1、人体寄生虫学实验,海南医学院病原生物学教研室,实验总则,实验目的,加深理解、巩固和掌握本学科的基本理论知识。 掌握寄生虫学实验的基本技能，即通过观察标本及操作，牢固掌握常见寄生虫，特别是与诊断有关的形态特点及其实验诊断技术。 必须通过理论学习、标本观察、实验操作和技术训练，使其理论与实践紧密结合，以达到上述目的。,寄生虫标本的类别和实验方法,大体标本 针插标本 玻片标本：某些体积较小的寄生虫成虫、幼虫及蠕虫虫卵和原虫，分为以下四种类型：, 一般新鲜液体涂片标本如粪便、尿液等的新鲜涂片标本。镜检时多不加盖片而直接用低倍镜观察（4、10 ），有时用高倍镜复核。因液体具有流动性，故镜台必须保持水平，
2、不能倾斜，必要时应加盖玻片后再转换高倍。, 胶封液体虫卵标本 一块载玻片 + 一块大盖玻片 + 一块小盖玻片 中性树胶, 染色涂片标本固定染色，不加盖片封固，注意避免磨损，此类标本经常须用油镜观察（100），油镜使用后，要求标本上的镜油必须抹干净而又不损坏涂膜。 蠕虫、昆虫的盖片胶封标本虫体较厚，制成封片标本后，往往较一般组织学或病理学标本的厚，镜检时注意勿使标本的上下面放错。,显微镜使用的方法 1. 打开电源调节光强度标本平置于载物台低倍镜观察找物体粗螺旋调节细螺旋调节看清物体 2. 高倍镜观察时：将待观察部分移向视野中央，再转换高倍镜。 3. 油镜观察时：低倍镜下找到观察的标本平面，滴加镜
3、油，然后转油镜观察。,光学显微镜的使用与维护,维护的方法 领取时应双手持镜；镜头不干净，用拭镜纸轻擦；使用完毕时，将标本取下；已使用的油镜，用拭镜纸沾取少量清洁剂（二甲苯）拭擦镜头,由于寄生虫标本的厚薄和颜色深浅不同，大小不一致，在观察标本时，要求的放大倍数和对光线的强度也不相同，故应随时作出适当调整才能看清物象。对要求在镜下观察的示教标本，一般有指针指在视野中央，观察时，请勿移动玻片，以免影响其他同学观察。检查新鲜未经杀死的活标本时，必须注意避免污染双手和其他用具，以防感染及造成病原的传播。,生物学绘图原则,仔细观察标本，找出典型标本，再描绘，力求做到真实准确。(点线图) 形象正确 比例恰当
4、 色彩正确 标字规范 注释准确,生物绘图的要求,形态结构要准确，比例要正确，要求真实感，立体感，精美而美观。 图面力求整洁，铅笔要保持尖锐，尽量少用橡皮。 绘图大小适宜，位置略偏左，右边留着注图。 绘图的线条要光滑、匀称，点要大小一致。 绘图要完善，字体大小要均匀，不能潦草。注图线要直、间隔均匀，且一般多向右边引出，图注部分接近时可用折线，但注图线之间不能交叉，图注要尽量排列整齐。 绘图完成后在图的下方注明图名及放大倍数。,1）绘图：要求绘制，除绘疟原虫时采用彩色笔外，皆用普通HB铅笔。绘图时，用点线绘制，不要涂抹。有关结构要写于点线图一侧，或分列两侧。绘图适当，注意大小比例。 2）描述：对主
5、要特征的描述应简明扼要。 3）要按时完成作业。,实验报告,注意事项,1、实验前预习，进实验室要穿白大衣，带齐实验指导、教材、作业本及绘图工具（HB铅笔及彩色铅笔），领取显微镜。 2、各组负责人先去505室领取标本，按座号发给同学；实验结束后再将标本送回505室，交给老师。 3、实验时应严格遵守实验室规则 不迟到、不早退，并保持肃静。 服从老师的指导和安排，并严格按照实验指导认真作好各项实验。, 观看示教标本：各实验组轮流到504室观看示教标本，每小组10分钟，按时轮换。如想再仔细观看，待各小组轮换完后，再去观看，请自觉遵守。 实验过程中，不得擅自移动示教标本，如有问题请老师解决以免搞错，影响其
6、他同学观察。 要爱护公物。 4、实验后应将污染的标本和玻片等物放在指定地方，并清洗干净。每次实验应安排值日，做好清洁卫生。 5、边观察、边思考、理论联系实际，不断提高分析问题和解决问题的能力。,实验一,蠕虫,似蚓蛔线虫（蛔虫）,Ascaria Lumbricoides (round worm),一、目的要求,掌握：蛔虫受精卵及未受精卵的形态特点； 粪便直接涂片法。 熟悉：蛔虫成虫的基本形态特征。 了解：幼虫和成虫的致病作用。,1受精蛔虫卵 形态：宽椭圆形颜色：棕黄色大小：4575m3550m结构：卵壳厚，蛋白质膜厚，卵内有一大而圆的卵细胞（新鲜粪便中），卵细胞两端与卵壳之间有新月形空隙,2未受
7、精蛔虫卵形态：长椭圆形颜色：棕黄色大小：8894m3944m结构：卵壳及蛋白质膜均较薄，卵内含有许多折光性强的屈光颗粒（卵黄颗粒）,3无蛋白质膜卵无色透明观察时应注意勿与其他虫卵（特别是钩虫卵）和植物细胞相混淆。,4感染期虫卵受精卵在外界经过一定时间可发育为感染期虫卵，卵内含一条幼虫。新鲜粪便中不能见到此虫卵。,感染期虫卵,5成虫： 虫体圆柱形，两端较细。活时呈粉红色，死后呈灰白色。雌虫较大，尾端尖直；雄虫较小，尾端向腹侧卷曲。虫体前端有“品“字形排列的唇瓣。,“品“字形唇瓣,6虫体内部结构： 蛔虫的生殖器官,7病理标本： （1）胆道蛔虫病：可见蛔虫钻入胆道、胆囊，严重的可见钻入肝脏。,（2）
8、蛔虫性肠梗阻： 蛔虫扭结成团，完全或部分阻塞肠道。,（3）蛔虫性肠穿孔： 因蛔虫性肠梗阻，导致肠组织缺血坏死，蛔虫自肠腔内穿出。,实验诊断（Diagnosis）,病原学诊断 查虫卵 粪便生理盐水直接涂片法（三张检出率可达95%） 浓集法 查幼虫：痰液 查成虫：粪便排出、试验性驱虫,蛔虫卵的生物学绘图,受精蛔虫卵： 宽椭圆形 蛋白质膜厚 卵壳厚 大而圆的卵细胞,未受精蛔虫卵： 长椭圆形 蛋白质膜薄 卵壳薄 屈光颗粒,毛首鞭形线虫(鞭虫),Trichiris trichiura(whipworm),一、目的要求,掌握：鞭虫卵的形态特征。 了解：鞭虫成虫的形态,1鞭虫卵 形态：腰鼓状/纺锤状 颜色：
9、棕黄色 大小：50-54m22-23m 结构：卵壳厚，两端各有一塞状透明栓，内含一个卵细胞（新鲜粪便中）,二、内容与方法,2成虫 形似马鞭状，虫体的前3/5细长，后2/5较粗，灰白色，雌虫较长，尾端钝圆不弯曲，雄虫较短，尾向腹面卷曲。,3病理标本： 鞭虫寄生于大肠肠壁,鞭虫感染造成直肠脱垂,病原学诊断：粪便直接涂片法饱和盐水漂浮法改良加藤厚涂片法,4鞭虫的病原学检查方法,蠕形住肠线虫(蛲虫),Enterobius vermicularis (pinworm),目的要求,掌握 蛲虫卵的形态特征 熟悉 蛲虫成虫的外形特征诊断蛲虫病的技术操作,虫卵,形态：柿核状 颜色：无色透明 大小：50-60m20-30m 结构：卵壳较厚，卵内含一条幼虫(蝌蚪期胚蚴),成虫,乳白色，线头样 雌虫尾端尖直虫体较大8-13mm0.3-0.5mm 雄虫尾端卷曲虫体较小2-5mm0.1-0.2mm 头端有头翼 咽管下段膨大形成咽管球,头翼,头翼,蛲虫雌虫,蛲虫雄虫,蛲虫病的表现：烦躁不安、肛门、会阴部皮肤瘙痒,雌虫在肛周产卵,病原学检查,肛周取样查虫卵 肛门拭子法（棉签拭子法、透明胶纸法） 注意：清晨便前检查,
