统中毒，机理是头部氨和 -酮戊二酸结合生成谷氨酸，-酮戊二酸减少，三羧酸循环减弱，ATP 减少，引起脑功能障碍。27.天冬氨酸；28.第一步反应和次黄嘌呤之后的分支反应；29.抗原-抗体亲和反应；30.DNA 的转录过程；31.需要大量的高纯度的末端标记的 DNA 样品；32.一级反应；33.5S rRNA、tRNA 和多数小分子 RNA 组成；34.DNA 中的核糖变为脱氧核糖，T 变成 U；35.导致该操纵子内结构基因的转录速度下降；36.染色体 DNA 分子远远大于一
37、个珠蛋白基因，表达载体无法携带大的 DNA 片段；37.Ile 密码子的一个碱基发生突变，使 Ile 密码子变成 Val 的密码子；38.70S39.DNA 分子中甲基化 C 在 DNA 复制时被误当作 T，结果新合成链同一位置的 G 错误变成 A；40.对自身 DNA 的标记和限制外来 DNA 的作用。41.DNA 的合成过程就是复制过程；42.替换；43.29%；44.第一个进入肽链的蛋氨酸甲基化；45.密码子的第三位具有摆动性。二、1.半胱氨酸；2.-螺旋或 -片层，前者更为普遍，疏水侧链朝外，亲水侧链相互作用。3.ATP，柠檬酸；4.胰岛素，脂肪合成酶；5.钴氨素，甲基丙二酸单酰 Co
38、A 基团变位；6.氨基甲酰磷酸合成酶，肝线粒体，乙酰谷氨酸；7.苯丙氨酸 4-单加氧酶，苯丙酮酸；8.尿黑酸氧化酶，尿黑酸；9.胆固醇，3-羟-3-甲基戊二酸单酰辅酶 A 还原酶三、1.3 个片段，胰蛋白酶水解精氨酸、赖氨酸羧基参与的肽键。7 个酸性氨基酸，4 个碱性氨基酸，全分子静电荷为 3-。对角线电泳。2.小分子进入分子筛胶粒内部，SDS 电泳时移动速度取决于分子的大小，分子越小移动的速度越快。3.酶活性和 pH 的关系在于：首先影响酶活性中心氨基酸残基的 R 基团的解离状态；其次影响酶的空间构象。在 pH4 时酶活性最大，有可能酶的活性中心包含天冬氨酸和谷氨酸；在 pH11 时酶活性最
39、大，有可能呢此酶的活性中心包含精氨酸、赖氨酸。4.写出结构式a, hydrolysis f, reduction of a double bond 水解反应，比如降解一个双键b, Oxidative decarboxylation , g, isomerigation 氧化脱羧，c, phosphorolysis h, dehydration 磷酸水解d, non oxidative decarboxylation i, condensation 非氧化脱羧e, thiolysis j, phosphorylation 硫解作用5.G=2.303*RT*log10-2/10-7=2.303*6
40、20*5=7130 卡/mol,7300/7130=1mol6T1 核糖核酸酶切割 RNA 后，产生 3-磷酸尿嘧啶为末端的单核苷酸或寡核苷酸；蛇毒磷酸二酯酶切割 DNA/RNA，产生 5-单核苷酸根据题意，所有 tRNA 3末端碱基序列是 3-ACC，整体序列为 3-ACCUUU-57.S/Km 应该大于 50.8.对于基因组中只有一个基因，且无插入序列和 EcoRI 位点，此探针与 EcoRI 切割的基因组 DNA进行 Southern 转膜杂交，可能找到 1 条放射性条带。当用标记的 BamHI 作为探针与刚才的 EcoRI 切割的基因组 DNA 片段进行 Southern 转膜杂交，由
41、于此探针和原有的 cDNA 杂交，说明 BamHI 片段探针的切点在这一基因序列之内，仍然可以得到 1 条放射性条带。北京大学 1999 年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学一 名词解释米氏常数（Km）磷酸戊糖途径 调节子 酶辅助因子 cori 循环与巴斯德效应 滚动环复制二 结构式TPCK；尼克酰胺； GC 配对；IP3三 填空1, 蔗糖是否为还原糖_。2，糖苷键的两种类型_和_。3，DNA 的一条链序列为 GTCAATG，那么另一条链的序列为_。4，_常数表征酶的催化效率。5， 因子的催化活性是_和_。6，常见的遗传缺陷病有_，_，_，_；常见的放射性标记的同位素是_，_， _，_。7，D
42、NA 复制过程中动物是以_为能源，E. Coli 以_为能源。8，生物体中产能最多的生化反应过程是_。9，_发现 TCA 循环，_发现化学渗透学说。10，真核生物 rRNA 拼接过程中左端的拼接点顺序为_右端为_，切除_结构。11，生长激素是由_产生的。12，EColi DNA Pol I 经酶切，得到大小片段，其中大片段具有_酶活性和_酶活性，小片段具有_酶活性。13，必需脂肪酸有_和_。四 回答1， 作动力学曲线区分酶的可逆性抑制与不可逆抑制？2， 比较 ATP 与 ppi 在磷酸键及生物学功能方面的异同。3， 真核生物至少需要 31 种 tRNA 才能识别 61 种密码子，而线粒体中 t
43、RNA 只有 22 种，为什么？4， 阐明衰减子对操纵子的调控。5， 糖酵解和糖异生过程中涉及的不可逆反应和限速步骤。五 计算3， DNA 半保留复制。15NDNA 在 14N 培养基上培养一代后，14NDNA 与 14N-15NDNA 杂交分子之比是多少？4， 正常 DNA 的超螺旋密度为-0.05，在无拓扑异构酶条件下当复制到超螺旋密度为 0.07 时，由于正超螺旋的阻力而不能继续复制，求此时的复制百分数。5， 2ADP=ATP+AMP，已知ADP AMP ATP求：1，该反应的能荷。 2，Keq（各浓度为平衡态浓度） 。6， L=T+W,若 a=-0,05，则 DNA 可以复制的百分比。
44、参考答案：一、1.米氏常数：即 Km，是酶的特征常数，当反应速度达到最大反应速度一半时底物的浓度。2.磷酸戊糖途径：糖分解代谢途径之一，6-磷酸葡萄糖首先脱氢、脱羧转变为 5-磷酸核糖，经过一系列分子重排，产生不同的磷酸单糖，进入糖酵解。3.调节子：受一种调节蛋白控制的几个操纵子构成的调节系统。4.酶的辅助因子：酶分子中非蛋白质组成成分，包括维生素和无机离子等。5. cori 循环与巴斯德效应：在耗氧的同时葡萄糖消耗减少，乳酸堆积终止的现象称为巴斯德效应。肌肉厌氧分解产生的乳酸进入血液，经肝脏转变为丙酮酸参与糖异生后再变为葡萄糖，葡萄糖再次经过血液送回到肌肉的过程。6. 滚动环复制：复制时首先
45、形成共价闭环双链，然后正链切开，产生游离的 3-羟基和 5-磷酸末端，5-磷酸末端细胞膜结合固定，DNA 聚合酶以环状负链为模板，从正链的 3-羟基末端加入脱氧核苷酸，使新生链延长，通过滚动合成新的正链。二、TPCK： 尼克酰胺：维生素 pp； GC 配对：G 和 C 形成 3 个氢键； IP3：肌醇三磷酸三、1.不是还原糖；2.N-糖苷键，O-糖苷键；3.3-CAGTTAC-5 ；4.米氏常数；5.终止转录因子，NTPase 活性；6.血友病，苯丙尿酮症，白化病，糖尿病，3H,32P,32S,131I,14C；7.三磷酸核苷，三磷酸核苷；8.氧化磷酸化；9.Krebs，Mitchell；10
46、.GGAGGG，CUCUCU，内含子；11.垂体前叶；12.聚合酶，3-5外切核酸酶，5-3外切核酸酶；13.亚油酸，亚麻酸四、2.ATP 和 ppi 的比较：ATP 含有 3 个磷酸酯键，ppi 有一个，ATP 末端的 2 个磷酸酯键水解放出较多的能量，生物需要能量时 ATP 水解，ppi 为无机物，不具有生物功能。3.（1）线粒体 DNA 编码的蛋白质数量少于核基因，大部分线粒体蛋白质是由核基因编码的。（2）线粒体的遗传密码不同于细胞核。4. 衰减子：大肠杆菌色氨酸操纵子中一段 DNA 序列，既是终止信号，也是调节信号，只有当缺少色氨酸时，该操纵子中的结构基因才能通过衰减子而进行转录。色氨酸操纵子 mRNA 的前导区编码一个 14 肽，前导区的 RNA 以 1、2 和 3、4 配对的形式出现，转录停止在终止信号区， 。当环境中
