1、生物碱精制纯化传统方法一般用阴离子交换树脂分离纯化生物碱,解吸时需要用酸、碱或盐类洗脱剂,会引入杂质,给后来的分离带来不便,换用吸附树脂则可避免此类问题。刘俊红等将 3 种大孔吸附树脂(D101,DA-201,WLD-3 )应用于延胡索生物碱的提取分离,方法是让延胡索水提取液通过已处理过的树脂柱,用水洗至流出液无色,然后分别用 30%,40%,50%,60%,70%,80%,90% ,95%乙醇依次洗脱,收集各段洗脱液,进行薄层鉴别。结果从树脂上洗脱的延胡索乙素占总生药量 D101 型为 0.069%,WLD-3 型为 0.072%,DA-201 型为0.053%。树脂柱用 40%乙醇洗脱后除
2、去了干扰性成分,便于用 HPLC 法测定,保护了色谱柱,且经过大孔吸附树脂提取分离的延胡索生物碱成品体积小,相对含量高,产品质量稳定,具有良好的生理活性。罗集鹏等将大孔吸附树脂用于小檗碱的富集与定量分析,把黄连粉末以 70%甲醇超声提取 30min,加到已处理的大孔树脂小柱上,用 pH 值为 1011 的水洗脱,再用含 0.5%硫酸的 50%甲醇 80ml 洗脱,洗脱液用 10%氢氧化钠调至碱性后,于水浴上挥去大部分溶剂,并转移至 10ml 量瓶中,用水稀释至刻度,以 HPLC 法测定,结果小檗碱与其他生物碱能很好地分离。表明大孔吸附树脂对醛式或醇式小檗碱具有良好的吸附性能,且不易被弱碱性水解
3、吸,可用于黄连及其制剂尤其是含糖制剂中小檗碱的富集和水溶性杂质的去除。杨桦等采用大孔吸附树脂比较并筛选乌头类生物碱的提取分离最佳工艺条件,将川乌水提取液制备成 8ml/g 浓缩液,上柱,测定总生物碱的含量,结果该方法可分离出样品中 85%以上的乌头类生物碱,同时可除去浸膏中总量为 82%的水溶性固体杂质。6 使用方法大孔吸附树脂使用方法树脂使用前,需根据使用要求,进行程度不同的预处理,是将树脂内孔残存的惰性溶剂去除。树脂预处理方法有:在交换柱或提取器内加入高于树脂层 10cm 的 95%以上的乙醇浸渍 4 小时,然后用蒸馏水淋洗至流出液在试管中用水稀释不浑浊时为止。最后用水反复洗涤至乙醇含量小
4、于 1%或无明显乙醇气味即可。树脂层面上保持 25mm 液体,以免干柱。备用。新离子交换树脂用 2-4BV 的 95%以上的乙醇或甲醇以 12BV/hr 的速度过柱(如有气泡产生,须赶出气泡),然后用蒸馏水以 12BV/hr 的速度淋洗至流出液在试管中用水稀释不浑浊或无明显乙醇气味时为止,树脂层面上保持25mm 液体,以免干柱。备用。2) 过柱:将要处理的原液以 14BV/hr 的流速通过交换柱,树脂层中不能有气泡,(实验用交换柱要求树脂装填高径比3,生产中建议树脂装填高度 2 米左右,吸附流速 1-4BV/hr。) 检测流出液中目的产物的泄漏量,泄漏量达到进口浓度的 10%时,为吸附终点。解
5、吸:用 12BV 的蒸馏水置换出树脂层中的原液,根据不同需要可用适量蒸馏水洗涤树脂层。用乙醇或甲醇等有机溶剂以 12BV/hr 的速度通过树脂层,以洗脱目的产物,收集洗脱液,即为浓缩了的目的产物。再生:用蒸馏水淋洗树脂层至无醇味,然后用 4%NaOH 溶液以 12BV/hr 淋洗树脂层23hr ,用蒸馏水洗至中性, 即可进行下一周期使用。解吸剂可选用乙醇、甲醇、丙酮等。树脂强化再生方法:当树脂使用一定周期后,吸附能力降低或受污染严重时需强化再生,其方法是在容器内加入高于树脂层 10cm 的 3-5%盐酸溶液浸泡 2-4 小时,然后进行淋洗过柱。继用 3-4BV 同浓度的盐酸溶液过柱,然后用纯水
6、洗至接近中性 ;再用 3-5%的氢氧化钠溶液浸泡 4 小时。最后淋洗过柱,用同浓度的 3-4BV 氢氧化钠溶液过柱,最后用纯水清洗至 PH 值为中性,备用。大孔吸附树脂使用注意事项该类树脂在通常的储存及使用条件下性质十分稳定,不溶于水、酸、碱及有机溶剂,也不与它们发生化学反应。搬运、装卸操作应轻缓,堆放稳定、规则,勿猛烈摔打。如洒落会导致地面湿 滑,要注意防止滑倒。储存此种材料的储存温度请勿高于 90,最高使用温度 180。湿态 0以上保存。储存状态下请保持包装密封完好,以防失水;如发生干燥失水,应以乙醇浸泡干态树脂约 2 小时,用清水洗干净后再重新包装或使用。严防冬季将球体冻裂。如发现冻结现象,请于室温下缓慢融化。运输或储存过程中严防和有异味、有毒物品及强氧化剂混杂堆放。1