实验十 酪蛋白的制备,一、目的要求学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。 二、原理牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀,再通过离心而获得,糖类小分子由于处于清液中而分离,沉淀物中所含的脂肪通过有机溶剂抽提而去除,最终得到纯白色、晶状酪蛋白。,三、试剂与器材试剂:0.2 mol/L HAc-Na buffer、95%乙醇、乙醚器材:离心机、水浴锅、pH计,四、操作方法10mL牛奶 预热 调pH至4.7 室温冷却 离心得沉淀 于离心管内悬浮 离心得沉淀 于离心管内去脂肪 漏斗过滤 滤干 洗涤 洗涤(脂肪完毕) 带滤纸烘干 称重 计算。,40C,40C预热的醋酸buffer 10mL,边加边搅拌,5000r/min5min,4mL H2O,5000r/min5min,20mL乙醇,5min,20mL乙醇微搅动,20mL乙醇乙醚混合液(1:1),20mL乙醚,60C,4h,五、计算实际获得百分率= 100%六、注意事项 1、牛奶与缓冲液要预热 2、缓冲液要缓加缓搅 3、在滤纸上样品的脱脂过程要搅动,不得 破滤纸 4、实验环境要保持空气流通,门窗要开,酪蛋白质量(g)10mL 牛奶,七、思考题 1.在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液调pH到4.8? 2.乙醚、乙醇作用是什么?,