1、实验七 生化反应培养基制备,一、目的,1、掌握各类培养基的名称和成分； 2、掌握各类生化反应原理和结果； 3、掌握各类培养基制备程序及注意事项。,二、内容,1、糖发酵培养基 300ml1组； 2、双糖铁培养基 150ml2组+7组； 3、蛋白胨水培养基150ml3组； 4、葡萄糖蛋白胨水培养基150ml4组、5组； 5、枸橼酸盐培养基 150ml6组。,三、操作,1、称量 一定要先注一层水在烧瓶底层，然后倒入粉剂药粉； 2、溶化 反复溶化到肉眼见不到较大颗粒为止；溶化前需标注水线，供溶化后补水；溶化时需要玻棒搅拌，注意不要使培养基溢出；,3、调节pH 到7.4，蛋白胨水pH调至7.2； 4、分
2、装 每组25支试管分装；糖发酵培养基和双糖铁培养基分装2/5高度，其他的（葡萄糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸橼酸盐培养基）1/3高度；糖发酵管中小倒管一定要排空其中气体；,5、高压灭菌 含糖培养基（糖发酵、双糖铁、葡萄糖蛋白胨水培养基）10磅压力灭菌，其他的（蛋白胨水、枸橼酸盐培养基）15磅压力灭菌； 6、摆斜面、冷却、放置冰箱保存,四、结果记录,记录颜色、斜面、高层斜面、分析各生化实验选用什么培养基。,五、课后小结,本次实验称量和灭菌温度非常重要，希望大家多加注意。,附注：,1、双糖铁培养基 成分：蛋白胨1g、牛肉膏3g、NaCl 5g、乳糖10g、葡萄糖1g、硫代硫酸钠0.2g、硫酸亚铁0.2g、琼脂16g、蒸馏水1000ml、0.4酚红46d。 2、糖发酵培养基 成分：蛋白胨水或肉膏汤（pH7.47.6）1000ml、所需糖、醇或苷类物质510g、1.6溴甲酚紫乙醇溶液1ml。,3、蛋白胨水 成分：蛋白胨20g、NaCl 5g、蒸馏水1000ml。 4、葡萄糖蛋白胨水 成分：蛋白胨5g、葡萄糖5g、K2HPO4 5g、蒸馏水1000ml。 5、枸橼酸盐培养基 成分：NaCl 5g、硫酸镁0.2g、磷酸二氢胺1g、枸橼酸钠5g、蒸馏水1000ml、K2HPO4 1g、琼脂20g、1溴麝香草酚兰酒精溶液10ml。,
