1、实验室 主题 文件编号 JCXT-PT-SH-005第 1 页 共 49 页胸 科荆州市 传 染 病 医院生化室-AMY（-淀粉酶）标准操作程序第 3 版 第 0 次修改-淀粉酶（-AMY）实验原理：-淀粉酶主要来源于胰腺和唾腺分泌。血清水平升高和急性胰腺炎，其它胰腺紊乱以及腮腺炎和细菌性腮腺炎有关。发生胰腺炎时，淀粉酶的活性快速升高，在发作 6-8 小时内表现出来。在高水平维持一到三天，然后快速返回到正常值，反映了淀粉酶有效的肾清除率。在肝脓肿，急性肝细胞损伤，肝硬化，肝癌，胆管癌和胆囊炎中可发现淀粉酶水平降低 。淀粉酶是一种相当小的蛋白质，因此它随时准备过滤到尿液中去。尿液中淀粉酶浓度增加
2、的时间比血清中更长。在一个两小时收集的尿样中检测淀粉酶的含量是检验胰腺炎的一个很好的测验。方法-淀粉酶的测定是利用 CNPG3。这种底物直接与 - 淀粉酶发生反应，不需要辅酶。从底物中释放出 CNP，每分钟吸光度增加与标本中 - 淀粉酶的活性成正比。吸光度增加在 410/480nm 测定。-淀粉酶CNPG3-CNP + CNPG2 +葡萄糖 +麦芽三糖标本：病人准备：无特殊要求。类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。血清应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液，随机或限时收取。标本稳定性：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液淀粉酶使结果升高。血清淀粉酶在 2025稳定一个星期，避免微生物降
3、解作用，在 28时稳定一个月。对于尿液，酸性 pH 值可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前 pH 值应调至大约 7.0。仪器与材料:仪器：奥林巴斯 AU400 生化分析仪材料：科华 -淀粉酶试剂盒试剂组成MES 缓冲液（PH6.0 ） 36.1 mmol/L醋酸钙 3.60 mmol/L硫氰酸钾 750 mmol/LCNPG3 1.63 mmol/L其中含有稳定剂，表面活性剂和防腐剂。注意：1. 此试剂为体外诊断用。2. 不要摄食，吞服有害。3. 防腐剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。起草人 操作人 批准人 生效日期张德艺
4、王科 姜孝芳 2012-01-01实验室 主题 文件编号 JCXT-PT-SH-005第 1 页 共 49 页胸 科荆州市 传 染 病 医院生化室-AMY（-淀粉酶）标准操作程序第 3 版 第 0 次修改试剂准备：科华的 -淀粉酶是即开即用的，无需特殊准备。精密度： 批内 CV=5%；批间 CV=10%。准确度： 测定值相对偏差=10%线性范围：0-1200U/L试剂的贮存：1.不要对标本呼吸，咳嗽或打喷嚏，避免标本受唾液淀粉酶的影响。2.当保存于 28，不开盖情况下至标签的失效期。3.开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定 30 天。变质指示：试剂变色表明试剂已分解，不能继续使用。校准：标准液的准备
5、：标准液（RANDOX 复合校准血清（水平 II） 货号：CAL2350 批号：683UN）用吸量管准确吸取 5.0ML 超纯水溶解混匀至少 30 分钟。质控：在每一批标本中都应把临床实验室室内比对（201201）做为未知标本进行分析。操作程序（逐步地）：AU400 开机1.确认两瓶清洗剂有足够的量。2.打开蒸馏水供应系统的阀门。3.如果没有设定自动开机，请按分析仪器上的POWER ON键。4.确认打印机为开机并处于联机状态。5.在Start Condition屏幕，输入所需信息，并按 F2 退出。6.如果要求输入密码，请输入密码。7.确认仪器上的在线试剂的位置是否正确、数量（体积）是否充足，
6、不足请添加并在系统状态中的试剂状态检查试剂。8.在急诊台 Wash1 的位置的试管中加满一支 1N HCL 的样品针清洗液。开始分析:1.把定标、质控、和标本架放在架子传送带上。2.用鼠标点击屏幕最上方的START ANALYZER图标。3.点击 F2 退出键，退回到主屏幕。分析参数血清参数样品体积 20 微升 试剂体积 1000 微升 波长 405nm 方法 Rate读点 5/10 温度 37尿参数样品体积 10 微升 稀释水 0 微升试剂 1 体积 1000 微升 稀释水 0 微升试剂 2 体积 n/a 稀释水 n/a波长 410/480 方法 Rate起草人 操作人 批准人 生效日期张德
7、艺 王科 姜孝芳 2012-01-01实验室 主题 文件编号 JCXT-PT-SH-005第 1 页 共 49 页胸 科荆州市 传 染 病 医院生化室-AMY（-淀粉酶）标准操作程序第 3 版 第 0 次修改读点 5/10 温度 37完整的实验参数与操作程序可以在 AU640 用户手册中查到。计算：无需手工计算，在 37每个标本的结果自动以 U/L 打印。报告结果:参考范围 ： 血清： 103 U/L24 小时尿： 30 U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。不正常结果的处理程序：根据仪器参数的正常值会打印异常标志。报告格式：自
8、动地打印 37U/L 的报告操作过程的限制性：OlympusAU400 血清测定淀粉酶的线性范围是 0-1200 U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。超范围的标本也可以在四份生理盐水中加一份血清进行手工稀释，轻轻地混匀，在 AU400 上当常规标本，结果乘以 5。干扰物质：1. 不要用嘴吸取试剂或标本，以免唾液淀粉酶的污染。实验室研究表明，螯合剂如抗凝血剂柠檬酸盐和 EDTA 将会干扰这个测定。2. 研究结果表明淀粉酶测定受以下物质干扰：样本中的血红蛋白=500mg/dlg、胆红素=20mg/dl、甘油三酯=2500mg/dlL 对测定结果的影响可忽略。起草人 操作人 批准人 生效日期张德艺 王科 姜孝芳 2012-01-01
